Caracterização de uma proteina "crotoxina-simile" do veneno de Bothrops jararacussu

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Silva, Maura Antonia da
Data de Publicação: 1997
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1585539
Resumo: Orientadores: Julia Prado Franceschi, Stephen Hyslo
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spelling Caracterização de uma proteina "crotoxina-simile" do veneno de Bothrops jararacussuVenenosImunoglobulinasCrotoxinaOrientadores: Julia Prado Franceschi, Stephen HysloDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias MedicasResumo: O objetivo deste estudo foi verificar a distribuição de proteínas imunológicamente semelhantes à crotoxina venenos botrópicos, e isolar e caracterizar, a partir do veneno de Bothrops jararacussu, a(s) proteína(s) com esta imunoreatividade. Utilizando um anticorpo anti¬crotoxina, verificamos através dos métodos de ELISA e "immunoblotting" que, de modo geral, os venenos botrópicos possuem um baixo conteúdo de proteínas imunológicamente relacionadas à crotoxina. O teste ELISA foi dez vezes mais sensível que o immunoblotting para demonstrar a relação imunológica destes veneno. Através de cromatografia por imunoafinidade, purificamos uma proteína do veneno de B. jararacussu que foi reconhecida pelo anticorpo anti-crotoxina. A eletroforese na presença de SDS mostrou que essa proteína possue uma massa molecular em tomo de 100 kDa e que, na presença de p-mercaptoetanol esse peso cai para a faixa de 30 kDa (região da crotoxina), sugerindo que a proteína normalmente ocorre em forma multimérica. A proteína purificada não possui atividade fosfolipásica, não causa bloqueio neuromuscular na preparação biventer-cervicis de pintainho e não corresponde à bothropstoxina I (BthTx) ou à lectina presentes neste mesmo veneno, uma vez que estas duas proteínas não reagiram com o anticorpo anti-crotoxinaAbstract: This thesis examines the distribution in Bothrops venoms of proteins immunologieally related to erotoxin and deseribes the purifieation and partia! eharaeterizatin of one sueh protein ftom the venom of Bothrops jararacussu. An enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunoblotting showed that Bothrops venoms generally possess few proteins that interaet with anti-erotoxin antibodies. The ELISA was generally more useful than immunoblotting for investigating these relationships beeause of its greater sensitivity. Immunoaflinity ehromatography of B. jararacussu venom on Sepharose 4B eoupled to anti-erotoxin antibodies yielded a protein with a of 100,000 by SDS-PAGE. Sinee in the presence of mercaptoetanol this MW decreased to 30 kDa (approx. MW of crotoxin), it seems likely that the protein normally exists in a multimeric formo The purified protein had no phospholipase aetivity nor did it produce neuromuscular blockade in the chick biventer cervicis preparation. This protein does not correspond to either bothropstoxin I or to a lectin isolated ftom this same venom sinee neither of the latter reacted with the anti-crotoxin antibody in the ELISAMestradoFarmacologiaMestre em Ciências Médicas[s.n.]Franceschi, Julia Prado, 1932-Hyslop, Stephen, 1964-Ribeiro, Lindioneza AdrianoDonato, Jose LuizUniversidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Ciências MédicasUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASSilva, Maura Antonia da19971997-12-05T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf61f. : il.(Broch.)https://hdl.handle.net/20.500.12733/1585539SILVA, Maura Antonia da. Caracterização de uma proteina "crotoxina-simile" do veneno de Bothrops jararacussu. 1997. 61f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1585539. Acesso em: 14 mai. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/123267porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T02:42:11Zoai::123267Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T02:42:11Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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