Caracterização clínica, molecular e imunológica de pacientes com síndrome poliglandular autoimune do tipo 1

• Autor(a) principal: Weiler, Fernanda Guimarães [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=3741792; https://repositorio.unifesp.br/handle/11600/46297
• topic: autoimunidade; poliendocrinopatias autoimunes; candidíase mucocutânea crônica; hipoparatireoidismo; insuficiência adrenal; mutação; anticorpos; autoimmune polyendocrinopathies; chronic mucocutaneous candidiasis; hypoparathyroidism; adrenal insufficiency; autoimmunity; mutation; antibodies

Introdução: Síndrome poliglandular autoimune do tipo 1 (SPA1) é um distúrbio autossômico recessivo, clinicamente definido pela presença de ao menos dois componentes da tríade candidíase mucocutânea crônica (CMC), hipoparatiroidismo e insuficiência adrenal. Outras doenças autoimunes também podem estar presentes e geralmente as primeiras manifestações surgem na infância. A síndrome é resultante de mutações no gene AIRE, que codifica uma proteína responsável pela manutenção da autotolerância através da expressão, no timo, de proteínas próprias do organismo e deleção dos linfócitos T autorreativos. Entretanto, a apresentação clínica e as características moleculares e imunológicas da SPA1 não são conhecidas no Brasil. Objetivos: Caracterizar o quadro clínico dos pacientes brasileiros com SPA1, pesquisar mutações em AIRE e determinar possíveis correlações entre genótipo e fenótipo, além de avaliar autoanticorpos e realizar estudo funcional de uma nova mutação. Pacientes e métodos: As manifestações clínicas foram avaliadas através de questionário e foram realizadas dosagens de autoanticorpos contra interferon tipo I e interleucinas 17A, 17F e 22. Os 14 éxons do gene AIRE e as regiões intrônicas adjacentes foram analisados através de sequenciamento direto a partir de DNA genômico. Estudo in vitro de uma das mutações identificadas (c.560C>G) foi realizado através de imunofluorescência de células HeLa transfectadas com plasmídeos contendo os genes selvagem e mutado. Resultados: Identificamos 13 pacientes com diagnóstico clínico de SPA1 e em todos eles o primeiro sintoma surgiu ainda na infância. Vinte diferentes manifestações clínicas foram observadas, sendo que CMC esteve presente em todos estes pacientes e foi a primeira manifestação em 77% dos casos. Hipoparatiroidismo foi diagnosticado em 69%, insuficiência adrenal em 77% e a tríade completa foi observada em 54% da amostra. Alterações em AIRE foram encontradas nos 13 pacientes, sendo que 10 mutações distintas foram identificadas, 4 delas nunca descritas (c.560C>G, c.966C>A, c.1096-2A>G e c.1347C>A). A mutação mais frequente, c.967_979del, foi detectada em 36% dos alelos afetados. Assim como em estudos prévios, não foi possível determinar correlações entre genótipo e fenótipo. O rastreamento genético dos familiares permitiu identificar a síndrome em uma criança ainda assintomática. O estudo funcional in vitro da mutação c.560C>G demonstrou acúmulo anormal da proteína no citoplasma, em região perinuclear, sugerindo potencial lesivo da mutação. Altos títulos de anti-interferon tipo I foram encontrados em todos os pacientes com diagnóstico clínico e/ou molecular de SPA1. Além disso, o número de manifestações em cada indivíduo correlacionou-se negativamente aos títulos de anticorpos anti-interleucina-17A. A avaliação de outros 13 casos duvidosos levou à identificação, em um destes pacientes, de outra nova variante do gene AIRE, que, de acordo com análises in silico, é provavelmente deletéria. Conclusões: Identificamos 14 indivíduos com SPA1 no Brasil, sendo que um deles ainda não manifestou clinicamente a doença. O componente clínico mais frequente foi CMC e c.967_979del foi a mutação mais prevalente. Quatro novas mutações em AIRE foram detectadas e ainda relatamos outra nova variante provavelmente deletéria. Identificamos correlação negativa entre títulos de anti-interleucina-17A e número de manifestações. Análise genética e dosagem de anticorpos anti-interferon I podem auxiliar a confirmação do diagnóstico em casos iniciais ou atípicos.