O efeito do precondicionamento isquêmico na expressão gênica do endotélio vascular do intestino de ratos submetidos a isquemia/reperfusão

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Miranda, Celina Teresa Castelo Branco Couto de [UNIFESP]
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5120931
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Resumo: Objetivo: determinar o perfil da expressão gênica relacionado à resposta inflamatória, apoptose e adesão celular no intestino de ratos isogênicos submetidos a isquemia e reperfusão (IR) e tratados com precondicionamento isquêmico (PCI). Métodos: 30 ratos (EPM-Wistar) distribuídos em 5 grupos de 6 animais receberam anestesia e laparotomia. O período de isquemia foi padronizado em 60 minutos e o período de reperfusão em 120 minutos. O PCI foi padronizado em 5 minutos de isquemia seguida de 10 minutos de reperfusão realizado antes da IR. O grupo controle (GC) foi submetido apenas a anestesia e laparotomia. Os demais grupos foram submetidos a isquemia isolada (GI), IR (GIR), PCI + isquemia (GI+PCI) e PCI + IR (GIR+PCI). Foi retirado fragmento de intestino delgado para análise da expressão gênica por reação em cadeia da polimerase em tempo real, com transcrição reversa (qPCR-RT). Foram estudados genes relacionados à resposta inflamatória, apoptose e adesão celular. Resultados: nos animais do GIR 77,38% dos genes foram hiperexpressos, mostrando uma clara relação da lesão da IR com a resposta inflamatória, apoptose e estímulo à adesão celular. Nos grupos que receberam PCI predominou o padrão de hipoexpressão gênica, em 83,33% dos genes do GI+PCI e 76,19% no GIR+PCI. A análise dos dados por famílias/agrupamentos mostrou perfil semelhante de hiperexpressão no grupo GIR, entretanto nos grupos que receberam PCI ocorreu predominantemente hipoexpressão de genes relacionados à inflamação, promotores de apoptose e da adesão celular. Conclusão: a IR promoveu uma hiperexpressão de genes relacionados à resposta inflamatória, promotores de apoptose e adesão celular. Por outro lado, o PCI mostrou conferir proteção ao endotélio vascular intestinal por redução da expressão de genes pró-inflamatórios, pró-apoptóticos e estimuladores da adesão celular.
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Os demais grupos foram submetidos a isquemia isolada (GI), IR (GIR), PCI + isquemia (GI+PCI) e PCI + IR (GIR+PCI). Foi retirado fragmento de intestino delgado para análise da expressão gênica por reação em cadeia da polimerase em tempo real, com transcrição reversa (qPCR-RT). Foram estudados genes relacionados à resposta inflamatória, apoptose e adesão celular. Resultados: nos animais do GIR 77,38% dos genes foram hiperexpressos, mostrando uma clara relação da lesão da IR com a resposta inflamatória, apoptose e estímulo à adesão celular. Nos grupos que receberam PCI predominou o padrão de hipoexpressão gênica, em 83,33% dos genes do GI+PCI e 76,19% no GIR+PCI. A análise dos dados por famílias/agrupamentos mostrou perfil semelhante de hiperexpressão no grupo GIR, entretanto nos grupos que receberam PCI ocorreu predominantemente hipoexpressão de genes relacionados à inflamação, promotores de apoptose e da adesão celular. Conclusão: a IR promoveu uma hiperexpressão de genes relacionados à resposta inflamatória, promotores de apoptose e adesão celular. Por outro lado, o PCI mostrou conferir proteção ao endotélio vascular intestinal por redução da expressão de genes pró-inflamatórios, pró-apoptóticos e estimuladores da adesão celular.Objective: to determine the profile of gene expression related to inflammatory response, apoptosis and cell adhesion on inbred mice subjected to intestinal ischemia and reperfusion (IR) and treated with ischemic preconditioning (IPC). Methods: thirty rats (EPM-Wistar) distributed in 5 groups of 6 animals, were underwent anesthesia and laparotomy. The ischemia time was standardized in 60 minutes and the reperfusion time in 120 minutes. IPC was standardized in 5 minutes of ischemia followed by 10 minutes of reperfusion accomplished before IR. The control group (CG) was submited only to anesthesia and laparotomy . The other groups were submited to ischemia (IG), IR (IRG), ischemia + IPC (IG+IPC) and IR + IPC (IRG+IPC). It was collected a small intestine sample to analyse by polymerase chain reaction in real time with reverse transcription (RT-qPCR). We studied genes distributed in clusters relatives to inflammatory reaction, apoptosis and cell adhesion. The expression of each gene in each group was compared with the CG. Results: in animals from GIR 77.38% of the genes were upregulated showing a clear relationship between response to IR and inflammatory response, apoptosis , cell adhesion. In the groups that received IPC, the genes expression was downregulated in 83.33% from IG+IPC and in 76.19% from IRG/IPC. Data analysis by clusters showed a similar profile of overexpression from GIR. However, in the groups that received IPC, the genes related to inflammatory response, apoptosis and cell adhesion were downregulated. Conclusions: the response to IR promotes an overexpression of genes related to inflammatory response, apoptosis and cell adhesion. On the other hand, IPC was associated with protetion of intestinal endothelium for reduction of expression of pro inflammatory genes , pro apoptotic genes and cell adhesion stimulators.Dados abertos - Sucupira - Teses e dissertações (2017)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)122 f.https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5120931http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50362porUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP)Isquemia intestinalPrecondicionamento isquêmicoExpressão gênicaEndotélio intestinalÓxido nítricoIntestinal ischemiaIschemic preconditioningExpression geneIntestinal endotheliumNitric oxideO efeito do precondicionamento isquêmico na expressão gênica do endotélio vascular do intestino de ratos submetidos a isquemia/reperfusãoEffects of ischemic preconditioning on the genic expression of vascular endothelium in intestine ischemia/reperfusion in ratsinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPEscola Paulista de Medicina (EPM)Ciência cirúrgica interdisciplinarEfeitos decorrentes de proced. biológicos experimentaisAlterações funcionais e histopatológicas pós-operatóriasORIGINALCelina Teresa Castelo Branco Couto Miranda PDF A.pdfCelina Teresa Castelo Branco Couto Miranda PDF A.pdfTese de doutoradoapplication/pdf4195927https://repositorio.unifesp.br/bitstreams/1c23d552-13e7-495f-a498-0d46ba0c7a21/download35b3077f9cd44d3e92f080e0eca22474MD5111600/503622024-03-01 11:05:12.592oai:repositorio.unifesp.br/:11600/50362https://repositorio.unifesp.brRepositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestopendoar:34652024-03-01T11:05:12Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false
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