Atividade antimicrobiana in vitro de probióticos em Klebsiella pneumoniae produtora de carbapenemase, Escherichia coli, Salmonella enteritidis e Shigella flexneri
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2020 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) |
Texto Completo: | https://hdl.handle.net/20.500.12733/1640566 |
Resumo: | Orientador: Carlos Emilio Levy |
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Atividade antimicrobiana in vitro de probióticos em Klebsiella pneumoniae produtora de carbapenemase, Escherichia coli, Salmonella enteritidis e Shigella flexneriIn vitro antimicrobial activity of probiotics in carbapenemase producing Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, Salmonella enteritidis and Shigella flexneriEnterobacteriáceas resistentes a carbapenêmicosKlebsiella pneumoniaeLactobaciloEspectrometria de massaCarbapenem-resistant enterobacteriaceaeKlebsiella pneumoniaeLactobacillusMass spectrometryOrientador: Carlos Emilio LevyDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: O uso de probióticos tem sido crescente para o tratamento e prevenção de diarreia causada por enteropatógenos, e os gêneros Lactobacillus e Bifidobacterium têm sido os mais utilizados. O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antimicrobiana de alguns probióticos contra enterobactérias patogênicas e seu potencial uso para descolonização de pacientes. Probióticos comercialmente disponíveis foram semeados e incubados para contagem de colônias (UFC) e identificação por espectrometria de massas (MALDI-TOF/MS). Para teste de sensibilidade a drogas, os probióticos foram submetidos ao E-test®. A atividade antimicrobiana dos probióticos contra Klebsiella pneumoniae produtora de carbapenemase (KPC), Escherichia coli, Salmonella enteritidis e Shigella flexneri foi avaliada pelo método de co-cultura, na concentração de 106 UFC/mL, tanto das enterobactérias como de cada microrganismo isolado dos produtos. Amostras foram semeadas nos tempos T0, 24hs, 48hs e 72hs para contagem de UFC remanescentes. Para Lactobacillus reuteri foi adicionado 1% de glicerol. Encontramos 40 produtos probióticos disponíveis no comércio, entre medicamentos e alimentos contendo probióticos, e um total de 23 espécies de diferentes microrganismos. Foram selecionadas e submetidas à identificação 6 medicamentos, 5 produtos alimentícios lácteos e uma cepa padrão ATCC® para controle. Para o teste de atividade antimicrobiana foram testados: Lactobacillus reuteri DSM 17938 Colidis®, Lactobacillus rhamnosus SD5217 AtillusMulti®, Lactobacillus acidophilus LA14 Prolive®, Lactobacillus casei Shirota Yakult®, Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 11454, Lactococcus lactis Activia® Shot, Bacillus clausii Enterogermina® e Saccharomyces boulardii 17 Floratil AT®. O MALDI-TOF/MS permitiu a identificação de todos os gêneros e a maioria das espécies dos probióticos analisados. A contagem de UFC dos produtos analisados se mostrou igual ou muito próxima as contagens que constam nas bulas e rótulos. As CIMs dos probióticos mostraram que todos os Lactobacillus foram resistentes à Vancomicina e com exceção do L. reuteri, resistentes ao Meropenem, sendo os demais resultados variáveis, mas sempre sendo sensíveis a dois ou mais antibióticos. Todos Lactobacillus e Lactococcus apresentaram atividade inibitória contra todas enterobactérias testadas, sendo >99% de redução em 48hs contra KPC, enquanto que B. clausii e S. boulardii não mostraram atividade inibitória. Em conclusão, todos os Lactobacillus spp e Lactococcus spp analisados mostraram potencial uso para inibição da colonização intestinal por enterobactérias patogênicas, incluindo KPC, em pacientes hospitalizados com risco de translocação bacterianaAbstract: Probiotics have been progressively used for treatment and prevention of diarrhea caused by enteropathogens with genera Lactobacillus and Bifidobacterium most commonly used. This study aimed to evaluate antimicrobial activity of some probiotics against pathogenic enterobacteria and its potential use for patient decolonization. Commercially available probiotics were incubated for colonies counting (CFU) and identification by mass spectrometry (MALDI-TOF/MS). Probiotics were submitted to E-test® for drug sensitivity. Co-culture, at 106 CFU/mL, was used to evaluate probiotic antimicrobial activity against carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae (KPC), Escherichia coli, Salmonella enteritidis and Shigella flexneri. Samples were seeded at times T0, 24, 48 and 72 hours for remaining CFU counting. For Lactobacillus reuteri 1% glycerol was added. We found 40 probiotic products commercially available among medicines and food, and a total of 23 species of different microorganisms. Selection and identification covered 6 medicines, 5 fermented dairy products and a standard strain ATCC® for control. For co-culture tests the following probiotics were checked: Lactobacillus reuteri DSM 17938 Colidis®, Lactobacillus rhamnosus SD5217 AtillusMulti®, Lactobacillus acidophilus LA14 Prolive®, Lactobacillus casei Shirota Yakult®, Lactococcus lactis subsp. lactis ATCC 11454, Lactococcus lactis Activia® Shot, Bacillus Clausii Enterogermina® e Saccharomyces boulardii 17 Floratil AT®. MALDI-TOF/MS allowed the identification of all genera and most probiotics species analyzed. All dairy products demonstrated CFU counting close to that declared in the lable. MICs showed that all Lactobacillus were resistant to Vancomycin and with the exception of L. reuteri, resistant to Meropenem. The other results were variable, but always sensitive to two or more antibiotics. All Lactobacillus and Lactococcus showed inhibitory activity against tested enterobacteria, with >99% reduction in 48 hours against KPC, while B. clausii and S. boulardii showed no inhibitory activity. In conclusion, all Lactobacillus spp and Lactococcus spp analyzed showed potential use for inhibition of intestinal colonization by pathogenic enterobacteria, including KPC, for hospitalized patients at risk of bacterial translocationMestradoSaúde da Criança e do AdolescenteMestra em CiênciasCAPES001[s.n.]Levy, Carlos Emilio, 1949-Marson, Fernando Augusto de LimaMondelli, Alessandro LiaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Saúde da Criança e do AdolescenteUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASGasparetto, Isabella Freire, 1985-20202020-11-25T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf1 recurso online ( 53 p.) : il., digital, arquivo PDF.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1640566GASPARETTO, Isabella Freire. Atividade antimicrobiana in vitro de probióticos em Klebsiella pneumoniae produtora de carbapenemase, Escherichia coli, Salmonella enteritidis e Shigella flexneri . 2020. 1 recurso online ( 53 p.) Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1640566. Acesso em: 3 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/1161401Requisitos do sistema: Software para leitura de arquivo em PDFporreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2021-03-04T09:10:43Zoai::1161401Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2021-03-04T09:10:43Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false |
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