Expressão de enzimas envolvidas na produção de triacilglicerol em tecidos adiposo e hepático isolados de ratos normo e hiperlipidêmicos
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Data de Publicação: | 2012 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) |
Texto Completo: | https://hdl.handle.net/20.500.12733/1618061 |
Resumo: | Orientador: Dora Maria Grassi Kassisse |
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Expressão de enzimas envolvidas na produção de triacilglicerol em tecidos adiposo e hepático isolados de ratos normo e hiperlipidêmicosExpression of enzymes involved in the production of triacylglycerol in adipose and liver isolated tissue from normo and hyperlipidemic ratsRatoDieta hiperlipídicaAdipócitosTriglicerídeosRatsHigh-fat dietAdipocytesLiver - Cells and tissuesTriglyceridesOrientador: Dora Maria Grassi KassisseDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: A pandemia da obesidade é evidente no início do século XXI. O fator desencadeante mais relevante é a alimentação hipercalórica associada ao sedentarismo. Modelos de estudo em ratos para investigar as etapas que precedem o desenvolvimento desta doença são fundamentais para propor terapias de prevenção. No modelo de indução da dislipidemia pela dieta por quatro semanas, os ratos apresentam hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia e hiperinsulinemia e com seis semanas de administração da dieta observa-se um aumento no peso dos panículos adiposos da região epididimal e peri-renal e sem alteração no depósito da região mesentérica. Assim sendo, objetivamos, nesta tese, analisar as vias metabólicas envolvidas no processo de metabolização da glicose e triacilgliceróis nos tecidos adiposo branco e hepático em ratos hiperlipidêmicos e para tal estudamos as vias lipogênica, lipolítica e neoglicogênica, pela quantificação da expressão gênica das enzimas chaves envolvidas nestes processos. A dislipidemia foi induzida pelo oferecimento de dieta hiperlipídica (grupo dieta, D) ao longo de quatro semanas a ratos jovens e a instalação do quadro foi verificada pelas análises plasmáticas ao final do tratamento e após jejum de 16h. Amostras de tecidos hepático e adiposo foram coletadas para análise histológica e quantificação da expressão gênica sendo estas analisadas por qRT-PCR. Observou-se que ratos que ingerem dieta hiperlipídica (+129+10,13 g) ganham peso de forma semelhante aos ratos controle (C: +148+8,8 g) mesmo ingerindo quantidade significativamente menor de dieta (C: 20,8+0,62 g vs D: 14,87+0,66 g). As análises histológicas ilustram aumento no teor de depósitos de lipídeos no tecido hepático. A expressão gênica no tecido hepático de ratos dieta foi aumentada significativamente para as enzimas lipoproteína lipase, piruvato desidrogenase quinase 4 e fosfofrutoquinase 1 e diminuição significativa na expressão de glicose 6-fosfatase sem alteração na quantificação da expressão de acetil-CoA carboxilase alpha, gliceroquinase, piruvato desidrogenase fosfatase 2. Em relação ao tecido adiposo observamos que a expressão das enzimas acetil-CoA carboxilase e piruvato desidrogenase fosfatase 2 não foi significativamente alterada em nenhum dos depósitos adiposos. A lipase hormônio-sensível não apresentou alterações no tecido adiposo epididimal, porém teve sua expressão significativamente aumentada nos tecidos mesentérico e peri-renal. A expressão da lipoproteína lipase por sua vez, não se alterou no panículo adiposo epididimal nem no panículo adiposo mesentérico estando diminuída no panículo adiposo peri-renal. E por fim, a piruvato desidrogenase quinase 4 também não apresentou alterações nos depósitos epididimal e mesentérico porém no peri-renal sua expressão encontrou-se aumentada. Estes resultados, em conjunto, indicam que a dieta administrada por 4 semanas, mesmo não apresentando todas as alterações observadas com 6 semanas, pode ser útil para os estudos iniciais do quadro de dislipidemia que antecedem as disfunções metabólicasAbstract: The pandemic of obesity is evident in the twenty-first century. The most important and triggering factor is the high-calorie diet associated with physical inactivity. Study models in rats to investigate the steps that precede the development of this disease are essential to propose preventive therapies. In the model of induction of dyslipidemia by diet for four weeks, the mice exhibit hypercholesterolemia, hypertriglyceridemia, and hyperinsulinemia and there is an increase in weight of the panniculus region of epididymal and peri-renal depot and no change in the mesenteric region. Therefore, we aimed to analyze the metabolic pathways involved in the metabolism of glucose and triglycerides in white adipose tissue, and liver in hyperlipidemic rats and to study the ways that lipogenic, lipolytic and glyconeogenic for the quantification of gene expression of key enzymes involved in these processes. Dyslipidemia was induced by offering high-fat diet (diet group, D) over four weeks to young rats and onset of condition was verified by analysis at the end of the plasma treatment and after fasting for 16 hours. Samples of liver and adipose tissue were collected for histological analysis and quantification of gene expression and these were analyzed by qRT-PCR. It was observed that mice eat high-fat diet (+129 +10.13 g) gain weight similarly to control rats (C: +8.8 +148 g) even eating significantly less diet (C: 20.8 +0.62 g vs D: 14.87 +0.66 g). Histological analysis illustrate the content of lipid deposits in liver tissue. Gene expression in liver tissue of rats diet was significantly increased for the enzymes lipoprotein lipase, pyruvate dehydrogenase kinase 4 and 1 and Phosphofructokinase significant decrease in the expression of glucose 6-phosphatase no change in the quantification of the expression of acetyl-CoA carboxylase alpha, Gliceroquinase, pyruvate dehydrogenase phosphatase 2. In relation to the adipose tissue we observed that the expression of the enzyme acetyl-CoA carboxylase and pyruvate dehydrogenase phosphatase 2 was not significantly altered in any of the fatty deposits. The hormone-sensitive lipase showed no changes in epididymal adipose tissue but its expression was significantly increased in mesenteric tissue and peri-renal. Lipoprotein lipase, in turn, did not change in the mesenteric or epididymal being reduced in the peri-renal. And finally, the pyruvate dehydrogenase kinase 4 also showed no changes in epididymal and mesenteric but the peri-renal expression is increased. These results, together, indicate that the diet for 4 weeks, even not showing all changes observed within 6 weeks, can be useful for the initial studies of hyperlipidemia that precede the metabolic dysfunctionsMestradoFisiologiaMestre em Biologia Funcional e Molecular[s.n.]Grassi-Kassisse, Dora Maria, 1964-Grassi-Kassisse, Dora Maria, 1964-Gadelha, Fernanda RamosReyes, Felix Guillermo ReyesUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Biologia Funcional e MolecularUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASBellenzani, Marcela Palomo Pieroni, 1984-2012info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf112 p. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1618061BELLENZANI, Marcela Palomo Pieroni. Expressão de enzimas envolvidas na produção de triacilglicerol em tecidos adiposo e hepático isolados de ratos normo e hiperlipidêmicos. 2012. 112 p. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1618061. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/866560porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T06:40:12Zoai::866560Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T06:40:12Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false |
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