Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Ferreira, João Carlos Dias
Data de Publicação: 1983
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1577400
Resumo: Orientador : Yong Kun Park
id UNICAMP-30_56b689f64d1be79e69fdd265075ed2fb
oai_identifier_str oai::47593
network_acronym_str UNICAMP-30
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository_id_str
spelling Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxiPartial purification and characterization of peroxidase of pineappleAbacaxiTécnicas imunoenzimáticasPineappleTechnical immunosorbentOrientador : Yong Kun ParkDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e AgricolaResumo: De urna amostra de quatro abacaxis '(Ananas comosus (L.) merril) cv Pérola, foram extraldos, por homogenização da polpa, sem adição de água, 2 800 ml de suco. Ao mesmo foi adicionado (NH4}2 504 a uma concentração de 40% de saturação. Após um perIodo de 16 horas de repouso a 40C a amostra foi centrifugada e o precipitado descartado. Ao sobrenadante foi adicionado (NH~}2 504 até 80% de saturação. Após 2lhoras de repouso a 4 C o precipitado foi separado por centrif~ gaçao e em seguida dialisado contra H20 durante 48 horas a 40C e contra tampao fosfato 0,05 M pH 6,0 durante outras 48 horas a 4 C. Após fracionamento com sulfato de amônio a peroxidase foi purificada em colunas de Dietilaminoetil celulose (DEAE-celulose) e carboximetil celulose (CM-celulose) sucessivarnen te. Na cromatografia em DEAE-celulose foram obtidas 5 frações distintas, eluidas com gradiente de NaCl. Em seguida cada uma das cinco frações foi submetida a cromatografia em c~ luna de CM-celulose. Na cromatografia da primeira fração ob tida da coluna de DEAE-celulose (em coluna de 'eM-celulose) foram obtidas duas frações denominadas fração V e fração VI. Na crornatografia em coluna de CM-celulose de cada uma das outras quatro frações obtidas na cromatografia em coluna de DEAE-celulose, foi obtida uma só fração em cada caso, sendo denominadas frações I, II, III e IV. As 6 frações contendo atividade de peroxidase foram dialisadas e liofilizadas para os estudos posteriores. Para a determinação do pH ótimo de atividade das vã rias isoenzimas da peroxidase do abacaxi foram utilizados os tampões acetato e fosfato. As frações I, II e III apresenta ram um pH ótimo de 5,2; a fração IV apresentou um ótimo de atividade a pH 5,4 e as frações V e VI apresentaram pH ótimo de 5,0. O estudo da estabilidade térmica foi conduzido submetendo-se as diversas frações a tratamentos a 75°, 80°, 85° e 90 C por tempos de 30",1',2' e 3'; sendo logo a seguir d~ terminadas as atividades residuais. Utilizando-se a equação de Arrhenius determinaram-se as energias de inativação que foram da ordem de 23 a 37 kcal/mol para as várias fraçõesAbstract: From a sample of four pineapples . {Ananas comosus (L. ) merril) Perola breed, 2 800 ml of juice were extracted, by homogenization of the pulp, without water addition. Anm:>nÍUm sulfate at a concentration of 40% of saturation was added to the jui ce. After a period of resting, the sample was centrifugated and the precipitate was discarded. Enough (NH4)2 504 was ad ded to he supernatant in order to reach a concentration of 80% of saturation. A new resting period was followed by cen trifugation. The resulting supernatant was discarded, and the precipitate was dialised. The purification of the peroxidase started afterwards, with the use of the Ionic cromatography technique. First of alI the dialised was applied to a previously prepared Die thyl-aminoethylcellulose (DEAE-celulose) oolumn and eluted from it with the use of increasing concentrations of NaCI. Five distinct fractions were obtained in this phase. Only the first fraction was shown not to link i tself to DEAE~e'el lulose and was therefore called "the unlinked fraction". The four other anionic fractions were identified by the numbers I through IV. Each one of the five fractions was dialised and added to a previously prepared carboxymethylcellulose(CM celulose) column and eluted from it with increasing concen trations of Na CI. When submitted to CM-cellulose c hroma to graphy the unlinked fraction generated two other fractions, (V and VI) one of them classificated as no-ionic because it didn't linked itself to the CM-cellulose too, and the last one classificated as cationic because it linked itself to CM-cellulose. Fractions I through IV, when submitted to an identical process generated each one a single final fraction. The anionic character of fractions I through IV was shown by the fact that none of their final fractions linked itself to CM-eellulose. The six fraetions were dialised and liofilised for storage in order to allow later experiments. The optimum pH determination for eaeh one of the seve ral isoenzimes of pineapple peroxidase were made using sodium aeetate bUffer solutions for the aeidie pH and phosphate buffer solutions for the basie pH The following values we re obtained: 5,2 for three of the anionie isoenzimes; 5,4 for the other and 5,0 for the ~wo other ones. The study of the thermal stability of the was eondueted submitig the several fraetions to at 75°, 80°, 85° and 900C for periods of 30", 1', 2' and 3'; followed by imediate determination of the remainding peroxi dase aetivities. With the utilization of the Arrhenius equ~ tion, the inativation energies were determined and were to range from 23 to 37 keal/mol for the several fraetionsMestradoMestre em Tecnologia de Alimentos[s.n.]Park, Yong Kun, 1930-2018Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Engenharia de Alimentos e AgrícolaPrograma de Pós-Graduação em Tecnologia de AlimentosUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASFerreira, João Carlos Dias1983info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf89f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1577400FERREIRA, João Carlos Dias. Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi. 1983. 89f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agricola, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1577400. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/47593porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2022-04-12T18:36:55Zoai::47593Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2022-04-12T18:36:55Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
dc.title.none.fl_str_mv Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi
Partial purification and characterization of peroxidase of pineapple
title Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi
spellingShingle Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi
Ferreira, João Carlos Dias
Abacaxi
Técnicas imunoenzimáticas
Pineapple
Technical immunosorbent
title_short Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi
title_full Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi
title_fullStr Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi
title_full_unstemmed Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi
title_sort Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi
author Ferreira, João Carlos Dias
author_facet Ferreira, João Carlos Dias
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Park, Yong Kun, 1930-2018
Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agrícola
Programa de Pós-Graduação em Tecnologia de Alimentos
UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS
dc.contributor.author.fl_str_mv Ferreira, João Carlos Dias
dc.subject.por.fl_str_mv Abacaxi
Técnicas imunoenzimáticas
Pineapple
Technical immunosorbent
topic Abacaxi
Técnicas imunoenzimáticas
Pineapple
Technical immunosorbent
description Orientador : Yong Kun Park
publishDate 1983
dc.date.none.fl_str_mv 1983
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv https://hdl.handle.net/20.500.12733/1577400
FERREIRA, João Carlos Dias. Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi. 1983. 89f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agricola, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1577400. Acesso em: 2 set. 2024.
url https://hdl.handle.net/20.500.12733/1577400
identifier_str_mv FERREIRA, João Carlos Dias. Purificação e caracterização parcial da peroxidase do abacaxi. 1983. 89f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos e Agricola, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1577400. Acesso em: 2 set. 2024.
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/47593
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
89f. : il.
dc.publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
publisher.none.fl_str_mv [s.n.]
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron:UNICAMP
instname_str Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
instacron_str UNICAMP
institution UNICAMP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
repository.mail.fl_str_mv sbubd@unicamp.br
_version_ 1809188727931535360

Registros relacionados