Papel das células iNKT sobre o efeito imunomodulador da Propionibacterium acnes na resposta alérgica experimental

• Autor(a) principal: Gomes, Gabriela Martins Costa [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2017
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=5081553; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/50710
• topic: Corynebacterium parvum; Células iNKT; Hipersensibilidade; Imunomodulação; Células T matadoras naturais; Corynebacterium parvum; Hypersensitivity; Immunomodulation; Natural killer T-cells

O uso de adjuvantes para modular a resposta imune tem sido empregado há décadas, dentre estes podemos citar a Propionibacterium acnes antes classificada como Corynebacterium parvum, um bacilo anaeróbio, Grampositivo pertencente à microbiota cutânea humana. Estudos clínicos e experimentais demonstraram que esta bactéria quando morta pelo calor ou pelo fenol, em forma de suspensão, tem a capacidade de modular várias funções da resposta imune inata e adaptativa. Nestes estudos ficou evidente a sua capacidade em modular a resposta imune induzindo um perfil Th1. Porém em nosso laboratório, em um modelo murino de hipersensibilidade tipo I induzida por ovoalbumina (OVA), foi demonstrado que a bactéria era capaz de exacerbar a reação Th2 a OVA quando administrada simultaneamente a sensibilização dos animais ou suprimi-la induzindo um perfil Th1 quando administrada uma semana antes da sensibilização com OVA. Dessa maneira, a modulação feita pela bactéria nos diferentes tratamentos induzia diferenças no momento da apresentação de antígeno, agindo direta ou indiretamente sobre células apresentadoras de antígenos profissionais. Além de APCs, também pôde ser demonstrado em nosso laboratório que a bactéria modula as funções de células NKT em um modelo de melanoma murino. Com base nestes trabalhos e nas evidências crescentes, principalmente em modelos de asma experimental, de que as células iNKT promovem e são necessárias para o desenvolvimento da hiper-reatividade e inflamação das vias aéreas, o presente estudo teve como objetivo avaliar o papel dessas células sobre a resposta alérgica a OVA modulada pela suspensão de P. acnes morta pelo calor. Avaliamos a reação de exacerbação ou supressão induzida pela P. acnes em reposta a OVA em modelo murino modificado por nós. Foram utilizados camundongos C57BL/6 selvagens e deficientes na população de células NKT (CD1d-/-), iNKT (J!18-/-), ou no receptor CXCR6-/-.Esses animais receberam duas injeções subcutâneas, uma por semana, de suspensão de P. acnes morta pelo calor simultaneamente com a OVA para exacerbação da resposta alérgica. Em contrapartida, para avaliarmos a supressão desta mesma reação, estes animais receberam duas doses, via subcutânea com intervalo de 7 dias entre elas, de suspensão de P. acnes morta pelo calor, e uma semana após a última dose, receberam duas injeções via subcutânea de OVA sendo uma por semana. Em todos os protocolos 7 dias após a última dose, os animais foram desafiados com OVA, via intraperitoneal. Após 24 horas analisamos além da população de células iNKT, as populações de mastócitos, basófilos e eosinófilos presentes no exsudato peritoneal, baço e linfonodos dos animais. Foi possível verificar que em camundongos C57Bl/6 selvagens, no protocolo de exacerbação a população de células iNKT que aumentou significantemente foi a iNKT NK1.1- acompanhado do aumento significativo do número absoluto das populações de mastócitos, basófilos e eosinófilos nos órgãos avaliados. Em contrapartida, no protocolo de supressão a população de células iNKT aumentada foi iNKT NK1.1+ enquanto todas as outras populações analisadas estavam significativamente reduzidas. Além dessas diferenças na população de iNKT em cada protocolo, demonstramos que na ausência dessas células o efeito de exacerbação da reação Th2 induzido pela P. acnes era fortemente reduzido em animais J!18-/- e CD1d-/-. Porém, a reconstituição destes animais submetidos aos mesmos protocolos, com timócitos de animais selvagens no protocolo de exacerbação a população de células iNKT que aumentou significantemente foi a iNKT NK1.1- acompanhado do aumento significativo do número absoluto das populações de mastócitos, basófilos e eosinófilos nos órgãos avaliados. Em contrapartida, no protocolo de supressão a população de células iNKT aumentada foi iNKT NK1.1+ enquanto todas as outras populações analisadas estavam significativamente reduzidas. Além dessas diferenças na população de iNKT em cada protocolo, demonstramos que na ausência dessas células o efeito de exacerbação da reação Th2 induzido pela P. acnes era fortemente reduzido em animais J!18-/- e CD1d-/-. Porém, a reconstituição destes animais submetidos aos mesmos protocolos, com timócitos de animais selvagens a reação de exacerbação a OVA induzida pela bactéria foi parcialmente recuperada. Dessa maneira demonstramos que neste modelo as células iNKT tem papel majoritário na modulação exercida pela P. acnes na exacerbação da reação de hipersensibilidade tipo I a OVA e em especial o subtipo que não expressa a molécula NK1.1.