Efeitos da indução sequencial após a pré maturação in vitro sobre a produção embrionária

• Autor(a) principal: Silva, Nathalia Romeiro
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/244723
• topic: Maturação in vitro; Cultivo sequencial; Pré-MIV; PIVE

A produção in vitro de embriões bovinos desempenha um papel importante na pecuária e na pesquisa, além de ser utilizada como embasamento para melhorias das técnicas de reprodução assistida. Esse estudo foi realizado com o objetivo de desenvolver meios de cultivo com base nos processos que ocorrem in vivo. Com o objetivo de aprimorar um sistema de maturação oocitária já estabelecido em nosso laboratório, o Sistema Folicular (SF), utilizamos os indutores FSH e ampirregulina (AREG) de maneira sequencial, a fim de promover uma ativação mais fisiológica da cascata de maturação. Esse novo sistema foi denominado SF sequencial (SFseq). Ovários bovinos foram coletados em abatedouros e seus complexos cumulus-oócitos (COCs) foram aspirados e submetidos à pré-MIV durante 9 horas e, na sequência, passaram por diferentes protocolos de MIV: (1) MIV induzida apenas com FSH (grupo FSH), (2) MIV induzida com o SF (grupo SF) e (3) MIV com o SF sequencial (grupo SFseq). Os COCs alocados no grupo SFseq foram primeiramente submetidos a 6h de cultivo em meio idêntico ao SF, exceto pela exclusão de AREG, e posteriormente, cultivados por mais 16h em meio SF completo. Após a maturação, os COCs foram avaliados quanto a expansão do cumulus e posteriormente submetidos à fertilização in vitro (FIV) e cultivo in vitro (CIV). No terceiro dia do cultivo, a clivagem embrionária foi analisada e ao final de 7 dias de cultivo, a taxa de produção de blastocistos, seu grau de desenvolvimento e número de células foram avaliados. Os dados foram comparados por ANOVA ou Kruskal-Wallis e as diferenças foram consideradas significativas quando P ≤ 0,05. Os tratamentos SF e o SFseq promoveram maior porcentagem de COCs completamente expandidos ao final da MIV em relação ao grupo FSH, mas não diferiram entre si. O SFseq resultou em taxas de desenvolvimento (total e de blastocistos expandidos e eclodidos) numericamente, mas não significativamente, superiores em relação aos grupos FSH e SF. O tratamento SFseq produziu embriões com maior número de células em relação ao tratamento SF, mas não diferiu estatisticamente do grupo FSH quanto a esse parâmetro. Os dados sugerem que a estratégia sequencial pode melhorar a eficácia do SF, embora isso deve ser confirmado durante a continuidade dos estudos com maior número de réplicas experimentais e o ajuste das concentrações de FSH e AREG nas etapas do tratamento sequencial.