Identificação molecular de Candida spp. em amostras de pacientes usuários de próteses dentárias por meio de PCR - Multiplex

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: KIMURA, Alicia Ayumi
Data de Publicação: 2017
Tipo de documento: Artigo
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Digital Unicesumar
Texto Completo: http://rdu.unicesumar.edu.br/handle/123456789/341
Resumo: Artigo apresentado ao curso de graduação em Biomedicina da UniCesumar – Centro Universitário de Maringá como requisito parcial para a obtenção do título de bacharela em Biomedicina, sob a orientação da Prof. Dr. Marcela Funaki dos Reis.
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spelling Identificação molecular de Candida spp. em amostras de pacientes usuários de próteses dentárias por meio de PCR - MultiplexCandidíaseMucosa BucalReação em Cadeia da PolimeraseArtigo apresentado ao curso de graduação em Biomedicina da UniCesumar – Centro Universitário de Maringá como requisito parcial para a obtenção do título de bacharela em Biomedicina, sob a orientação da Prof. Dr. Marcela Funaki dos Reis.Oral candidiasis is an opportunistic infection common to patients using dental prostheses. For the correct treatment is necessary the precise diagnosis of the yeast causing the infection since different species of Candida may be related. Thus, the objective of this study was to simultaneously identify different Candida species in samples of dental prosthesis patients by PCR - multiplex. The samples collected from dental prosthesis patients were inoculated in Saubourand medium and later the genomic DNA from the colonies was extracted by the organic extraction method with phenol-chloroform. The yeast DNA samples were amplified via two rounds of PCR. In the first one was used the primers ITS1 and ITS4 and in the second characterized as Multiplex with touchdown for amplification of molecular markers speciesspecific. The method used in the study was able to identify in a distinctive way the species C. albicans and C. troplicalis that colonized the oral cavity of the analyzed patient. Although, the multiplex PCR tested was able to identify the sensitivity was considered lower than expected. Thus, it is suggested that further studies can be performed in order to increase the efficiency of the test by promoting the standardization of the PCR reaction with increasing substances that raise the sensitivity and increase in the number of cycles in the thermal cycler.A candidíase bucal é uma infecção oportunista comum a pacientes usuários de prótese dental. E para o tratamento correto é necessário o diagnóstico preciso da levedura causadora da infecção uma vez que diferentes espécies de Candida podem estar relacionadas. Assim, o objetivo deste estudo foi identificar simultaneamente diferentes espécies de Candida em amostras de pacientes usuários de prótese dental por meio de PCR – multiplex. Para tanto as amostras coletadas de pacientes usuários de prótese dental foram inoculadas em meio Saubourand e, posteriormente o DNA genômico das colônias foi extraído pelo método de extração orgânica com fenol-clorofórmio. As amostras de DNA das leveduras foram amplificadas via dois rounds de PCR. No primeiro foi utilizado os primers ITS1 e ITS4 e no segundo caracterizado como Multiplex com touchdown para amplificação dos marcadores moleculares espécie-específicos. O método utilizado no estudo foi capaz de identificar de maneira distintiva as espécies C. albicans e C. troplicalis que colonizavam ao mesmo tempo a cavidade bucal do paciente analisado. Embora, a PCR multiplex testada tenha sido capaz de identificação, a sensibilidade foi considerada inferior ao esperado. Assim, é sugerido que estudos posteriores possam ser realizados a fim de aumentar a eficiência do teste, promovendo a padronização da reação de PCR com incremento de substâncias que elevam a sensibilidade e ampliação no número de ciclos no termociclador.UNIVERSIDADE CESUMARBrasilUNICESUMARREIS, Marcela Funaki dosKIMURA, Alicia Ayumi2018-03-06T18:21:52Z2018-03-06T18:21:52Z2017-12-01info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/articleapplication/pdfhttp://rdu.unicesumar.edu.br/handle/123456789/341porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Digital Unicesumarinstname:Centro Universitário de Maringá (UNICESUMAR)instacron:UniCesumar2021-07-05T12:55:05ZRepositório InstitucionalPRI
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