Composição química e efeito sobre mediadores inflamatórios de preparações de partes aéreas de Pseudobrickellia brasiliensis (Spreng) R. M. King & H. Rob (arnica-do-campo) in vitro

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Almeida, Valéria Gomes de
Data de Publicação: 2015
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UFVJM
Texto Completo: https://acervo.ufvjm.edu.br/items/4c5e91a4-c2da-42be-ad9c-33540e1cad65
Resumo: Área de concentração: Ciências fisiológicas.
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spelling Almeida, Valéria Gomes deMelo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim deRocha-Vieira, EtelLopes, Miriam Teresa PazSantos, Raquel Gouveia dosPereira, Wagner de FátimaUniversidade Fedaral dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)Melo, Gustavo Eustáquio Brito Alvim de2016-01-04T17:59:53Z2016-01-04T17:59:53Z20152015-01-30ALMEIDA, Valéria Gomes. Composição química e efeito sobre mediadores inflamatórios de preparações de partes aéreas de Pseudobrickellia brasiliensis (Spreng) R. M. King & H. Rob (arnica-do-campo) in vitro. 2015. 138 p. Tese (Doutorado) – Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, Diamantina, 2015.https://acervo.ufvjm.edu.br/items/4c5e91a4-c2da-42be-ad9c-33540e1cad65Área de concentração: Ciências fisiológicas.A Pseudobrickellia brasiliensis (Spreng) R. M. King & H. Rob., (Asteraceae) é nativa da flora brasileira, e sua preparação alcoólica tem sido utilizada de forma tópica como anti-inflamatório na medicina popular. Tendo em vista a ausência de estudos acerca da bioatividade e composição química dessa espécie, o objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito de preparações de partes aéreas de P.brasiliensis sobre parâmetros inflamatórios, in vitro, e realizar a análise dos seus constituintes químicos. A triagem fitoquímica dos caules, flores e folhas da planta foi realizada por meio de reações cromogênicas, fluorogênicas e de precipitação e sugeriu a presença de saponinas, terpenos, taninos e flavonoides nas partes aéreas da planta. Os extratos etanólicos de caules (PBETca), flores (PBETfl) e folhas (PBETfo) foram avaliados por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada a detector de arranjo de diodos (CLAE-DAD). Essa análise sugeriu a presença de flavonoides nos extratos, especialmente das classes das flavonas e flavonóis. Os óleos essenciais de flores (PBOEfl) e de folhas (PBOEfo) foram analisados por Cromatografia Gasosa acoplada a Espectrômetro de Massas (CG-EM), sendo possível a identificação de 22 compostos no PBOEfl e 27 no PBOEfo, dentre os quais, o β-pineno, limoneno, α-pineno, sabineno, óxido de cariofileno e E-cariofileno estão presentes em maior valor percentual. Foram confeccionadas culturas de 4h de sangue total para avaliar o efeito hemolítico dos extratos, determinado pela densidade óptica do sobrenadante em 540 nm. Houve indução de hemólise em culturas tratadas com PBETca ou PBETfo em concentrações superiores a 100 μg/mL. O extrato PBETfl induziu hemólise em culturas na concentração final de 200 μg/mL. A toxicidade dos produtos naturais às Células Mononucleares do Sangue Periférico (PBMC) humano após 24 h e 5 dias, foi avaliada por citometria de fluxo, utilizando Azul de Tripan ou Iodeto de Propídeo. O efeito dos produtos naturais sobre a produção de TNF-α, IFN-γ e IL-2 foi determinado por ELISA do sobrenadante de culturas de 24 h, após estímulo com Miristato Acetato de Forbol (PMA) + Ionomicina. Todos os extratos e óleos essenciais reduziram a produção de TNF-α. A síntese de IFN-γ foi inibida pelo extrato PBETfo e pelo óleo essencial PBOEfl. Todos os extratos etanólicos e o PBOEfl, inibiram a produção de IL-2. O PBETfo foi fracionado por meio de partição em solventes com polaridade crescente e todas as frações foram eficientes em inibir a síntese de TNF-α, por PBMC, após 24 h de cultura. Somente a fração hexânica reduziu a síntese de IFN-γ e IL-2. Foram confeccionadas culturas de sangue total estimuladas com lipopolissacarídeo (LPS) para investigação do efeito dos óleos essenciais sobre a expressão de COX-2, por citometria de fluxo. Os óleos essenciais não interferiram na expressão de COX-2. Nossos achados sugerem que o efeito anti-inflamatório atribuído à P.brasiliensis na medicina popular pode, pelo menos em parte, ser devido à inibição da produção de citocinas pró-inflamatórias por linfócitos e monócitos humanos. É possível que flavonoides das subclasses das flavonas e flavonóis possam contribuir para a atividade biológica dos extratos etanólicos de P. brasiliensis. Muitos monoterpenos e sesquiterpenos presentes nos óleos essenciais de flores e folhas de P. brasiliensis já tiveram a atividade anti-inflamatória descrita em outros trabalhos.Tese (Doutorado) – Programa Multicêntrico de Pós-Graduação em Ciências Fisiológicas, Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri, 2015.ABSTRACT The Pseudobrickellia brasiliensis (Spreng) R. M. King & H. Rob., (Asteraceae) is native from Brazilian flora, and its alcoholic preparation has been used topically as anti-inflammatory in folk medicine. Considering the lack of studies about the bioactivity and chemical composition of this specie, the aim of this study was to evaluate the effect of P. brasiliensis aerial parts preparations on in vitro inflammatory parameters, and perform analysis of its chemical constituents. The plant stems, flowers and leaves phytochemical screening was carried out by chromogenic, fluorogenic and precipitation reactions and suggested the presence of saponins, terpenes, tannins and flavonoids in the aerial parts of the plant. The ethanolic extracts of stems (PBETca), flowers (PBETfl) and leaves (PBETfo) were evaluated by high performance liquid chromatography coupled to diode array detector (HPLC-DAD). These analyses suggested the presence of flavonoids in the extracts, especially the flavones and flavonols subclasses. The flowers (PBOEfl) and leaves (PBOEfo) essential oils were analyzed by gas chromatography coupled to mass spectrometry (GC-MS), and it was possible to identify 22 and 27 compounds in PBOEfl and PBOEfo, respectively. Among the compounds the β-pinene, limonene, α-pinene, sabinene, caryophyllene oxide and E-caryophyllene were present in high porcentage. A 4h culture of whole blood was prepared to evaluate the hemolytic effect of the extracts, determined by supernatant optical density at 540 nm. There were hemolysis induction in cultures treated with PBETca or PBETfo at concentrations exceeding 100 μg/mL. The extract PBETfl induced hemolysis in cultures at a final concentration of 200 μg/mL. The natural products toxicity to human Peripheral Blood Mononuclear Cells (PBMCs) after 24 h and 5 days were assessed by flow cytometry using trypan blue or propidium iodide. The effect of non-toxic concentrations of the natural products on TNF-α, IFN-γ and IL-2 production was determined by ELISA of 24h supernatants culture after stimulation with phorbol myristate acetate (PMA) + Ionomycin. All extracts and essential oils reduced the TNF-α production. The IFN-γ synthesis was inhibited by PETfo extract and PBOEfl essential oil.The PBETfo and PBOEfl inhibited the IFN-γ synthesis. The PBOEfl and all ethanolic extracts inhibited IL-2 production. The PBETfo was fractionated by solvent partitioning of increasing polarity and all fractions were effective in inhibiting the TNF-α synthesis by PBMC after 24 h culture. Only the hexane fraction reduced the IFN-γ and IL-2 synthesis. Whole blood cultures stimulated with lipopolysaccharide (LPS) were prepared to investigate the effect of essential oils on COX-2 expression by flow cytometry. Essential oils did not affect the expression of COX-2. Our findings suggest that the anti-inflammatory effect attributed to P.brasiliensis in folk medicine can, at least in part, be due to the inhibition of proinflammatory cytokines production by human lymphocytes and monocytes. It is possible that flavonoids of flavones and flavonols subclasses may contribute to the biological activity of ethanolic extracts of P. brasiliensis. Many monoterpenes and sesquiterpenes present in essential oils of P. brasiliensis flowers and leaves already had the anti-inflammatory activity described in other studies.porUFVJMA concessão da licença deste item refere-se ao à termo de autorização impresso assinado pelo autor, assim como na licença Creative Commons, com as seguintes condições: Na qualidade de titular dos direitos de autor da publicação, autorizo a Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri e o IBICT a disponibilizar por meio de seus repositórios, sem ressarcimento dos direitos autorais, de acordo com a Lei nº 9610/98, o texto integral da obra disponibilizada, conforme permissões assinaladas, para fins de leitura, impressão e/ou download, a título de divulgação da produção científica brasileira, e preservação, a partir desta data.info:eu-repo/semantics/openAccessComposição química e efeito sobre mediadores inflamatórios de preparações de partes aéreas de Pseudobrickellia brasiliensis (Spreng) R. M. King & H. Rob (arnica-do-campo) in vitroinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisPseudobrickellia brasiliensisAnti-inflamatórioCitocinas pró-inflamatóriasFlavonoidesÓleo essencialreponame:Repositório Institucional da UFVJMinstname:Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)instacron:UFVJMTHUMBNAILvaleria_gomes_almeida.pdf.jpgvaleria_gomes_almeida.pdf.jpgGenerated Thumbnailimage/jpeg2953https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/987b0686-b895-4f14-95e0-eb118fe68f23/download4e0d8acd75a7e8e1b565b35a9d59350bMD57falseAnonymousREADORIGINALvaleria_gomes_almeida.pdfvaleria_gomes_almeida.pdfapplication/pdf4026192https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/cd6d2ce5-d4e0-4e82-afe1-4ce54b3145c3/downloadb5681abc4a430487b1ac936cd81615c3MD51trueAnonymousREADCC-LICENSElicense_urllicense_urltext/plain; charset=utf-852https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/34b2c912-4965-4f1f-be7b-4a6fe9b82c7f/download3d480ae6c91e310daba2020f8787d6f9MD52falseAnonymousREADlicense_textlicense_texttext/html; charset=utf-822889https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/998dac56-4cd4-4c9e-986a-2f71782a6bbb/downloadb324517128fdd85fa005b1fdab101753MD53falseAnonymousREADlicense_rdflicense_rdfapplication/rdf+xml; charset=utf-80https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/80ea7087-a788-4fda-be61-3b86f77875d2/downloadd41d8cd98f00b204e9800998ecf8427eMD54falseAnonymousREADLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain; charset=utf-82052https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/b1acbd09-4ff5-45c2-8a5a-db956d7953e7/downloada475df7be3470c8e322e2fcddfe6ab57MD55falseAnonymousREADTEXTvaleria_gomes_almeida.pdf.txtvaleria_gomes_almeida.pdf.txtExtracted texttext/plain272316https://acervo.ufvjm.edu.br//bitstreams/730bfbef-8b9f-48db-8315-6e7607d40def/download5c6dd21ec20f4b4e1fc0a2412c3a2ff1MD56falseAnonymousREAD1/7982024-09-12 06:12:48.752open.accessoai:acervo.ufvjm.edu.br:1/798https://acervo.ufvjm.edu.br/Repositório InstitucionalPUBhttps://repositorio.ufvjm.edu.brrepositorio@ufvjm.edu.bropendoar:21452024-09-12T06:12:48Repositório Institucional da UFVJM - Universidade Federal dos Vales do Jequitinhonha e Mucuri (UFVJM)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