Análise da sensibilidade para diagnóstico molecular de candidíase

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: NUNES, Maria Alice Ferreira
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Artigo
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Digital Unicesumar
Texto Completo: http://rdu.unicesumar.edu.br/handle/123456789/348
Resumo: Artigo apresentado ao curso de graduação em Biomedicina da UniCesumar – Centro Universitário de Maringá como requisito parcial para a obtenção do título de bacharel(a) em Biomedicina, sob a orientação da Prof. Dra Marcela Funaki dos Reis
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spelling Análise da sensibilidade para diagnóstico molecular de candidíaseCandida albicansEspecificidadeReação em Cadeia da PolimeraseArtigo apresentado ao curso de graduação em Biomedicina da UniCesumar – Centro Universitário de Maringá como requisito parcial para a obtenção do título de bacharel(a) em Biomedicina, sob a orientação da Prof. Dra Marcela Funaki dos ReisCandidiasis is an opportunistic mycosis caused by yeasts of the genus Candida, the species Candida albicans being prevalent in the oral mucosa. However, other yeasts colonize the buccal mucosa and in this case the conventional diagnosis may not be conclusive for the true species causing candidiasis. Thus, the sensitivity threshold for molecular diagnosis of oral candidiasis based on molecular marker analysis using polymerase chain reaction (PCR) was established in this study. For both clinical samples were obtained by scraping the mucosa with swab and inoculated in Sabouraud culture medium. After growth, the genomic DNA of the colonies of C. albicanswas extracted using the organic extraction method with phenol: chloroform. The molecular markers that identify C. albicans were amplified in two rounds in Nested - PCR using the ITS and CALB primers and the results visualized in agarose gel electrophoresis. It has been established that the sensitivity threshold for the primers comprises nanogram concentrations up to 10 pg, the optimum concentrations for visualization on the agarose gel being concentrations between 1ng and 10 pg. In view of the sensitivity presented by the CALB primers, it is suggested later studies that test the sensitivity of these primers in PCR of colony from clinical samples and without the step of DNA extraction.Candidíase é uma micose oportunista causada por leveduras do gênero Candida, sendo a espécie Candida albicans prevalente na mucosa bucal. No entanto, outras leveduras colonizam a mucosa bucal e, neste caso, o diagnóstico convencional pode não ser conclusivo para a verdadeira espécie causadora da candidíase. Assim, neste estudo foi estabelecido o limiar de sensibilidade para diagnóstico molecular de candidíase bucal, baseado em análise por marcador molecular utilizando a reação em cadeia da polimerase – PCR. Para tanto, amostras clínicas foram obtidas por raspagem da mucosa com swab e inoculadas em meio de cultura Sabouraud. Após crescimento, o DNA genômico das colônias de C. albicans foi extraído através do método de extração orgânica com fenol clorofórmio. Os marcadores moleculares que identificam C. albicans foram amplificados em dois rounds em Nested - PCR utilizando os primers ITS e CALB e os resultados visualizados em eletroforese em gel de agarose. Foi estabelecido que o limiar de sensibilidade para os primers compreende as concentrações em nanogramas de até 10 pg, sendo as concentrações ideais para a visualização no gel de agarose as concentrações entre 1ng a 10 pg. Diante da sensibilidade apresentada pelos primes CALB, são sugeridos estudos posteriores que testem a sensibilidade destes primers em PCR de colônias a partir de amostras clínicas e sem a etapa de extração de DNA.UNIVERSIDADE CESUMARBrasilUNICESUMARREIS, Marcela Funaki dosNUNES, Maria Alice Ferreira2018-03-06T18:43:41Z2018-03-06T18:43:41Z2017-12-01info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articleapplication/pdfhttp://rdu.unicesumar.edu.br/handle/123456789/348porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Digital Unicesumarinstname:Centro Universitário de Maringá (UNICESUMAR)instacron:UniCesumar2021-07-05T13:15:06ZRepositório InstitucionalPRI
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