Hemoglobina gigante de Glossoscolex paulistus (Dligochaeta, Glossoscolecidae) : efeito de cations divalentes e agentes desnaturantes

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Marques, Mariza Boscacci
Data de Publicação: 1992
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1576205
Resumo: Orientador : Nilce Correa Meirelles
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spelling Hemoglobina gigante de Glossoscolex paulistus (Dligochaeta, Glossoscolecidae) : efeito de cations divalentes e agentes desnaturantesHemoglobinasBioquímicaOrientador : Nilce Correa MeirellesDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de BiologiaResumo: A hemoglobina gigante, extracelular de Glossoscolex paul istus apresenta uma massa molecular de 3 x 10 Da que se precipitação por (NH4 )250 4 , optando-se pelo primeiro para a execução dos experimentos. A apoproteína foi obtida e reconstituída na presença de hemina, observando-se estequiometria nesta ligação. Também estudamos o efeito dos íons di valentes Ca ++, Mg++ e Mri ++ sobre a afinidade da proteína pelo oxigênio tendo-se observado aumento de P50- pressão parcial de O2 para saturar 50 % dos sítios de ligação, dependente da concentração dos cátions e mudança na cooperatividade. Em presença de agentes desnaturantes (temperatura, álcalis e uréia) foram obtidos parâmetros cinéticos como K e t . d ½ Os experimentos de transição ácido-alcalina demonstraram a multiplicidade de populações da proteína na forma férricaAbstract: The giant extracell ular hemoglobin of Glossoscolex paulistus has a molecular weight of 3 x 106 Da. Visualized by electron microscopy, the Glossoscolex paulistus hemoglobin presents two hexagonal superimposed disks In the present study, we compared two different methods of purification for this protein: ultracentrifugation and ammonium sulfate precipitation. Using the purified protein obtained by ultracentrifugation, functional and physico-chemical properties were studied. The apoprotein was obtained and reconsti tuted in the presence of hemin and a stoichiometric relation was observed for this reaction. We also studied the effects of divalent ions such as Ca++, Mg++ e Mn++ on the protein-oxygen affinity. An increase in P50 and also changes in cooperativity were observed in dependance of the cations concentration. Kinetic parameters as Kd and t 1/2 were obtained in the presence 01 denaturing agents (temperature, a1cali and urea). The experiments of the acid-a1cali transition showed the multiplicity of the protein-population in its ferric formoMestradoBioquímicaMestre em Ciências Biológicas[s.n.]Meirelles, Nilce Correa, 1943-Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Instituto de BiologiaPrograma de Pós-Graduação em Ciências BiológicasUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASMarques, Mariza Boscacci19921992-02-07T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf95f. : il.https://hdl.handle.net/20.500.12733/1576205MARQUES, Mariza Boscacci. Hemoglobina gigante de Glossoscolex paulistus (Dligochaeta, Glossoscolecidae): efeito de cations divalentes e agentes desnaturantes. 1992. 95f. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1576205. Acesso em: 2 set. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/41995porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2014-04-17T22:42:48Zoai::41995Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2014-04-17T22:42:48Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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