Estabelecimento de um protocolo para detecção de Nosema apis e Nosema ceranae a partir de amostras de mel

• Autor(a) principal: Tresbach, Rafael Hencke
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIPAMPA
• Texto Completo: http://dspace.unipampa.edu.br:8080/jspui/handle/riu/4367
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; Nosema apis; Nosema ceranae; Mel; Apis mellifera; Detecção por PCR; Honey; PCR Detection

As abelhas são a principal espécie responsável pela polinização e propagação de espécies vegetais. Além da polinização, produtos úteis aos seres humanos como mel, apitoxina, cera, geleia real e própolis são fornecidos pelas abelhas. Entretanto, patologias como a nosemose, que é uma das responsáveis pelo Distúrbio de Colapso de Colônias, podem levar a perdas de colmeias e declínio de produção e, consequentemente, perdas econômicas. O presente trabalho objetiva padronizar um método para a detecção dos microsporídios Nosema apis e Nosema ceranae em amostras de mel, visando fornecer uma alternativa rápida e confiável aos atuais métodos e utilizando o produto mais abundante da colmeia. Para este trabalho, utilizaram-se três protocolos de extração de DNA de forma a compará-los, sendo um protocolo com o uso de micro-ondas e outros dois com kits comerciais, sendo um para extração de DNA genômico de células animais e bacterianas e outro para extração de DNA genômico vegetal. Avaliamos 15 amostras de mel do estado do Rio Grande do Sul coletadas entre 2007 e 2008 e que foram consideradas positivas para presença de esporos de Nosema spp. por microscopia óptica, porém sem determinação de espécie.Dos três métodos que foram analisados neste trabalho, apenas o método utilizando o kit de extração de DNA genômico de plantas permitiu a amplificação de produtos dos tamanhos esperados. Das 15 amostras utilizadas, 14 mostraram amplificação para N. apis e 11 revelaram presença de N. ceranae. Com estes resultados, pudemos padronizar um método para identificação precoce das espécies de Nosema presentes em amostras de mel. O protocolo se mostrou rápido e eficiente e capaz de extrair DNA genômico de qualidade a partir de amostras de mel para identificação de N. apis e N. ceranae utilizando PCR.