Detecção de vírus respiratórios e análise molecular do SARS-CoV2 em amostras de voluntários do ensaio clínico da vacina ChadOx1 nCoV-19
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2024 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UNIFESP |
Texto Completo: | https://hdl.handle.net/11600/71098 |
Resumo: | Objetivo: Realizar a análise molecular do SARS-CoV-2 e a detecção de outros vírus respiratórios em amostras de participantes do ensaio clínico de fase III da vacina ChadOx nCoV19. Métodos: No período de julho de 2020 a janeiro de 2022, amostras de swab de nasofaringe e orofaringe foram coletadas de participantes sintomáticos do ensaio clínico para detecção de SARS-CoV-2 e vírus respiratórios utilizando a técnica de RT-qPCR. As amostras positivas para SARS-CoV-2 foram selecionadas de acordo com a carga viral, com base no Ct (Cycle Threshold) e sequenciadas para análise filogenética e identificação de mutações. A comparação entre vacinados e não vacinados considerou dados temporais e estatísticos, considerando intervalo de confiança 95% e p<0,05. Resultados: O estudo analisou 876 amostras de 737 participantes, com 37,7% de positividade para SARS-CoV-2 e 16,4% para outros vírus respiratórios, sendo Rinovírus (8,4%) e Vírus Sincicial respiratório (2,4%) os mais detectados. Uma associação da positividade de vírus respiratórios em indivíduos com contato direto com pacientes foi encontrada (p<0.05). Vacinados com doses tiveram 39,1% positividade e não vacinados 42,4% (p<0,016). Nenhuma associação foi encontrada na média da carga viral entre vacinados com uma ou duas doses e não vacinados (p >0,35). O sequenciamento de 221 amostras revelou 21 linhagens de SARS-CoV-2, com predominância das linhagens P.1 e P.2. As regiões da ORF1ab e Spike foram as regiões com maior número de mutação, seguido de ORF3a e proteína N. A análise temporal mostrou as mutações predominantes (D614G, E484K, N501Y e K417T), principalmente nas variantes de preocupação (VOC). A análise filogenética não mostrou diferenças entre vacinados e não vacinados, destacando a predominância da VOC Gamma entre os vacinados. Conclusões: A rápida disseminação do SARS-CoV-2 desafiou profundamente o sistema de saúde e as estratégias de controle epidemiológico do país. Variantes de preocupação e interesse, desempenharam um papel crucial no aumento de casos. Este aumento de casos ocorreu quando a população estava sendo vacinada, impossibilitando a comparação entre vacinados e não vacinados no maior pico de casos. Além disso, a pandemia teve impacto na circulação de outros vírus respiratórios sazonais, indicando mudanças nos padrões de transmissão. Essas conclusões ressaltam a importância de estratégias adaptativas de controle, incluindo vigilância genômica, atualização de vacinação e políticas de saúde pública baseadas em evidências para mitigar os efeitos da COVID-19 e outras doenças respiratórias no Brasil e no mundo, tendo em vista que o vírus continua circulando e com novas variantes emergindo, cenário que continua desafiando antigenicamente as vacinas. |
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Detecção de vírus respiratórios e análise molecular do SARS-CoV2 em amostras de voluntários do ensaio clínico da vacina ChadOx1 nCoV-19Detection of respiratory viruses and molecular analysis of SARS-CoV-2 in samples from volunteers from the clinical trial of the ChadOx1 nCoV-19 vaccineSARS-CoV-2COVID19VacinaAnálise molecularVírus respiratóriosObjetivo: Realizar a análise molecular do SARS-CoV-2 e a detecção de outros vírus respiratórios em amostras de participantes do ensaio clínico de fase III da vacina ChadOx nCoV19. Métodos: No período de julho de 2020 a janeiro de 2022, amostras de swab de nasofaringe e orofaringe foram coletadas de participantes sintomáticos do ensaio clínico para detecção de SARS-CoV-2 e vírus respiratórios utilizando a técnica de RT-qPCR. As amostras positivas para SARS-CoV-2 foram selecionadas de acordo com a carga viral, com base no Ct (Cycle Threshold) e sequenciadas para análise filogenética e identificação de mutações. A comparação entre vacinados e não vacinados considerou dados temporais e estatísticos, considerando intervalo de confiança 95% e p<0,05. Resultados: O estudo analisou 876 amostras de 737 participantes, com 37,7% de positividade para SARS-CoV-2 e 16,4% para outros vírus respiratórios, sendo Rinovírus (8,4%) e Vírus Sincicial respiratório (2,4%) os mais detectados. Uma associação da positividade de vírus respiratórios em indivíduos com contato direto com pacientes foi encontrada (p<0.05). Vacinados com doses tiveram 39,1% positividade e não vacinados 42,4% (p<0,016). Nenhuma associação foi encontrada na média da carga viral entre vacinados com uma ou duas doses e não vacinados (p >0,35). O sequenciamento de 221 amostras revelou 21 linhagens de SARS-CoV-2, com predominância das linhagens P.1 e P.2. As regiões da ORF1ab e Spike foram as regiões com maior número de mutação, seguido de ORF3a e proteína N. A análise temporal mostrou as mutações predominantes (D614G, E484K, N501Y e K417T), principalmente nas variantes de preocupação (VOC). A análise filogenética não mostrou diferenças entre vacinados e não vacinados, destacando a predominância da VOC Gamma entre os vacinados. Conclusões: A rápida disseminação do SARS-CoV-2 desafiou profundamente o sistema de saúde e as estratégias de controle epidemiológico do país. Variantes de preocupação e interesse, desempenharam um papel crucial no aumento de casos. Este aumento de casos ocorreu quando a população estava sendo vacinada, impossibilitando a comparação entre vacinados e não vacinados no maior pico de casos. Além disso, a pandemia teve impacto na circulação de outros vírus respiratórios sazonais, indicando mudanças nos padrões de transmissão. Essas conclusões ressaltam a importância de estratégias adaptativas de controle, incluindo vigilância genômica, atualização de vacinação e políticas de saúde pública baseadas em evidências para mitigar os efeitos da COVID-19 e outras doenças respiratórias no Brasil e no mundo, tendo em vista que o vírus continua circulando e com novas variantes emergindo, cenário que continua desafiando antigenicamente as vacinas. Objective: This study aimed to perform molecular analysis of SARS-CoV-2 and detect other respiratory viruses in samples from participants of the ChAdOx nCoV-19 vaccine phase III clinical trial. Methods: From July 2020 to January 2022, nasopharyngeal and oropharyngeal swab samples were collected from symptomatic trial participants for SARS-CoV-2 and respiratory virus detection using RT-qPCR. SARS-CoV-2-positive samples were sequenced for phylogenetic analysis and mutation identification. Statistical comparison between vaccinated and unvaccinated individuals was conducted considering temporal data with a 95% confidence interval and p<0.05. Results: A total of 876 samples from 737 participants were analyzed, with 37.7% positivity for SARS-CoV-2 and 16.4% for other respiratory viruses, notably Rhinovirus (8.4%) and Respiratory Syncytial Virus (2.4%). A significant association between respiratory virus positivity and direct patient contact was found (p<0.05). Vaccinated individuals had 39.1% positivity, while unvaccinated individuals had 42.4% (p<0.016). No association was found in mean viral load between vaccinated with one or two doses and unvaccinated individuals (p >0.35). Sequencing of 221 samples revealed 21 SARS-CoV-2 lineages, predominantly P.1 and P.2. ORF1ab and Spike regions showed the highest mutation rates, followed by ORF3a and N protein. Temporal analysis identified predominant mutations (D614G, E484K, N501Y, and K417T), particularly in variants of concern (VOC). Phylogenetic analysis showed no differences between vaccinated and unvaccinated individuals, highlighting the predominance of the Gamma VOC among vaccinated individuals. Conclusions: The rapid spread of SARS-CoV-2 profoundly challenged the country's healthcare system and epidemiological control strategies. Variants of concern and interest played a crucial role in case increases, coinciding with the vaccination rollout. This hindered the comparison between vaccinated and unvaccinated individuals during the peak of cases. Additionally, the pandemic impacted the circulation of other seasonal respiratory viruses, indicating transmission pattern changes. These findings underscore the importance of adaptive control strategies, including genomic surveillance, vaccination updates, and evidence-based public health policies to mitigate the effects of COVID-19 and other respiratory illnesses in Brazil and globally. This is especially relevant as the virus continues to circulate, with new variants emerging, posing ongoing antigenic challenges to vaccines.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)2020/11719-0Universidade Federal de São PauloBellei, Nancy Cristina Junqueira [UNIFESP]http://lattes.cnpq.br/1571196803842272http://lattes.cnpq.br/7373102365142608Barbosa, Gabriela Rodrigues [UNIFESP]2024-05-14T11:46:16Z2024-05-14T11:46:16Z2024info:eu-repo/semantics/doctoralThesisinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion83 f.application/pdfBARBOSA, Gabriela Rodrigues. Detecção de vírus respiratórios e análise molecular do SARS-CoV2 em amostras de voluntários do ensaio clínico da vacina ChadOx1 nCoV-19. 2024. 83 f. Tese (Doutorado em Infectologia) – Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo, São Paulo. 2024https://hdl.handle.net/11600/71098porSão Pauloinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESP2024-08-13T23:55:15Zoai:repositorio.unifesp.br/:11600/71098Repositório InstitucionalPUBhttp://www.repositorio.unifesp.br/oai/requestbiblioteca.csp@unifesp.bropendoar:34652024-08-13T23:55:15Repositório Institucional da UNIFESP - Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)false |
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