Apoptose na infecção experimental de cães domésticos com Ehrlichia canis

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Sanchez, Irma Ximena Barbosa
Data de Publicação: 2012
Outros Autores: Socarras, Teresa de Jesus Oviedo, Silva, Miguel Ladino [UNESP], Pereira, Nubia Braga, Machado, Rosangela Zacarias [UNESP], Vasconcelos, Anilton Cesar
Tipo de documento: Artigo
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
Texto Completo: http://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782012000800021
http://hdl.handle.net/11449/1599
Resumo: A Erliquiose canina é uma zoonose causada pela Ehrlichia canis, bactéria Gram negativa de distribuição mundial. Alguns cães com erliquiose se tornam portadores assintomáticos enquanto outros desenvolvem uma doença aguda com morte rápida. A apoptose pode ser importante na eliminação de patógenos intracelulares, podendo, nas infecções por Ehrlichia sp. e Anaplasma sp., ocorrer modulação da apoptose celular para prolongar a sobrevivência desses organismos. Para avaliação do papel da apoptose na erliquiose canina, sete cães foram distribuídos em dois grupos. No Grupo inoculado, realizou-se a infecção por via intravenosa com sangue infectado com E. canis (isolado Jaboticabal), sendo realizada a inoculação com PBS estéril nos animais pertencentes ao Grupo Controle. Semanalmente e até 35 dias pós-inoculação, amostras de sangue foram coletadas e submetidas a n-PCR e reação de imunofluorescência (RIFI) para confirmação da infecção. No 36° dia pós-inoculação, os animais foram eutanasiados, sendo as amostras de baço, linfonodo, rim e fígado coletadas e processadas para as técnicas de TUNEL e imunohistoquímica (Bcl-2, Bax). Verificou-se pela n-PCR que os animais inoculados se tornaram positivos para E. canis a partir da segunda semana. Pela RIFI, verificou-se animais com sorologia positiva a partir da terceira semana pós-inoculação. No grupo controle, todos os testes realizados foram negativos para E. canis. Apesar da reação de TUNEL mostrar maior incidência de apoptose no Grupo Inoculado, sendo o baço e os linfonodos os órgãos que apresentaram maior marcação, os resultados da imunohistoquímica para Bcl-2 e Bax indicam que a via intrínseca de apoptose não é importante nos órgãos analisados.
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No Grupo inoculado, realizou-se a infecção por via intravenosa com sangue infectado com E. canis (isolado Jaboticabal), sendo realizada a inoculação com PBS estéril nos animais pertencentes ao Grupo Controle. Semanalmente e até 35 dias pós-inoculação, amostras de sangue foram coletadas e submetidas a n-PCR e reação de imunofluorescência (RIFI) para confirmação da infecção. No 36° dia pós-inoculação, os animais foram eutanasiados, sendo as amostras de baço, linfonodo, rim e fígado coletadas e processadas para as técnicas de TUNEL e imunohistoquímica (Bcl-2, Bax). Verificou-se pela n-PCR que os animais inoculados se tornaram positivos para E. canis a partir da segunda semana. Pela RIFI, verificou-se animais com sorologia positiva a partir da terceira semana pós-inoculação. No grupo controle, todos os testes realizados foram negativos para E. canis. Apesar da reação de TUNEL mostrar maior incidência de apoptose no Grupo Inoculado, sendo o baço e os linfonodos os órgãos que apresentaram maior marcação, os resultados da imunohistoquímica para Bcl-2 e Bax indicam que a via intrínseca de apoptose não é importante nos órgãos analisados.Some dogs infected with Ehrlichia canis become asymptomatic while others develop an acute illness followed by quick death. Apoptosis may be an important mechanism for elimination of intracellular pathogens. Also, Ehrlichia sp. and Anaplasma sp. can modulate apoptosis to extend their survival. To evaluate the role of apoptosis in canine ehrlichiosis, 7 dogs were assigned into 2 groups, one with 4 animals inoculated intravenously with blood infected with Ehrlichia canis (Jaboticabal isolate) and a control with 3 dogs, inoculated with sterile PBS. Blood samples were collected weekly and 35 days post-inoculation to confirm the infection by nPCR and immunofluorescence. Thirty-six days after inoculation the animals were euthanized and samples from spleen, lymph nodes, kidney and liver were collected to carry out the TUNEL technique and immunohistochemistry (Bcl-2, Bax). Inoculated animals became positive for E. canis by nPCR already in the second week and by immunofluorescence in the third week after inoculation. The control group showed negative for E. canis in all tests. The TUNEL reaction showed a higher incidence of apoptosis in the inoculated group, with stronger labeling in the spleen and lymph nodes. The results of immunohistochemistry for Bcl-2 and Bax suggest that the intrinsic pathway of apoptosis is not important in the analyzed organs.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais (FAPEMIG)Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Universidad del Tolima (UT) Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia (FMVZ)Universidad de Córdoba (UCO) Facultad de Medicina Veterinaria y ZootecniaUniversidade Federal de Minas Gerais (UFMG) Instituto de Ciências Biológicas (ICB)Universidade Estadual Paulista (UNESP) Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV)UNESP FCAVUniversidade Estadual Paulista (UNESP) Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV)UNESP FCAVUniversidade Federal de Santa Maria (UFSM)Universidad del Tolima (UT)Universidad de Córdoba (UCO)Universidade Federal de Minas Gerais (UFMG)Universidade Estadual Paulista (Unesp)Sanchez, Irma Ximena BarbosaSocarras, Teresa de Jesus OviedoSilva, Miguel Ladino [UNESP]Pereira, Nubia BragaMachado, Rosangela Zacarias [UNESP]Vasconcelos, Anilton Cesar2014-05-20T13:13:59Z2014-05-20T13:13:59Z2012-08-01info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/article1457-1463application/pdfhttp://dx.doi.org/10.1590/S0103-84782012000800021Ciência Rural. Universidade Federal de Santa Maria (UFSM), v. 42, n. 8, p. 1457-1463, 2012.0103-8478http://hdl.handle.net/11449/159910.1590/S0103-84782012000800021S0103-84782012000800021WOS:000307865000021S0103-84782012000800021.pdf3254990612451836SciELOreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESPporCiência Rural0.5250,337info:eu-repo/semantics/openAccess2024-06-07T13:03:18Zoai:repositorio.unesp.br:11449/1599Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestopendoar:29462024-08-05T23:48:55.451748Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)false
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