Ligação de miosina V de citosol de cérebro bovino em coluna Q-sepharose

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Lacerda, Rogério de Freitas
Data de Publicação: 2004
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFU
Texto Completo: https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/26015
Resumo: Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação)
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spelling Ligação de miosina V de citosol de cérebro bovino em coluna Q-sepharoseATPaseMiosina-VQ-sepharoseCNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICATrabalho de Conclusão de Curso (Graduação)Os resultados deste trabalho mostram a comparação de ensaios com cérebro bovino submetidos à 3 condições, mantendo o pH 8,0 acrescentado ou não pirofosfato 100 mM e alterando o pH para 9,0. Foi homogeneizado cerca de 1 g de cérebro em 10 mL de tampão de extração. O homogeneizado foi centrifugado a 45.000 x g durante 40 minutos a 4 ° C. A fração SI, dos três ensaios foi aplicada em coluna Q-Sepharose. Para amostras com pH 8,0 obtivemos uma retenção de grande número de polipeptídios e conseqüentemente proteína, juntamente com polipeptídio com mobilidade em SDS semelhante à miosina V. Nos eluatos com NaCI 250 mM observamos dentre outros o polipeptídio de interesse com pequena atividade ATPásica que não é recuperada após diálise. Ao passo que polipeptídio em torno de 83, 31, 30 e 23 kDa juntamente com outros de 43 e 47 kDa são evidentes nos eluatos com 500 mM de NaCI, sem atividade Mg2+-ATPásica. O ensaio com pH 9,0 obteve similar perfil em SDS-PAGE, contudo houve pouca retenção de proteínas e os eluatos com 250 mM de NaCI mesmo tendo um polipeptídio com peso molecular igual a miosina V, não foi verificado atividade ATPásica. Se tratando do ensaio com pH 8,0 e pirofosfato houve pouca retenção de polipeptídios. Neste caso apenas os eluatos com 500 mM de NaCI obtiveram resultados expressivos e similares aos dois ensaios anteriores, salve as exceções dos polipeptídios em torno de 66 e 43 kDa. O eluatos do ensaio com pH 8,0 e pirofosfato não obtiveram atividade, como se era esperado. No caso do ensaio com pH 9,0 foi reaplicado o void novamente em coluna Q-sepharose obtendo quase completa retenção de proteínas e atividade nula, com concomitante retenção do polipeptídio com motilidade similar a miosina V.Universidade Federal de UberlândiaBrasilCiências BiológicasCoelho, Milton Vieirahttp://lattes.cnpq.br/9152678955599952Izidoro, Luiz Fernando MoreiraDuarte, Gilvan CaetanoLacerda, Rogério de Freitas2019-07-12T13:35:27Z2019-07-12T13:35:27Z2004-06-29info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesisapplication/pdfLACERDA, Rogério de Freitas. Ligação de miosina V de citosol de cérebro bovino em coluna Q-sepharose. 36 f. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação em Ciências Biológicas) – Universidade Federal de Uberlândia, Uberlândia, 2004.https://repositorio.ufu.br/handle/123456789/26015porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UFUinstname:Universidade Federal de Uberlândia (UFU)instacron:UFU2019-07-13T06:08:59Zoai:repositorio.ufu.br:123456789/26015Repositório InstitucionalONGhttp://repositorio.ufu.br/oai/requestdiinf@dirbi.ufu.bropendoar:2019-07-13T06:08:59Repositório Institucional da UFU - Universidade Federal de Uberlândia (UFU)false
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