Homocisteina : desenvolvimento de um novo metodo de analise utilizando o sistema DIMP/T&R-MIMS

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Haddad, Renato
Data de Publicação: 2001
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1591491
Resumo: Orientadores: Nelci Fenalti Hoehr, Marcos Nogueira Eberlin
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spelling Homocisteina : desenvolvimento de um novo metodo de analise utilizando o sistema DIMP/T&R-MIMSEspectrometria de massaMetabolismoOrientadores: Nelci Fenalti Hoehr, Marcos Nogueira EberlinDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias MedicasResumo: Neste projeto de pesquisa foi desenvolvido um novo método para determinação e quantificação da homocisteína em plasma, intermediária da síntese de cisteína, que é produzida no organismo a partir da metionina. Este novo método emprega a Espectrometria de Massa por Introdução via Membrana (MIMS). Utilizou-se uma sonda de membrana DIMP (Sonda de membrana com inserção direta) operando no método T&R¿MIMS (aprisionamento e liberação - Espectrometria de Massa por Introdução via Membrana) que amostra os compostos por um determinado período de tempo por adsorção em uma membrana de silicone, seguida de rápida dessorção através do aquecimento da membrana. A análise de homocisteína foi realizada com derivatização por esterificação, adicionando-se cloroformiato de etila, em solvente contendo piridina, etanol e água. Os experimentos foram realizados em um espectrometro de massas monoquadrupolar, operando em modo SIM (monitoramento de íons selecionados). Foi monitorado o íon de m/z 234 que corresponde ao fragmento [M-H]+ da homocisteína. Testes de linearidade mostraram um coeficiente de correlação de 0,998. O sistema se mostrou bastante reprodutível e um experimento no qual foram realizadas cinco repetições apresentou desvio de 2,5%. A recuperação foi de 97,4%, e limitre de detecção de 2?M o que demonstra que o método é viável para a análise de homocisteínaAbstract: This research work describes a new method for the identification and quantitative determination of homocysteine in plasm, an intermediate of the cystein synthesis, which is generated from methionine in the organism. This new method uses the Mass Spectrometry by Introduction via Membrane (MIMS). A membrane probe DIMP (Direct Introduction Membrane Probe) and the T&R-MIMS method (Trap and Release-Membrane Introduction Mass Spectrometry) were employed, which operates by sampling the target compounds through a given period of time by adsorption in a silicone membrane, followed by a fast desorption produced on heating the membrane. Homocysteine analysis was performed by its derivatization through an esterification reaction with ethyl chloroformiate in a mixture of pyridine, ethanol and water as the solvent. The experiments were performed in a Monoquadrupolar Mass Spectrometer, under a SIM (Selected Ions Monitoring) mode of operation. The m/z 234 ion, which corresponds to the homocysteine [M-H]+ fragment, was monitored. Linearity tests led to a correlation coefficient of 0.998. Five runs of a single experiment showed a deviation of 2.5%, indicating the employed method leads to very reproducible results. It was observed a 97.4% of recovering for the homocysteine, which demonstrates that the proposed method can be applied for its quantitative analysisMestradoPatologia ClínicaMestre em Ciências Médicas[s.n.]Höehr, Nelci Fenalti, 1947-2018Eberlin, Marcos Nogueira, 1959-Gontijo, Jose Antonio RochaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em Ciências MédicasUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASHaddad, Renato20012001-07-11T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf99p. : il.(Broch.)https://hdl.handle.net/20.500.12733/1591491HADDAD, Renato. Homocisteina: desenvolvimento de um novo metodo de analise utilizando o sistema DIMP/T&R-MIMS. 2001. 99p. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1591491. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/225640porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T03:30:51Zoai::225640Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T03:30:51Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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