Avaliação dos efeitos neurocomportamentais induzidos pela urease de Canavalia ensiformis (JBU) em baratas da espécie nauphoeta cinerea (olivier, 1789)

• Autor(a) principal: Zanatta, Ana Paula
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIPAMPA
• Texto Completo: http://dspace.unipampa.edu.br:8080/jspui/handle/riu/4386
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; Inseticidas naturais; Ureases; Comportamento de grooming; Sistema octopaminérgico; Natural insecticides; Grooming behavior; Octopaminergic system

As ureases são metaloenzimas que hidrolizam a uréia em amônia. Esses compostos são sintetizados por diversos organismos e têm sido caracterizados como inseticidas naturais. A atividade entomotóxica da urease de Canavalia ensiformis (Jack Bean Urease, JBU) tem sido demonstrada em diferentes modelos de insetos-praga, apesar do seu mecanismo de ação ainda não ter sido completamente elucidado. Nesse aspecto, a complexidade na demonstração do mecanismo de ação de inseticidas naturais aumenta quando esses compostos interagem com o sistema nervoso dos insetos, alterando o comportamento desses animais. O objetivo desse trabalho foi identificar a atividade induzida pela JBU sobre o sistema nervoso central de baratas Nauphoeta cinerea e a sua relação na modulação do comportamento de grooming desses animais. Nesse trabalho foram usadas baratas adultas de ambos os sexos da espécie N. cinerea mantidas em insetário (23-26 C), água e ração ad libitum. A medida da atividade de grooming foi feita por observação em um círculo de campo aberto onde o animal nunca havia entrado anteriormente. A contagem do tempo de grooming (de perna e de antena) foi realizada em uma sala isolada, em silêncio, com o uso de um cronômetro digital durante 30 min. Os tratamentos foram feitos por meio de injeções na terceira porção abdominal, com um volume fixo de 20 L usando-se uma seringa de Hamilton. Os resultados foram obtidos contabilizando o tempo total de grooming em segundos, em 30 min. Os dados foram plotados como tempo de grooming em segundos. Animais controle, sem a injeção de algum composto também foram contabilizados. Foi usado o teste “t” de Student como análise estatística, onde p<0.05 indicou significância. A análise da taxa de grooming controle foi de 60±5s/30 min para as pernas e 35±8s/30min para antenas (n=30, respectivamente). Quando a JBU (1,5, 3 e 6 µg/g de animal) foi administrada houve uma alteração dose-dependente na taxa de groomings. Assim, para a dose de 1,5 µg/g não houve alteração significativa da taxa de grooming de perna e antena. (n=30, p>0.05 respectivamente). No entanto, quando a dose de 3 µg/g foi ensaiada houve um aumento de 160±20s no tempo de grooming de perna (n=30, p<0.05), não havendo modulação do grooming de antenas. Na maior concentração testada houve um aumento de 200±10 s no grooming de pernas (n=30, p<0.05), não ocorrendo alteração no tempo de grooming de antenas. Quando a octopamina (15µg/g) foi ensaiada o valor de grooming de perna foi de 358±40 s, não havendo alteração no grooming de antena. Nesses ensaios, a pré-administração de fentolamina (0.1μg/g de animal), e a posterior injeção de octopamina (15 µg/g), resultou em diminuição do tempo de grooming para 79±13s/30min (p<0.05 comparado com o controle octopamina, n=30). O ensaio da fentolamina + JBU, também reduziu significativamente a taxa de grooming de perna para 56±7s/30 min (p<0.05 comparado com o controle octopamina ou JBU, n=30). Os ensaios com com hidroxilamina (20 μg/g de animal), um doador de óxido nítrico ou acetilcolina (54 µg/g animal.), não resultaram em alteração na taxa de groomings. Os resultados demonstram que a urease de C. ensiformis induz alterações sobre o sistema nervoso central de N. cinerea, caracterizadas pela modulação do comportamneto de grooming. As alterações significativas no grooming de perna tanto pela JBU quanto pela octopamina, bem como a sua inibição pela fentolamina, indicam que o sistema octopaminérgico é um alvo molecular para o desenvolvimento dos efeitos entomotóxicos da urease.