Efeito da glicose sobre o pH intracelular em células beta pancreáticas
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Data de Publicação: | 2023 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UNIFESP |
Texto Completo: | https://repositorio.unifesp.br/11600/68488 |
Resumo: | As células beta pancreáticas são responsáveis pela secreção de insulina em resposta ao aumento da concentração de glicose no sangue. A secreção da insulina é dependente do mecanismo de disparo, o qual é iniciado pelo aumento no metabolismo energético intracelular, resultando na deflagração de potenciais de ação. Nessas células, durante o potencial de ação há o influxo de Ca2+, o qual é essencial para promover o processo de exocitose da insulina. Essa sequência de eventos é conhecida como “mecanismo de disparo” da secreção de insulina. Entretanto, apesar do mecanismo de disparo ser essencial, outros fenômenos intracelulares podem atuar como mecanismos acessórios e interferir na secreção da insulina atenuando ou potencializando o processo secretório. Assim, nosso objetivo foi investigar se há alterações no pH intracelular (pHi) frente à estimulação de células beta pancreáticas, as quais poderiam participar como mecanismos modulatórios. Para nossas análises, utilizamos células INS-1E como modelo experimental. O pHi foi avaliado por microscopia de fluorescência, utilizando a sonda SypHer. Nossos resultados mostraram que, durante a estimulação das células beta pancreáticas, há uma acidificação intracelular resultante tanto da exposição das células beta pancreáticas a um estímulo metabólico, a glicose, como quando de um estímulo não metabólico, a tolbutamida, um bloqueador de canais para K+ sensíveis ao ATP (KATP). Além disso, conseguimos observar a importância do influxo do cálcio para induzir o processo de acidificação intracelular. Assim, durante a estimulação do funcionamento celular, as células beta pancreáticas sofrem uma acidificação do ambiente intracelular, a qual pode ser parte de um mecanismo acessório para o processo de secreção. |
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Entretanto, apesar do mecanismo de disparo ser essencial, outros fenômenos intracelulares podem atuar como mecanismos acessórios e interferir na secreção da insulina atenuando ou potencializando o processo secretório. Assim, nosso objetivo foi investigar se há alterações no pH intracelular (pHi) frente à estimulação de células beta pancreáticas, as quais poderiam participar como mecanismos modulatórios. Para nossas análises, utilizamos células INS-1E como modelo experimental. O pHi foi avaliado por microscopia de fluorescência, utilizando a sonda SypHer. Nossos resultados mostraram que, durante a estimulação das células beta pancreáticas, há uma acidificação intracelular resultante tanto da exposição das células beta pancreáticas a um estímulo metabólico, a glicose, como quando de um estímulo não metabólico, a tolbutamida, um bloqueador de canais para K+ sensíveis ao ATP (KATP). Além disso, conseguimos observar a importância do influxo do cálcio para induzir o processo de acidificação intracelular. Assim, durante a estimulação do funcionamento celular, as células beta pancreáticas sofrem uma acidificação do ambiente intracelular, a qual pode ser parte de um mecanismo acessório para o processo de secreção.Pancreatic beta cells are responsible for secreting insulin in response to increased blood glucose concentration. Insulin secretion is dependent on the triggering mechanism, which is characterized by an increase in intracellular energy metabolism, resulting in the triggering of action potentials. In these cells, during the action potential, calcium influx is essential to promote the process of insulin exocytosis. However, although the triggering mechanism is essential, other intracellular phenomena can act as accessory mechanisms and interfere with insulin secretion, attenuating or potentiating the secretory process. Thus, our objective was to investigate changes in intracellular pH in response to stimulation of pancreatic beta cells. For our analysis we used INS-1E cells as an experimental model, the Sypher probe for intracellular pH analysis by fluorescence microscopy. Our results showed that, during stimulation of pancreatic beta cells, there is intracellular acidification resulting from both exposure of pancreatic beta cells to a metabolic stimulus, glucose, and to a non-metabolic stimulus, tolbutamide. In addition, we were able to observe the importance of calcium influx for the intracellular acidification process. Thus, during stimulation of cellular functioning, pancreatic beta cells induce intracellular acidification, which may be part of an accessory mechanism for the secretion process.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)CNPq: 134424/2019-0FAPESP: 2015/01926-036 f.porUniversidade Federal de São PauloGlicoseInsulinapH intracelularExocitoseEfeito da glicose sobre o pH intracelular em células beta pancreáticasEffect of glucose on intracelullar ph in pancreatic beta cellsinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNIFESPinstname:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)instacron:UNIFESPEscola Paulista de Medicina (EPM)Ciências Biológicas (Biologia Molecular)GlicoseCélula Beta PancreáticaORIGINALKAIO FERREIRA CARDOSO DE OLIVEIRA-FINAL.pdfKAIO FERREIRA CARDOSO DE OLIVEIRA-FINAL.pdfapplication/pdf1074218${dspace.ui.url}/bitstream/11600/68488/1/KAIO%20FERREIRA%20CARDOSO%20DE%20OLIVEIRA-FINAL.pdfe67bca9b47c99301788cb38790f5b3a0MD51open accessLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-85823${dspace.ui.url}/bitstream/11600/68488/2/license.txt82e8fb9c47d3bc6c7a328b0bd51e4cf9MD52open accessTEXTKAIO FERREIRA CARDOSO DE OLIVEIRA-FINAL.pdf.txtKAIO FERREIRA CARDOSO DE OLIVEIRA-FINAL.pdf.txtExtracted texttext/plain52399${dspace.ui.url}/bitstream/11600/68488/6/KAIO%20FERREIRA%20CARDOSO%20DE%20OLIVEIRA-FINAL.pdf.txt9921063407cf13b6cf3995ac8414a25cMD56open accessTHUMBNAILKAIO FERREIRA CARDOSO DE OLIVEIRA-FINAL.pdf.jpgKAIO FERREIRA CARDOSO DE OLIVEIRA-FINAL.pdf.jpgIM Thumbnailimage/jpeg3780${dspace.ui.url}/bitstream/11600/68488/8/KAIO%20FERREIRA%20CARDOSO%20DE%20OLIVEIRA-FINAL.pdf.jpgdd26b65a71c1dbf544ec3aa37b6d598dMD58open access11600/684882023-07-07 12:40:44.405open 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Glicose Insulina pH intracelular Exocitose |
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As células beta pancreáticas são responsáveis pela secreção de insulina em resposta ao aumento da concentração de glicose no sangue. A secreção da insulina é dependente do mecanismo de disparo, o qual é iniciado pelo aumento no metabolismo energético intracelular, resultando na deflagração de potenciais de ação. Nessas células, durante o potencial de ação há o influxo de Ca2+, o qual é essencial para promover o processo de exocitose da insulina. Essa sequência de eventos é conhecida como “mecanismo de disparo” da secreção de insulina. Entretanto, apesar do mecanismo de disparo ser essencial, outros fenômenos intracelulares podem atuar como mecanismos acessórios e interferir na secreção da insulina atenuando ou potencializando o processo secretório. Assim, nosso objetivo foi investigar se há alterações no pH intracelular (pHi) frente à estimulação de células beta pancreáticas, as quais poderiam participar como mecanismos modulatórios. Para nossas análises, utilizamos células INS-1E como modelo experimental. O pHi foi avaliado por microscopia de fluorescência, utilizando a sonda SypHer. Nossos resultados mostraram que, durante a estimulação das células beta pancreáticas, há uma acidificação intracelular resultante tanto da exposição das células beta pancreáticas a um estímulo metabólico, a glicose, como quando de um estímulo não metabólico, a tolbutamida, um bloqueador de canais para K+ sensíveis ao ATP (KATP). Além disso, conseguimos observar a importância do influxo do cálcio para induzir o processo de acidificação intracelular. Assim, durante a estimulação do funcionamento celular, as células beta pancreáticas sofrem uma acidificação do ambiente intracelular, a qual pode ser parte de um mecanismo acessório para o processo de secreção. |
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