Efeito antimicrobiano e imunomodulador de Lactobacillus reuteri em cultura de osteoblastos e Galleria mellonella desafiados por Porphyromonas gingivalis
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | por |
Título da fonte: | Repositório Institucional da UNESP |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/11449/151089 |
Resumo: | Os tratamentos mais usados para periodontite são a raspagem e aplainamento radicular, tratamento não cirúrgico, associado ou não ao uso de antimicrobianos. No entanto, novas terapias têm sido testadas com foco na modulação da resposta do hospedeiro. Alguns micro-organismos têm efeitos benéficos na saúde dos seres humanos, pois produzem efeitos antimicrobianos e anti-inflamatórios, os chamados probióticos. O presente trabalho avaliou o efeito antimicrobiano de Lactobacillus reuteri sobre Porphyromonas gingivalis e a influência deste probiótico em sua forma viva, morta (paraprobiótico) e sobrenadante em modelo de invertebrado Galleria mellonella, infectado por P. gingivalis. Posteriormente, foi determinada a viabilidade celular, níveis de óxido nítrico e de interleucina (IL)-1βb, IL-6, IL-17 e fator de necrose tumoral (TNF)- α, através do ensaio de ELISA em osteoblastos infectados por LPS de P. gingivalis in vitro. Os dados foram submetidos ao teste estatístico ANOVA, Kruskal-Wallis ou Log-rank (Mantel-Cox), com nível de significância de 5%.L. reuteri e seu sobrenadante possuem a mesma atividade antimicrobiana. O probiótico viável e o morto apresentaram efeitos iguais na sobrevivência de G. mellonella e L. reuteri vivo foi o único que aumentou densidade hemocitária das lagartas. O probiótico e o paraprobiótico reduziram igualmente os níveis IL-1β, IL-6, TNF-α e IL-17, sendo que o paraprobiótico, diferentemente do lactobacilo vivo, reduziu significantemente as quantidades de IL-6 e TNF-α, com relação ao grupo controle de LPS. As maiores reduções das citocinas estudadas foram obtidas com o uso do sobrenadante. Conclui-se que os efeitos antimicrobianos e imunomoduladores de L. reuteri não dependem da viabilidade celular, o que possibilita o desenvolvimento de produtos sem a bactéria viva com efeitos semelhantes. Estudos em vertebrados e clínicos são necessários para confirmar esta hipótese. |
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Efeito antimicrobiano e imunomodulador de Lactobacillus reuteri em cultura de osteoblastos e Galleria mellonella desafiados por Porphyromonas gingivalisAntimicrobial and immunomodulatory effects of Lactobacillus reuteri on osteoblasts culture and Galleria mellonella challenged by P. gingivalisPeriodontiteLactobacillus reuteriPorphyromonas gingivalisGalleria mellonellaOsteoblastosPeriodontitisOsteoblastsOs tratamentos mais usados para periodontite são a raspagem e aplainamento radicular, tratamento não cirúrgico, associado ou não ao uso de antimicrobianos. No entanto, novas terapias têm sido testadas com foco na modulação da resposta do hospedeiro. Alguns micro-organismos têm efeitos benéficos na saúde dos seres humanos, pois produzem efeitos antimicrobianos e anti-inflamatórios, os chamados probióticos. O presente trabalho avaliou o efeito antimicrobiano de Lactobacillus reuteri sobre Porphyromonas gingivalis e a influência deste probiótico em sua forma viva, morta (paraprobiótico) e sobrenadante em modelo de invertebrado Galleria mellonella, infectado por P. gingivalis. Posteriormente, foi determinada a viabilidade celular, níveis de óxido nítrico e de interleucina (IL)-1βb, IL-6, IL-17 e fator de necrose tumoral (TNF)- α, através do ensaio de ELISA em osteoblastos infectados por LPS de P. gingivalis in vitro. Os dados foram submetidos ao teste estatístico ANOVA, Kruskal-Wallis ou Log-rank (Mantel-Cox), com nível de significância de 5%.L. reuteri e seu sobrenadante possuem a mesma atividade antimicrobiana. O probiótico viável e o morto apresentaram efeitos iguais na sobrevivência de G. mellonella e L. reuteri vivo foi o único que aumentou densidade hemocitária das lagartas. O probiótico e o paraprobiótico reduziram igualmente os níveis IL-1β, IL-6, TNF-α e IL-17, sendo que o paraprobiótico, diferentemente do lactobacilo vivo, reduziu significantemente as quantidades de IL-6 e TNF-α, com relação ao grupo controle de LPS. As maiores reduções das citocinas estudadas foram obtidas com o uso do sobrenadante. Conclui-se que os efeitos antimicrobianos e imunomoduladores de L. reuteri não dependem da viabilidade celular, o que possibilita o desenvolvimento de produtos sem a bactéria viva com efeitos semelhantes. Estudos em vertebrados e clínicos são necessários para confirmar esta hipótese.The most used treatments for periodontitis are scaling and non-surgical root planing, associated or not to the use of antimicrobials. However, new therapies have been tested with a focus on host response modulation. Some microorganisms have beneficial effects on human health because they produce antimicrobial and antiinflammatory effects, called probiotics. The present study evaluated the antimicrobial effect of Lactobacillus reuteri on Porphyromonas gingivalis and the influence of this probiotic in its live, inactivated (paraprobiotic) form and supernatant on Galleria mellonella invertebrate model, after infection by P. gingivalis. Later, the cell viability, nitric oxide levels and interleukin (IL)-1b, IL-6, IL-17 and tumor necrosis factor (TNF)- α, by the Elisa assay, were evaluated in osteoblasts infected with P. gingivalis LPS in vitro. Data were submitted to ANOVA, Kruskal-Wallis or Log-rank (Mantel-Cox) statistical test, with a significance level of 5%. L. reuteri and its supernatant have the same antimicrobial activity. The viable and inactivated probiotic had equal effects in G. mellonella survival and L. reuteri alive was the only one that increased the hemocyte density in the invertebrate model. Probiotics and paraprobiotics also reduced levels of IL-1β, IL-6, TNF-α and IL-17 cytokines, whereas paraprobiotic, unlike living lactobacillus, significantly reduced the amounts of IL-6 and TNF-α, compare to the LPS control group. The highest reductions of the studied cytokines were obtained with the use of the supernatant. It is concluded that the antimicrobial and immunomodulatory effects of L. reuteri do not depend on cell viability, which allows the development of products without live bacterium with similar effects. Vertebrate and clinical studies are needed to confirm this hypothesis.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)FAPESP: 2016/06946-1Universidade Estadual Paulista (Unesp)Anbinder, Ana Lia [UNESP]Universidade Estadual Paulista (Unesp)Geraldo, Barbara Maria Corrêa [UNESP]2017-07-14T14:16:17Z2017-07-14T14:16:17Z2017-05-05info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11449/15108900088904033004145081P0porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESP2023-10-01T06:04:18Zoai:repositorio.unesp.br:11449/151089Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestopendoar:29462024-08-05T13:39:53.637384Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)false |
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