Expressão do inibidor proteico da sintase neuronal do oxido nitrico (PIN) e moleculas relacionadas, da ontogenese ao envelhecimento do cerebelo humano

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Zucchi, Fabiola Cristina Ribeiro
Data de Publicação: 2002
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)
Texto Completo: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1591176
Resumo: Orientador: Antonio Roberto Martins
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spelling Expressão do inibidor proteico da sintase neuronal do oxido nitrico (PIN) e moleculas relacionadas, da ontogenese ao envelhecimento do cerebelo humanoÓxido nítricoSistema nervoso centralCerebeloOrientador: Antonio Roberto MartinsDissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências MédicasResumo: o PIN é a proteína inibidora da sintase neuronal do óxido nítrico (nNOS). O mecanismo de regulação ocorre pela interação do PIN com a nNOS, inibindo sua dimerização, dissociando os dímeros já formados e assim inibindo a formação da enzima ativa. O PIN é uma proteína de 10 kDa e 89 resíduos de aminoácidos altamente conservada na natureza. O PIN humano apresenta 100% de homologia com a cadeia leve da dineína (DLC) humana. A DLC está envolvida na modulação da atividade transcional do NFkB. A dineína está envolvida em uma variedade de processos de motilidade intracelular, incluindo divisão celular, tráfego de vesículas membranosas e outras partículas intracelulares. A interação de PIN com múltiplas proteínas e sua alta conservação evolutiva sugerem que o PIN possa ser um importante regulador de vários processos fisiológicos. O óxido nítrico (NO) atua como um mensageiro não convencional nos sistemas vascular, imune e nervoso. O modelo corticogênese cerebelar humana é relativamente bem conhecido e permite correlacionar eventos morfogenéticos e bioquímicos/moleculares. Observamos que a expressão imunohistoquímica de PIN/DLC e nNOS no cerebelo humano é desenvolvimento-dependente. Durante a ontogênese estas moléculas ocorrem em regiões proliferativas, como a EGL e a zona ventricular, no núcleo e citoplasma das células. Células com aspecto migratório foram imunomarcadas para PIN, DLC e nNOS no núcleo e no citoplasma. Este resultado é inédito, e não encontramos relatos semelhantes na literatura. Os interneurônios e as células de Purkinje expressaram PIN e DLC, principalmente no núcleo celular, desde o surgimento até 98 anos. E a imunodetecção de nNOS nos interneurônios e células de Purkinje foi observada principalmente no citoplasma e ramificações dendríticas em todas as idades observadas. A camada granular interna expressou PIN, DLC e nNOS em todo o período estudado. Detectamos imunorreatividade para PIN e DLC nas células ganglionares do núcleo denteado, principalmente no núcleo celular, e para a nNOS principalmente no citoplasma, desde a ontogênese até o envelhecimento do cerebelo humano. Nossos resultados imunohistoquímicos foram validados pela detecção de PIN, DLC, DIC e nNOS em amostras cerebelares obtidas de pacientes de 6, 16, 23, 47, 68 e 82 anos de idade usando Western blotingAbstract: PIN is the protein inhibitor of neuronal nitric oxide synthase (nNOS). PIN interacts physically with nNOS, inhibits it by destabilizing its dimer form, thus being able to regulate nNOS activity. PIN is a 10 kDa protein composed of 89 amino acid residues, which are highly conserved in nature. Human PIN has 100% amino acid sequence identify to the human dynein light chain (DLC). DLC appears to play a role in the modulation of the transcriptional activity of NF-kB. Dynein is involved in several processes of intracellular motility, including mitosis, traffic of membranous vesicles, and others intracellular particles.The interaction of PIN/DLC with multiple proteins and its high evolutive conservation suggest that PIN can be an important regulator of various physiological processes. Nitric oxide (NO) acts as a nonconventional messenger in the vascular, immune and nervous systems. The model of human cerebellar corticogenesis is relatively well known and permits to correlate morphogenetic events with their molecular counterparts. We observed that the immunohistochemical expression of PIN/DLC and nNOS in the human cerebellum is development-dependent. During ontogenesis, this molecules were detected in the nuc1eiand cytoplasm of cells in proliferative regions, such as the EGL and the ventricular zone. We show here for the first time the detection of PIN, DLC and nNOS in the nuclei and cytoplasm of cells with a migratory profile. Intemeurons and Purkinje cells expressed PIN and DLC, mainly in the cellular nuclei, from the first time they were identified until age 98 years. Immunodetection of nNOS in the intemeurons and Purkinje cells was observed mainlyin the cytoplasm and dendritic arborization in all ages observed. Internal granular layer expressed PIN, DLC and nNOS through out the time range studied. PIN and DLC immunoreactivity were detected in ganglion cells of the dentate nucleus, mainly in the cellular nuclei, whereas anti-nNOS stained mainly the cytoplasm of these cells, throughout the time range studied. Our immunohistochemical data were further validated by the detection of PIN, DLC, DIC and nNOS in cerebella obtained from patients aged 6, 16, 23, 47, 68 and 82 years-old using Western blotingMestradoMestre em Farmacologia[s.n.]Martins, Antonio RobertoDonato, Jose LuizLeite, João PereiraUniversidade Estadual de Campinas. Faculdade de Ciências MédicasPrograma de Pós-Graduação em FarmacologiaUNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINASZucchi, Fabiola Cristina Ribeiro20022002-01-25T00:00:00Zinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdf137p. : il.(Broch.)https://hdl.handle.net/20.500.12733/1591176ZUCCHI, Fabiola Cristina Ribeiro. Expressão do inibidor proteico da sintase neuronal do oxido nitrico (PIN) e moleculas relacionadas, da ontogenese ao envelhecimento do cerebelo humano. 2002. 137p. Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas, Campinas, SP. Disponível em: https://hdl.handle.net/20.500.12733/1591176. Acesso em: 14 mai. 2024.https://repositorio.unicamp.br/acervo/detalhe/222226porreponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instname:Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)instacron:UNICAMPinfo:eu-repo/semantics/openAccess2017-02-18T03:28:29Zoai::222226Biblioteca Digital de Teses e DissertaçõesPUBhttp://repositorio.unicamp.br/oai/tese/oai.aspsbubd@unicamp.bropendoar:2017-02-18T03:28:29Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP) - Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP)false
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