Detec??o simult?nea das doen?as de chagas e leishmaniose visceral: uma plataforma espec?fica para o diagn?stico point-of-care
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Data de Publicação: | 2020 |
Tipo de documento: | Tese |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UFVJM |
Texto Completo: | http://acervo.ufvjm.edu.br/jspui/handle/1/2429 |
Resumo: | A doen?a de Chagas (DC) e a de Leishmaniose Visceral (LV) s?o enfermidades que apresentam grande impacto na sa?de p?blica. Ambas s?o causadas por protozo?rios pertencentes ? mesma fam?lia, a Trypanosomatidae. A proximidade gen?tica dessas doen?as causa reatividade cruzada dos anticorpos com os ant?genos ub?quos, o que resulta em baixa especificidade dos testes diagn?sticos utilizados para identifica??o de tais doen?as, podendo incorrer em falsos resultados. Esse problema causa dificuldades ainda maiores se considerado as regi?es co-end?micas para essas doen?as. Assim esse trabalho buscou inicialmente testar uma plataforma simples de reconhecimento utilizando a t?cnica de espectroscopia de imped?ncia eletroqu?mica (EIE) atrav?s da imobiliza??o de ant?genos brutos de L. infantum em monocamadas auto-organizadas (SAMs) de ?cido 3-mercaptopropi?nico (3-MPA), para o reconhecimento de anticorpos espec?ficos do parasito presentes em soros caninos positivos para LV. Todos os par?metros da an?lise foram otimizados para a detec??o da doen?a utilizando o dispositivo proposto. Desta forma, com os resultados satisfat?rios obtidos essa plataforma foi adaptada para um sistema de eletrodos impressos duplos de carbono, formandos por dois eletrodos de trabalho (W1 e W2) que podem permitir a detec??o simult?nea das doen?as de Chagas e Leishmaniose Visceral. Para isso, foram utilizados ant?genos recombinantes T. cruzi (IBMP8.1) e L. infantum (rLCi1,2) que aumentam a especificidade da an?lise realizada e diminuem a ocorr?ncia de poss?veis rea??es cruzadas. Nessa plataforma, os ant?genos recombinantes IBMP8.1 e L. infantum (rLCi1,2) foram imobilizados nos eletrodos W1 e W2, respectivamente, modificados com filme polim?ricos obtidos atrav?s da eletropolimeriza??o do ?cido 4 -hidroxifenilac?tico (4-HFA). O imunossensor proposto foi desenvolvido e caracterizado com sucesso, sendo um sistema simples, eficaz e espec?fico para a discrimina??o do reconhecimento dos anticorpos de DC e LV presentes em soros caninos e humanos, o que representa um campo encorajador para o progresso do diagn?stico dessas doen?as em regi?es end?micas e co-end?micas. Os resultados apresentados podem trazer contribui??es significativas para a sociedade, principalmente em regi?es mais pobres que sofrem com o impacto dessas doen?as e n?o possuem acesso a exames cl?nicos de rotina para in?cio do tratamento. Neste contexto, o objetivo principal do trabalho foi desenvolver um template de um dispositivo do tipo point of care que possa ser utilizado em postos de pronto atendimento, acelerando o diagn?stico das doen?as de DC e LV, e consequentemente iniciando o tratamento de pessoas infectadas com essas doen?as, proporcionando uma melhor qualidade de vida e menores custos ao sistema de sa?de p?blica (SUS). |
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Cordeiro, Ta?s Aparecida ReisFerreira, Lucas FrancoMalagutti, Andr?a RenataFranco, Diego LeoniPereira, Arnaldo C?sarSantos, Wallans Torres Pio dosMartins, Helen RodriguesUniversidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)Ferreira, Lucas Franco2021-02-24T19:32:18Z2021-02-24T19:32:18Z20202020-04-30CORDEIRO, Ta?s Aparecida Reis. Detec??o simult?nea das doen?as de chagas e leishmaniose visceral: uma plataforma espec?fica para o diagn?stico point-of-care. 2020. 143 p. Tese (Doutorado Multic?ntrico em Qu?mica) ? Programa de P?s-Gradua??o Multic?ntrico em Qu?mica de Minas Gerais, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, Diamantina, 2020.http://acervo.ufvjm.edu.br/jspui/handle/1/2429A doen?a de Chagas (DC) e a de Leishmaniose Visceral (LV) s?o enfermidades que apresentam grande impacto na sa?de p?blica. Ambas s?o causadas por protozo?rios pertencentes ? mesma fam?lia, a Trypanosomatidae. A proximidade gen?tica dessas doen?as causa reatividade cruzada dos anticorpos com os ant?genos ub?quos, o que resulta em baixa especificidade dos testes diagn?sticos utilizados para identifica??o de tais doen?as, podendo incorrer em falsos resultados. Esse problema causa dificuldades ainda maiores se considerado as regi?es co-end?micas para essas doen?as. Assim esse trabalho buscou inicialmente testar uma plataforma simples de reconhecimento utilizando a t?cnica de espectroscopia de imped?ncia eletroqu?mica (EIE) atrav?s da imobiliza??o de ant?genos brutos de L. infantum em monocamadas auto-organizadas (SAMs) de ?cido 3-mercaptopropi?nico (3-MPA), para o reconhecimento de anticorpos espec?ficos do parasito presentes em soros caninos positivos para LV. Todos os par?metros da an?lise foram otimizados para a detec??o da doen?a utilizando o dispositivo proposto. Desta forma, com os resultados satisfat?rios obtidos essa plataforma foi adaptada para um sistema de eletrodos impressos duplos de carbono, formandos por dois eletrodos de trabalho (W1 e W2) que podem permitir a detec??o simult?nea das doen?as de Chagas e Leishmaniose Visceral. Para isso, foram utilizados ant?genos recombinantes T. cruzi (IBMP8.1) e L. infantum (rLCi1,2) que aumentam a especificidade da an?lise realizada e diminuem a ocorr?ncia de poss?veis rea??es cruzadas. Nessa plataforma, os ant?genos recombinantes IBMP8.1 e L. infantum (rLCi1,2) foram imobilizados nos eletrodos W1 e W2, respectivamente, modificados com filme polim?ricos obtidos atrav?s da eletropolimeriza??o do ?cido 4 -hidroxifenilac?tico (4-HFA). O imunossensor proposto foi desenvolvido e caracterizado com sucesso, sendo um sistema simples, eficaz e espec?fico para a discrimina??o do reconhecimento dos anticorpos de DC e LV presentes em soros caninos e humanos, o que representa um campo encorajador para o progresso do diagn?stico dessas doen?as em regi?es end?micas e co-end?micas. Os resultados apresentados podem trazer contribui??es significativas para a sociedade, principalmente em regi?es mais pobres que sofrem com o impacto dessas doen?as e n?o possuem acesso a exames cl?nicos de rotina para in?cio do tratamento. Neste contexto, o objetivo principal do trabalho foi desenvolver um template de um dispositivo do tipo point of care que possa ser utilizado em postos de pronto atendimento, acelerando o diagn?stico das doen?as de DC e LV, e consequentemente iniciando o tratamento de pessoas infectadas com essas doen?as, proporcionando uma melhor qualidade de vida e menores custos ao sistema de sa?de p?blica (SUS).Submitted by Jos? Henrique Henrique (jose.neves@ufvjm.edu.br) on 2021-02-24T19:30:03Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) tais_aparecida_reis_cordeiro.pdf: 3457473 bytes, checksum: ee5b393695879b7d9f91d5b37137a783 (MD5)Approved for entry into archive by Jos? 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The genetic proximity of these diseases causes cross-reactivity of antibodies with ubiquitous antigens, which results in low specificity of the diagnostic tests used to identify such diseases, which may result in false results. This problem causes even greater difficulties when considering the co-endemic regions for these diseases. Thus, this work initially sought to test a simple recognition platform using the Electrochemical Impedance Spectroscopy (EIS) technique by immobilizing L. infantum crude antigens in self-organized monolayers (SAMs) of 3-mercaptopropionic acid (3-MPA), for the recognition of antibodies specific to the parasite present in canine sera positive for LV. All optimization parameters were determined for that device. After satisfactory results, this platform was adapted using double carbon electrodes, formed by two different working electrodes (W1 and W2) that allow simultaneous detection of these diseases. For this purpose, recombinant antigens of T. cruzi (IBMP8.1) and L. infantum (rLCi1,2) have used that increase the specificity of the analysis performed and decrease the occurrence of possible cross-reactions. In this platform, the recombinant antigens IBMP8.1 and rLCi1,2 were immobilized in W1 and W2 respectively, modified with poly (4-HFA) film. The proposed immunosensor was successfully developed as a simple, effective and specific system for the discrimination of CD and VL antibodies present in canine and human sera, which represents an encouraging field for the progress of the diagnosis of these diseases in endemic and co-endemic regions. We hope that the results presented here can make a major contribution to society, especially the poorest who suffer from the impact of these diseases. The main objective of this project is to develop a template that helps as a foundation for the future development of a point of care type device that can be used in emergency rooms, accelerating the diagnosis and treatment of people infected with these diseases, providing a better quality of life and lower costs to the Brazilian public health system.porUFVJMA concess?o da licen?a deste item refere-se ao ? termo de autoriza??o impresso assinado pelo autor, assim como na licen?a Creative Commons, com as seguintes condi??es: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publica??o, autorizo a Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri e o IBICT a disponibilizar por meio de seus reposit?rios, sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei n? 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permiss?es assinaladas, para fins de leitura, impress?o e/ou download, a t?tulo de divulga??o da produ??o cient?fica brasileira, e preserva??o, a partir desta data.info:eu-repo/semantics/openAccessDetec??o simult?nea das doen?as de chagas e leishmaniose visceral: uma plataforma espec?fica para o diagn?stico point-of-careinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisDoen?a de chagasLeishmaniose visceralImunosensorEspectroscopia de imped?ncia eletroqu?micaMonocamadas auto-organizadasEletropolimeriza??oChagas diseaseVisceral leishmaniasisImmunosensorElectrochemical impedance spectroscopySelf-assembled monolayerElectropolymerizationreponame:Repositório Institucional da UFVJMinstname:Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)instacron:UFVJMTEXTtais_aparecida_reis_cordeiro.pdf.txttais_aparecida_reis_cordeiro.pdf.txtExtracted texttext/plain262672http://acervo.ufvjm.edu.br/jspui/bitstream/1/2429/6/tais_aparecida_reis_cordeiro.pdf.txt5251dffb6e8cf2277327de3f2ed883b4MD56LICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; 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