Caracterização morfológica do intestino do robalo peva (Centropomus parallelus) e avaliação do efeito do Bacillus subtilis sobre mastócitos com grânulos eosinofílicos (MCs/EGC) e células caliciformes intestinais

• Autor(a) principal: Silva, Wémeson Ferreira da [UNIFESP]
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIFESP
• Texto Completo: https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=4016638; http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/47308
• topic: Morfologia; Imunohistoquímica; Mucosa intestinal; Mastócitos; Bacillus subtilis; Robalo; Morphology; Immunohistochemistry; Intestinal mucosa; Mast cells; Bacillus subtilis; Sea bass

Caracterizar anatomica e morfologicamente as diferentes regiões e camadas do intestino do robalo peva (Centropomus parallelus). Quantificar os mastócitos com grânulos eosinofílicos (MCs/EGC) e células caliciformes do intestino após suplementação da ração com probiótico Bacillus subtilis. Material e métodos: Foram utilizados 50 animais, sendo 23 para o estudo anatômico, morfológico, histoquímico e ultraestrutural, 12 para o estudo histoquímico e imunohistoquímico de MCs/EGC, e 15 para o estudo quantitativo de MCs/EGC e células caliciformes de animais controle e após administração do probiótico nas dosagens de 5g e 10g por kg-1 de ração. Para a análise morfológica, foram realizados cortes de 5?m de todas as regiões, sendo as secções coradas com HE, coloração especial de tricrômio de NMC, impregnação argêntica e azul de toluidina em cortes semifinos de 1?m. Para histoquímica, foram empregados os métodos de PAS, Alcian Blue (AB) pH 2,5 e 0,5 e AB pH 2,5 + PAS. Para o estudo de MCs/EGC, foram aplicados os métodos de hematoxilina férrica ? eosina, vermelho Congo, alaranjado de acridina pH 6, azul de toluidina, PAS, AB pH 2,5 e 0,5, AB pH 2,5 + PAS e anticorpos anti-triptase, quimase e serotonina. Para a análise ultraestrutural, fragmentos de 0,5 mm das regiões foram fixados em Karnovsky e processados segundo o método convencional para MET. Os MCs/EGC e células caliciformes foram quantificados em todas as regiões intestinais dos grupos controle, 5g e 10g. Resultados: O intestino foi constituído por cecos pilóricos, intestino proximal, intestino distal, reto e pelas camadas mucosa, submucosa, muscular e serosa. A mucosa apresentou no epitélio células absortivas (enterócitos), endócrinas, linfócitos intraepiteliais, rodlet cells, células caliciformes positivas para glicoproteínas neutras e glicosaminoglicanas ácidas carboxiladas e sulfatadas, lâmina própria constituída de tecido conjuntivo, vasos sanguíneos, MCs/EGC, leucócitos e infiltrado leucocitário, e uma muscular da mucosa entre a mucosa e a submucosa. A submucosa foi constituída por tecido conjuntivo, vasos sanguíneos, infiltrado leucocitário e MCs/EGC contendo grânulos de caráter básico, ácido, metacromáticos e positivos para glicoproteinas neutras, glicosaminoglicanas carboxiladas e sulfatadas, triptase, quimase e serotonina. A muscular apresentou uma camada circular interna e uma longitudinal externa, e plexo nervoso mioentérico. A serosa foi formada por uma fina camada de tecido conjuntivo revestido pelo mesotélio, vasos e plexo nervoso subseroso. Ultraestruturalmente foram identificados enterócitos de núcleo eucromático e citoplasma contendo mitocôndrias e grânulos esféricos e eletrondensos, células caliciformes de núcleo eucromático e grânulos citoplasmáticos de tamanho e eletrondensidade variáveis, quatro diferentes tipos de células enteroendócrinas, fagócitos intraepiteliais, rodlet cells contendo grânulos citoplasmáticos em forma de haste e MCs/EGCs de núcleo com eletrondensidade variada e grânulos citoplasmáticos esféricos. A análise quantitativa demonstrou diferença estatística significante somente para MCs/EGC do grupo de 5g que tiveram número médio destas células aumentado quando comparado ao grupo controle. Conclusões: O intestino é composto por cecos pilóricos, intestinos proximal, distal e reto. Na mucosa estão presentes enterócitos, células caliciformes, células enteroendócrinas, linfócitos intraepiteliais, rodlet cells, fagócitos e MCs/EGC. Os grânulos dos MCs/EGC apresentam componentes básicos, ácidos, triptase, quimase e serotonina. Ultraestruturalmente foram identificados quatro tipos de células endócrinas. A adição do probiótico aumentou o número de MCs/EGC na mucosa e submucosa intestinal dos animais do grupo 5g.