Suplementação com ácido oleico altera a síntese de prostaglandinas em células trofoblásticas bovinas cultivadas in vitro

• Autor(a) principal: Silva, Gabriel Souza da
• Data de Publicação: 2024
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: https://hdl.handle.net/11449/256473
• topic: Ácido graxo; Trofectoderma; Blastocisto; Fatty acid; Trophectoderm; Blastocyst

Em bovinos a mortalidade embrionária precoce, ocasionada por falhas no reconhecimento materno-fetal (RMF), é uma das maiores causas de falhas reprodutivas. O ácido oleico (OA) determina modificações na síntese de prostaglandinas que podem favorecer o RMF. A hipótese é que a suplementação com OA, no meio de cultura de CT-1 aumenta a síntese de PGE2, diminui a síntese de PGF2α e aumenta a relação PGE2/PGF2α, sendo tal efeito dose-dependente. O objetivo foi determinar os efeitos da suplementação com OA (Sigma, O1383) no cultivo in vitro de células trofoblásticas bovinas (CT-1) sobre a síntese de prostaglandina E2 (PGE2) e prostaglandina F2α (PGF2α). As CT-1 foram cultivadas por 24 dias, incubadas a 38,5°C em atmosfera umidificada, com 5% de CO2 em garrafas de cultivo. Após essa etapa, as CT-1 foram transferidas para placas de cultivo contendo meio acrescido com 10% de soro fetal bovino (SFB), onde foram cultivadas por 5 dias e, em seguida, receberam meio de cultivo isento de SFB durante 24 horas. Finalmente, as CT-1 foram suplementadas com diferentes concentrações de OA (0, 50, 100, 200, 500 e 1000 µM) durante 48 e 72 horas em meio sem SFB. As concentrações de PGE2 e PGF2α foram determinadas por ensaio de imunoabsorção enzimática. A análise estatística foi realizada pelo PROC MIXED do SAS. A concentração de PGF2α no tempo de 48 horas foi maior (P < 0,0001) nos tratamentos com 50 μM, 100 μM, 200 μM e 500 μM de OA (88,97 ± 7,11; 95,31 ± 7,11; 114,88 ± 7,11 e 107,83 ± 7,11 ng/ml; respectivamente) comparado ao grupo controle (61,52 ± 7,11 ng/ml), o tratamento de 1000 μM de OA (58,44 ± 7,11 ng/ml) não diferiu do grupo controle. A concentração de PGF2α no tempo de 72 horas foi maior (P < 0,0001) nos tratamentos com 50 μM, 100 μM, 200 μM e 500 μM de OA (64,08 ± 2,89; 76,45 ± 2,89; 70,31 ± 2,89 e 59,31 ± 2,89 ng/ml; respectivamente) comparado ao grupo controle (49,40 ± 2,89 ng/ml), no tratamento de 1000 μM de OA (39,41 ± 2,89 ng/ml) foi menor que no grupo controle. As CT-1 suplementadas com 200 μM, 500 μM e 1000 μM de OA apresentaram um aumento (P = 0,0151) na síntese de PGE2 no tempo de 48 horas (20,61 ± 3,39; 20,11 ± 3,39 e 19,11 ± 3,39 ng/ml; respectivamente) comparado ao grupo controle (4,80 ± 2,93 ng/ml). Com 72 horas, houve tendência (P = 0,0872) no aumento da síntese de PGE2 (P = 0,0872), quando as CT-1 suplementadas com 50 μM, 200 μM e 1000 μM de OA (18,60 ± 3,60; 20,20 ± 3,60 e 19,00 ± 3,60 ng/ml; respectivamente) foram comparadas ao grupo controle (5,40 ± 3,60 ng/ml). Nos grupos tratados com OA por 48 horas, a razão PGE2/PGF2α foi menor (P = 0,0460) quando as CT-1 foram suplementadas com 200 μM e 500 μM de OA (0,62 ± 0,06 e 0,56 ± 0,06) comparado ao grupo controle (0,82 ± 0,06 ng/ml). Com 72 horas, houve tendência na diminuição da razão PGE2/PGF2α (P = 0,0834) apenas quando as CT-1 foram suplementadas com 500 μM de OA (0,62 ± 0,10) comparado ao grupo controle (0,93 ± 0,09 ng/ml). Em conclusão, a suplementação de OA na concentração de 1000 µM, diminui a síntese de PGF2α com 72 horas e aumenta a síntese de PGE2 com 48 horas no cultivo in vitro de CT-1.