Lipase de farelo de arroz : extração, imobilização e aplicação

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Bella Cruz, Alexandre
Data de Publicação: 2000
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1588199
Resumo: Orientador: Daniel Barrera-Arellano
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spelling Lipase de farelo de arroz : extração, imobilização e aplicaçãoFarelo de arrozLipaseEnzimasOrientador: Daniel Barrera-ArellanoTese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de AlimentosResumo: Extratos bruto de lipase (EB) obtidos a partir de farelo de arroz previamente desengordurado, foram extraídos com três diferentes soluções: 1(CaCb 10mM), 2 (Sacarose 0,6M, KCI 10mM, MgCb 1mM, Ditiotreitol 2mM) e 3 (Sacarose O,4M, DitiotreitoI2mM). A metodologia de superfície de resposta foi aplicada, sendo os fatores (variáveis) estudados: pH (6,0; 7,0 e 8,0) e tempo de extração (1h, 2h e 3h). A temperatura de extração foi fixada em 4°C. Os extratos obtidos apresentaram diferentes graus de atividade de lipase, sendo que o extrato bruto que apresentou a maior atividade específica de lipase, foi a solução 1 (13,5mU/mg). Realizou-se a purificação parcial deste extrato bruto através de dois métodos distintos de precipitação de lipase, resultando em extrato semipurificado com acetona (ESP-acetona) e extrato semi-purificado com sulfato de amônio (ESP-sulfato amônio), que apresentaram atividade específica de 50,7mU/mg e 63mU/mg, respectivamente. Os extratos semi-purificados foram imobilizados por adsorção sobre vários suportes, dos quais poliamida e sílica, apresentaram os maiores índices de atividade específica de lipase, correspondente a 48,4mU/mg e 48,2mU/mg respectivamente para o ESP-acetona e 59,3mU/mg e 59,7mU/mg para o ESP-sulfato amônio. Dos ESP imobilizados, avaliou-se sua capacidade hidrolítica sobre diferentes triacilgliceróis e de síntese de ésteres utilizando diferentes substratos. A tributirina seguida do óleo de oliva e óleo de arroz, foram os substratos que apresentaram os maiores índices de hidrólise. A reação entre álcool metílico e ácido butírico apresentou o maior índice de conversão de ácidos em ésteres para os ESP imobilizados em poliamida e álcool butírico e ácido butírico para os ESP imobilizados sobre sílica. Avaliouse o comportamento de atividade de lipase de todos os extratos durante 8 meses. Os ESP acetona e sulfato de amônio imobilizados apresentaram atividade cerca de 2,4 a 2,6 vezes maior que os ESP não imobilizados. O extrato bruto armazenado congelado a -18°C, apresentou atividade de lipase muito reduzida e o EB refrigerado a 4°C, não mais apresentou atividade no tempo final do experimentoAbstract: Crude lipase extracts (CE), obtained from previously defated rice bran, were extracted with three different solutions: 1 (CaCb 10mM), 2 (Sucrose 0.6M, KCI 10mM, MgCb 1mM, Dithiothreitol 2mM) and 3 (Sucrose O.4M, Dithiothreitol 2mM). The surface response methodology was applied, being pH (6.0, 7.0 and 8.0) and time of extraction (1:00, 2:00 and 3:00) the studied factors (variables). The extraction temperature was settled in 4°C. The obtained extracts have presented different degrees of lipase activity, and the crude extract that presented the largest specific activity of lipase, was the solution 1 (13.5mU/mg). The partial purification of this crude extract was accomplished through two different methods of lipase precipitation; resulting in semi-purified extract with acetone (SPE-acetone) and semi-purified extract with ammonium sulfate (SPE-ammonium sulfate), that presented specific activity of 50.7mU/mg and 63mU/mg, respectively. The semipurified extracts were immobilized by adsorption on several supports, from which polyamide and silica presented larger lipase specific activity corresponding to 48.4mU/mg and 48.2mU/mg, respectively, for the SPE-acetone and 59.3mU/mg and 59.7mU/mg for the SPE-ammonium sulfate. Immobilized SPE were evaluated regarding their hydrolytic capacity on different triacylglycerols and esters synthesis using different substrate. The tributyrin, followed by the olive oil and rice oil, were the substrate that presented the largest hydrolysis rates. The reaction between methilic alcohol and butyric acid presented the largest acids in esters conversion rate for SPE immobilized in polyamide and butyric alcohol and butyric acid for SPE immobilized on silica. The behavior of lipase activity of ali the extracts has been evaluated for 8 months. The SPE acetone and immobilized ammonium sulfate presented about 2.4 to 2.6 times more activity than the not immobilized SPE. The frozen stored crude extract at -18°C, for 8 months presented a very reduced lipase activity and CE refrigerated at 4°C, has not presented activity in the same time anymoreDoutoradoDoutor em Tecnologia de Alimentos[s.n.]Barrera Arellano, Daniel, 1953-Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Engenharia de AlimentosPrograma de Pós-Graduação em Tecnologia de AlimentosUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASBella Cruz, Alexandre2000info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdf105p. : il.(Broch.)https://hdl.handle.net/20.500.12733/1588199BELLA CRUZ, Alexandre. Lipase de farelo de arroz: extração, imobilização e aplicação. 2000. 105p. Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1588199. 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