Estudo do efeito de Deferoxamina, Curcumina e inibidor de ABL PD180970 sobre o ciclo celular e expressão gênica de linhagens leucêmicas

• Autor(a) principal: Vieira , Douglas Souza
• Data de Publicação: 2014
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNIPAMPA
• Texto Completo: http://dspace.unipampa.edu.br:8080/jspui/handle/riu/4375
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS; U937; K562; Curcumina; DFO; COX2; CELF2

O câncer é uma doença que afeta uma grande parte da população mundial e possui múltiplas causas, sendo diretamente relacionado ao desequilíbrio dos genes envolvidos na regulação do ciclo de vida e diferenciação das células. Neste trabalho avaliamos o efeito de Deferoxamina, Curcumina e inibidor de ABL PD180970 sobre o ciclo celular, viabilidade e expressão dos genes COX2 e CELF2 nas linhagens de células K562 e U937. Nossa hipótese inicial foi que a desregulação do gene CELF2 nas células K562 e U937 poderia afetar seu ciclo de vida. Sua expressão antagônica em COX2 quando células de tumor pancreático foram tratadas com Curcumina nos levou a procurar nas bases de dados de microarranjos por outras substâncias que modificariam sua expressão. Para compreender a estrutura genômica da região promotora, realizamos análises de genômica comparativa, em uma região de aproximadamente 1.000 bases upstream do gene CELF2, que se mostrou conservada em 44 vertebrados, desde primatas não humanos ao Danio rerio. Esta sequencia foi clonada no vetor pCR-Bicolor, visando futuros ensaios. Por outro lado, foram realizados ensaios de Citometria de Fluxo e q-RT-PCR que nos permitiram observar que o gene CELF2 não sofre alterações na sua expressão quando tratados com as drogas Deferoxamina, Curcumina e inibidor de ABL PD180970, na linhagem celular K562. No entanto, nos ensaios de viabilidade celular; A curcumina causou uma parada do ciclo celular em G2/M após 24/horas de tratamento, bem como diminuição da viabilidade de células k562 tratadas após 24/horas nas concentrações de 12,5/mM e 25/mM. O inibidor de ABL PD180970 somente apresentou diminuição da viabilidade após 48/horas de tratamento nas concentrações 5/mM e 10/mM. O experimento de q-RT-PCR mostrou uma diminuição estatística de expressão de COX2 na linhagem celular U937 tratada com DFO e Curcumina. Estes dados de diminuição da expressão do gene COX-2 são inéditos para células leucêmicas tratadas com Curcumina, DFO e inibidor de ABL PD180970 e são independentes de mudanças na expressão de CELF2. Ao mesmo tempo, nossos dados sugerem que a indução da expressão de CELF2 pelo tratamento com Curcumina é um fato célula-específico e não se aplicaria a linhagens hematopoiéticas.