Evidencia farmacologica e imunohistoquimica de um sistema funcional de oxido nitrico sintase em eosinofilos peritoneais de rato

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Zanardo, Renata Cristina Onishi
Data de Publicação: 1997
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1585551
Resumo: Orientador: Edson Antunes
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spelling Evidencia farmacologica e imunohistoquimica de um sistema funcional de oxido nitrico sintase em eosinofilos peritoneais de ratoQuimiotaxiaEosinófilosÓxido nítricoOrientador: Edson AntunesDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: Nossos resultados demonstram que, utilizando anticorpo monoclonal de camundongo através de imunohistoquímica, eosinófilos peritoneais de rato expressam a NOS II (30.2 +/- 11.6%) e III (24.7 +/- 7.41%). A migração de eosinófilos in vitro foi avaliada usando-se uma microcâmara de quimiotaxia de 48 poços, e os agentes quimiotáxicos empregados foram N-formil-metionil leucil-fenilalanina (fMLP, 5 x '10 POT. -8 M') e leucotrieno 'B IND. 4' ('LTB IND. 4', '10 POT. -8 M'). O L-NAME (mas não o D-NAME) inibiu significativamente a migração de eosinófilos induzida pelo fMLP (54% de redução para a concentração de 1.0 mM; P<0.05) e 'LTB IND. 4' (61 % de redução para a concentração de 1.0 mM; P<0.05). Os inibidores da NOS II, AMT e TRIM, também atenuaram marcadamente (P<0.05) a migração induzida pelo fMLP (52% e 38% de redução para a concentração de 1.0 mM, respectivamente) e 'LTB IND. 4' (52% e 51 % de redução para a concentração de 1.0 mM, respectivamente). O ODQ (inibidor da guanilato ciclase solúvel), nas concentrações de 0.01 e 0.1 mM, também inibiu significativamente a migração de eosinófilos induzida pelo fMLP. A inibição da migração de eosinófilos pelo L-NAME foi revertida pelo nitroprussiato de sódio (0.1 mM) ou pelo dibutiril GMP cíclico (1 mM). Concluímos que os eosinófilos peritoneais de rato expressam NO sintase(s), e que este mediador desenvolve um papel essencial na locomoção destas células, agindo através de um mecanismo de transdução de GMP cíclicoAbstract: Our results demonstrate that rat peritoneal eosinophil strongly expresses both type II (30.2 +/-11.6%) and type III (24.7 +/- 7.41%), as detected by immunohistochemistry using affinity purified mouse monoclonal antibodies. Eosinophil migration in vitro was evaluated using a 48-well microchemotaxis chamber and the chemotactic agents employed were N-formyl-methionyl-leucylphenylalanine (fMLP, 5 x '10 POT. ¿8' M) and leukotriene 'B IND. 4' ('LTB IND. 4', '10 POT. ¿8' M). L-NAME (but not D-NAME) significantly il")hibited the eosinophil migration induced by both fMLP (54% reduction for 1.0 mM; P<0.05) and 'LTB IND. 4' (61 % reduction for 1.0 mM; P<0.05). The type II NOS inhibitors AMT and TRIM also markedly (P<0.05) attenuated fMLP- (52% and 38% reduction for 1.0 mM, respectively) and 'LTB IND. 4' (52% and 51 % reduction for 1.0 mM, respectively). The inhibition of eosinophil migration by L-NAME was mimicked by the soluble guanylate cyclase inhibitor, ODQ (0.01 and 0.1 mM) and reversed by either sodium nitroprusside (0.1 mM) or dibutyryl cyclic GMP (1 mM). In conclusion, the eosinophil does express NO synthase(s) and this mediator plays an essential role for eosinophillocomotion, , by acting through a cyclic-GMP transduction mechanismMestradoMestre em Farmacologia[s.n.]Antunes, Edson, 1960-Sannomiya, PaulinaSaad, Sara Teresinha OlallaUniversidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em FarmacologiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASZanardo, Renata Cristina Onishi19971997-11-14T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf47f. : il.(Broch.)https://hdl.handle.net/20.500.12733/1585551ZANARDO, Renata Cristina Onishi. Evidencia farmacologica e imunohistoquimica de um sistema funcional de oxido nitrico sintase em eosinofilos peritoneais de rato. 1997. 47f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1585551. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/123375porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T02:42:16Zoai::123375Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T02:42:16Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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