Avaliação da senescência e do efeito do congelamento em culturas primárias de células pulpares de paciente com Síndrome de Raine

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Watanabe, Letícia Odaguiri
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Monografias da UnB
Texto Completo: https://bdm.unb.br/handle/10483/27318
Resumo: Trabalho de Conclusão de Curso (graduação)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Odontologia, 2019.
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spelling Watanabe, Letícia OdaguiriLima, Caroline Lourenço dePoppe, Ana Carolina AcevedoWATANABE, Letícia Odaguiri. Avaliação da senescência e do efeito do congelamento em culturas primárias de células pulpares de paciente com Síndrome de Raine. 2019. 81 f., il. Trabalho de Conclusão de Curso (Bacharelado em Odontologia)—Universidade de Brasília, Brasília, 2019.https://bdm.unb.br/handle/10483/27318Trabalho de Conclusão de Curso (graduação)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Departamento de Odontologia, 2019.A síndrome de Raine (SR), pertencente às displasias osteoescleróticas, é uma doença rara, caracterizada pela presença de anomalias craniofaciais, calcificações ectópicas e alterações dentárias, tais como amelogênese imperfeita e defeitos dentinários. A SR é causada por mutações autossômicas recessivas no gene FAM20C, que codifica uma quinase responsável, entre outras funções, por fosforilar proteínas envolvidas com o processo de biomineralização. Nesse sentido, o estabelecimento de modelos experimentais faz-se importante para melhor compreensão das manifestações oro-dentais observadas nesses pacientes, além de possibilitar o surgimento de novas evidências que auxiliem em seu diagnóstico e tratamento. Em um estudo anterior realizado in vitro comcélulas pulpares humanas (CPHs) de um paciente com SR que apresentava alterações dentinárias graves, foi observado que as células aprentavam morfologia alterada e capacidade proliferativa reduzida, sugerindo um fenótipo senescente. Contudo, por terem passado pelo processo de congelamento, a hipótese de que a senescência teria ocorrido pela criopresevação foi levantada. Diante disso, os objetivos do presente estudo foram: 1) avaliar se a criopreservação a -80°C altera o padrão de proliferação e senescência de CPHs de indivíduos saudáveis, 2) comparar o padrão de proliferação e senescência de CPHs de paciente com SR e indivíduos saudáveis. Para isso, foram estabelecidas culturas primárias de polpa dentária de 1 indivíduo com SR e de 4 indivíduos saudáveis para compor o grupo controle. Foram realizados os ensaios de tempo de dobra populacional (Doubling Time, DT), de β-galactosidase e expressão do gene P21, tanto nas células SR quanto nos controles, antes e após a criopreservação. A linhagem pulpar SR demonstrou padrão de DT e senescência similar ao dos controles, não houve diferença significativa nesses ensaios entre os grupos de CPHs congeladas e frescas. Em relação à expressão do gene P21, não houve diferença estatística entre controles frescos e criopreservados. Assim, diferente do que foi descrito anteriormente, sugere-se que a cultura primária de células pulpares do paciente SR avaliado apresentou padrão de proliferação e senescência semelhante ao de pacientes saudáveis e a criopreservação a -80°C parece não alterar o padrão de proliferação e a taxa de senescência de CPHs. Tais diferenças entre estudos podem ser atribuídas à heterogeneidade inerente às culturas primárias e ao fato das culturas serem provenientes de dentes de pacientes com mutações diferentes e com grau de patologia pulpar distinto.Submitted by Luiza Alves (luizaalves004@gmail.com) on 2021-04-21T16:25:43Z No. of bitstreams: 1 2019_LeticiaOdaguiriWatanabe_tcc.pdf: 1507098 bytes, checksum: 3bded22bfc0d7095f448c9371eef6daf (MD5)Approved for entry into archive by Luanna Maia (luanna@bce.unb.br) on 2021-04-27T13:07:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2019_LeticiaOdaguiriWatanabe_tcc.pdf: 1507098 bytes, checksum: 3bded22bfc0d7095f448c9371eef6daf (MD5)Made available in DSpace on 2021-04-27T13:07:23Z (GMT). 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However, since they were cryopreserved in freezer -80, the hypothesis that senescence could be a consequence of the cryopreservation conditions was raised. Therefore, the objectives of the present study were: 1) to evaluate whether cryopreservation at -80°C alters the pattern of proliferation and senescence of CPHs in healthy individuals, 2) to compare the pattern of CPHs proliferation and senescence in patients with RS and healthy individuals. For this, primary dental pulp cultures were established from 1 individual with SR and 4 healthy individuals in the control group. Population doubling time (DT), β-galactosidase and P21 gene expression assays were performed on both SR cells and controls before and after cryopreservation. The SR CPHs populations showed a pattern of DT and senescence similar to the controls cells, with no significant statistical difference in these assays between the frozen and fresh CPHs groups. Regarding P21 gene expression, there was no significant statistical difference between fresh and frozen controls Thus, it is suggested that the primary pulp cell culture of the assessed RS patient exhibit similar proliferation and senescence patterns as in healthy patients, and cryopreservation at -80 ° C does not appear to alter the proliferation pattern and senescence rate of CPH. The differences between these results and those previously obtained may be explained by the heterogeneity of the primary cultures, and by the inclusion of patients with different mutations with different degree of pulp pathology.A concessão da licença deste item refere-se ao termo de autorização impresso assinado pelo autor que autoriza a Biblioteca Digital da Produção Intelectual Discente da Universidade de Brasília (BDM) a disponibilizar o trabalho de conclusão de curso por meio do sítio bdm.unb.br, com as seguintes condições: disponível sob Licença Creative Commons 4.0 International, que permite copiar, distribuir e transmitir o trabalho, desde que seja citado o autor e licenciante. Não permite o uso para fins comerciais nem a adaptação desta.info:eu-repo/semantics/openAccessDisplasiaRaine, Síndrome dePolpa dentáriaAvaliação da senescência e do efeito do congelamento em culturas primárias de células pulpares de paciente com Síndrome de RaineEvaluation of senescence and the effect of cryopreservation in primary cultures of pulp cells of patient with Raine Syndromeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/bachelorThesis2021-04-27T13:07:23Z2021-04-27T13:07:23Z2019porreponame:Biblioteca Digital de Monografias da UnBinstname:Universidade de Brasília (UnB)instacron:UNBLICENSElicense.txtlicense.txttext/plain1817http://bdm.unb.br/xmlui/bitstream/10483/27318/2/license.txt21554873e56ad8ddc69c092699b98f95MD52ORIGINAL2019_LeticiaOdaguiriWatanabe_tcc.pdf2019_LeticiaOdaguiriWatanabe_tcc.pdfapplication/pdf1507098http://bdm.unb.br/xmlui/bitstream/10483/27318/1/2019_LeticiaOdaguiriWatanabe_tcc.pdf3bded22bfc0d7095f448c9371eef6dafMD5110483/273182021-04-27 10:07:23.426oai:bdm.unb.br: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Biblioteca Digital de Monografiahttps://bdm.unb.br/PUBhttp://bdm.unb.br/oai/requestbdm@bce.unb.br||patricia@bce.unb.bropendoar:115712021-04-27T13:07:23Biblioteca Digital de Monografias da UnB - Universidade de Brasília (UnB)false
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