Efeitos da suplementação com óleo de coco no hipotálamo e no tecido adiposo de camundongos swiss saudáveis

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Véras, Alana Carolina Costa, 1990-
Data de Publicação: 2022
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/6109
Resumo: Orientador: Marcio Alberto Torsoni
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spelling Efeitos da suplementação com óleo de coco no hipotálamo e no tecido adiposo de camundongos swiss saudáveisEffects of supplementation with coconut oil on hypothalamus and adipose tissue healthy swiss miceÓleo de cocoInflamaçãoLeptinaHipotálamoTecido adiposoCoconut oilInflammationLeptinHypothalamusAdipose tissueOrientador: Marcio Alberto TorsoniTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências AplicadasResumo: O uso do óleo de coco (CO) na dieta permanece controverso devido aos possíveis efeitos adversos dos ácidos graxos saturados e sua associação com desordens metabólicas e obesidade. O presente estudo investigou os efeitos metabólicos da suplementação de CO no hipotálamo e tecido adiposo de camundongos Swiss saudáveis. O protocolo experimental foi aprovado pelo CEUA da UNICAMP (no5124-1/2019). Camundongos, machos, Mus musculus da linhagem Swiss (com 5 semanas de vida) alimentados com dieta normal (ad libitum), foram randomicamente distribuídos em grupos e suplementados oralmente, por 8 semanas, com 300 ?L de água para o grupo controle (CV), 100 ou 300 ?L de óleo de coco (CO100 e CO300, respectivamente) e 100 ou 300 ?L de óleo de soja (SO100 e SO300, respectivamente). No mais, os camundongos foram estimulados com solução salina ou leptina ou insulina para avaliação da sensibilidade à leptina e sinalização da leptina e insulina após oito semanas de suplementação. A ingestão alimentar e o peso corporal foram mensurados semanalmente. Ao final do período de suplementação analisou-se parâmetros metabólicos por calorimetria indireta, comportamentais e moleculares, como expressão das citocinas TNF-?, IL-1?, IL-6 e da quimiocina CCL2 por qPCR e expressão das proteínas pJNK e pNF?B por WB. No mais, tratou-se linhagem celular neuronal (mHypoA-2/29) com soro dos camundongos suplementados com CO, na presença ou ausência do inibidor de TLR4 (TAK-242) e mensurou-se por qPCR a expressão de TNF-? e NFKBia e por WB a migração de NFKB para o núcleo. Para análise estatística foram aplicados: teste t de Student; teste t pareado; análise de variância unilateral (ANOVA) seguida de Student-Newman-Keuls. Enquanto para amostras não paramétricas, aplicou-se os testes de Wilcoxon e Kruskal Wallis. As diferenças foram consideradas significantes para p< 0,05. Não houve alteração na ingestão dietética durante o período experimental. A suplementação com CO levou ao aumento do ganho de peso corporal e da adiposidade, redução do gasto energético e da atividade locomotora, e indução de um comportamento ansioso. No hipotálamo, o consumo de CO aumentou a expressão gênica de citocinas pró-inflamatórias, como TNF-?, IL-1? e IL- 6, a fosforilação de JNK e NFKB e o conteúdo proteico de TLR4. Ainda, observou-se aumento da infiltração de macrófagos bem como da expressão gênica de TNF-? e IL6 no tecido adiposo dos animais suplementados com CO. Contudo, a expressão dos genes IL-1B e CCL2, os níveis de pJNK e pNF?B aumentaram apenas no tecido adiposo do CO300. Ademais, células neuronais tratadas com soro de camundongos suplementados com CO mostraram aumento na expressão gênica de TNF-? e NF?Bia e maior migração de NFKB para o núcleo. Contudo, esses efeitos foram evitados por tratamento prévio com inibidor de TLR4. Por fim, a suplementação com CO induziu estresse de retículo endoplasmático no hipotálamo e resistência à leptina hipotalâmica, conforme demonstrado pelo efeito reduzido da leptina no gasto de energia, fosforilação de JAK2 e STAT3 hipotalâmica e expressão de POMC. No tecido adiposo, a lipogênese foi favorecida e a sinalização de STAT3 e JAK2 prejudicada após suplementação de CO e estimulação com leptina. Contudo, a suplementação de CO por oito semanas não desencadeou resistência à insulina. A suplementação com CO, por 8 semanas, altera parâmetros metabólicos, estimula resposta pró-inflamatória, por meio de um mecanismo mediado por TLR4, induz disfunção comportamental, estresse de retículo endoplasmático no hipotálamo e resistência hipotalâmica e periférica à leptina em camundongos Swiss saudáveisAbstract: The use of coconut oil (CO) in the diet remains controversial due to the possible adverse effects of saturated fatty acids and their association with metabolic disorders and obesity. This study investigated the metabolic effects of CO supplementation on the hypothalamus and adipose tissue of healthy Swiss mice. The experimental protocol was approved by the CEUA of UNICAMP (no5124 1/2019). Male Swiss, Mus musculus, mice (5 weeks old) fed a normal diet (ad libitum) were randomly distributed into groups and supplemented orally, for 8 weeks, with 300 ?L of water for the control group (CV),100 or 300 ?L of coconut oil (CO100 and CO300, respectively) and 100 or 300 ?L of soybean oil (SO100 and SO300, respectively). Furthermore, mice were stimulated with saline solution or leptin or insulin to assess leptin sensitivity and leptin and insulin signaling after eight weeks of supplementation. Food intake and body weight were measured weekly. At the end of the supplementation period, metabolic parameters were analyzed by indirect calorimetry, behavioral and molecular parameters, such as expression of the cytokines TNF-?, IL-1?, IL-6 and the chemokine CCL2 by qPCR and expression of pJNK and pNF?B proteins by WB. Furthermore, a neuronal cell line (mHypoA-2/29) was treated with CO supplemented mice serum, in the presence or absence of TLR4 inhibitor (TAK 242) and the expression of TNF-? and was measured by qPCR. NFKBia and by WB the migration from NFKB to the core. For statistical analysis were applied: Student's t test; paired t test; One-way analysis of variance (ANOVA) followed by Student-Newman-Keuls. As for non-parametric samples, the Wilcoxon and Kruskal Wallis tests were applied. Differences were considered significant at p<0.05. There was no change in dietary intake during the experimental period. Supplementation with CO led to an increase in body weight gain and adiposity, a reduction in energy expenditure and locomotor activity, and induction of anxious behavior. In the hypothalamus, CO consumption increased the gene expression of pro-inflammatory cytokines, such as TNF-?, IL-1? and IL-6, the phosphorylation of JNK and NFKB and the protein content of TLR4. Furthermore, an increase in macrophage infiltration was observed, as well as in the gene expression of TNF-? and IL-6 in the adipose tissue of animals supplemented with CO. However, the expression of IL-1B and CCL2 genes, pJNK and pNF?B levels increased only in CO300 adipose tissue. Furthermore, neuronal cells treated with CO-supplemented mouse serum showed increased gene expression of TNF-? and NF?Bia and greater migration of NFKB to the nucleus. However, these effects were avoided by prior treatment with a TLR4 inhibitor. Finally, CO supplementation induced endoplasmic reticulum stress in the hypothalamus and resistance to hypothalamic leptin, as demonstrated by the reduced effect of leptin on energy expenditure, hypothalamic JAK2 and STAT3 phosphorylation, and POMC expression. In adipose tissue, lipogenesis was favored and STAT3 and JAK2 signaling was impaired after CO supplementation and leptin stimulation. However, eight weeks of CO supplementation did not trigger insulin resistance. Supplementation with CO for 8 weeks alters metabolic parameters, stimulates a proinflammatory response through a TLR4-mediated mechanism, induces behavioral dysfunction, endoplasmic reticulum stress in the hypothalamus and hypothalamic and peripheral resistance to leptin in mice healthy SwissDoutoradoMetabolismo e Biologia MolecularDoutora em Ciências da Nutrição e do Esporte e MetabolismoCAPES0[s.n.]Torsoni, Marcio Alberto, 1967-Rodrigues, Hosana GomesFerreire, Adaliene Versiani MatosLeandro, Carol Virgínia GóisBezerra, Rosangela Maria NevesUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências AplicadasPrograma de Pós-Graduação em Ciências da Nutrição e do Esporte e MetabolismoUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASVéras, Alana Carolina Costa, 1990-20222022-04-26T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf1 recurso online (94 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/6109VÉRAS, Alana Carolina Costa. Efeitos da suplementação com óleo de coco no hipotálamo e no tecido adiposo de camundongos swiss saudáveis. 2022. 1 recurso online (94 p.) Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Aplicadas, Limeira, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/6109. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1253738Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2022-10-20T14:40:44Zoai::1253738Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2022-10-20T14:40:44Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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