Avaliação de JBE (“Jacalin Binding Exoantigen”- Exoantígeno Ligante de Jacalina) na fagocitose de leveduras de Paracoccidioides brasiliensis por macrófagos peritoneais murinos

• Autor(a) principal: Carvalho, Fernanda Caroline de
• Data de Publicação: 2004
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UFU
• Texto Completo: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/27142; http://dx.doi.org/10.14393/ufu.di.2004.28
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::IMUNOLOGIA; Paracoccidioides brasiliensis; Macrófagos; Exoantígeno; Carboidrato; Paracoccidioides brasiliensis; Macrophages; Exoantigen; Carbohydrates

Componentes antigênicos presentes na superfície de Paracoccidioides brasiliensis são capazes de promover interação com as células do hospedeiro, favorecendo a patogênese da infecção. O presente estudo buscou verificar a presença de JBE (“Jacalin Binding Exoantigen” - Exoantígeno Ligante de Jacalina) no sobrenadante de cultura líquida de leveduras do isolado BAT de P. brasiliensis e, também, nas leveduras, bem como investigar seu efeito na fagocitose de leveduras deste fungo por macrófagos peritoneais murinos. JBE foi obtido no sobrenadante de cultura líquida ao 16° dia de cultivo de leveduras, em meio F-10 acrescido de 0,5 % de D-Glicose, sua análise, por SDS-PAGE c coloração pela prata, evidenciou uma banda de 190 kDa e, sob condições redutoras uma de 70 kDa. O ensaio imunohistoquímico utilizando IgG de coelho anti-gpl90 e IgG ligada ao ouro coloidal, localizou o componente de JBE, predominantemente, na superfície das leveduras. Macrófagos peritoneais de camundongos BALB/c foram tratados com JBE (50 e 100 pg/mL) e incubados com leveduras de P. brasiliensis marcadas com FITC pré-tratadas com 50 mM de monossacarídeos: N-acetil-D-glicosamina (GlcNAc), ou D-Glicose, ou D-Galactose ou D-Manose. JBE, quando presente nos macrófagos, foi capaz de promover a inibição da fagocitose (40 %) e a produção de NO, e ao serem incubados com leveduras pré-tratadas com GlcNAc a inibição foi ainda maior (64 %), porém houve inibição na produção de NO. As leveduras de P. brasiliensis marcadas com FITC foram tratadas com fragmentos F(ab) da IgG de camundongo anti-JBE (50 e 100 pg/mL) e os macrófagos foram tratados com 50 mM de monossacarídeos, esse tratamento promoveu inibição na fagocitose e essa inibição aumentou quando houve a incubação de ambos. A inibição da fagocitose foi verificada também em macrófagos tratados com JBE (50 pg/mL) incubados com leveduras pré-tratadas com fragmentos F(ab) da IgG de camundongo anti-JBE (50 pg/mL) (61,5 %). Esses resultados sugerem que JBE esteja envolvido na interação entre o fungo e as células do hospedeiro, inferido por sua localização, bem como, JBE mostrou-se capaz de potencializar a fagocitose de leveduras de P. brasiliensis por macrófagos peritoneais murinos. Provavelmente, a inibição da fagocitose e da produção de NO promovida por GlcNAc possa ser pela afinidade da gp70 de JBE por esse monossacarídeo. Os fragmentos F(ab) da IgG de camundongo anti-JBE, provavelmente, ocupam os sítios de interação nas leveduras e aumentam a taxa de inibição da fagocitose pelos monossacarídeos ou por JBE, nos macrófagos. Em conclusão, JBE possui componente capaz de promover a invasão do fungo.