Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosmético

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Pegorin, Giovana Sant'Ana [UNESP]
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/183384
Resumo: A geração de resíduos nas diversas atividades humanas tem sido tema central em discussões sobre sustentabilidade ambiental, com destaque para os resíduos agroindustriais. Sabe-se que a partir de tecnologias verdes, os resíduos de biomassa apresentam grande potencial para impulsionar a produção sustentável e gerar produtos químicos de alto valor agregado. O Cerrado é considerado o bioma mais ameaçado no Brasil e no mundo, devido à expansão das fronteiras agrícolas com subsequentes perdas de espécies vegetais nativas. Entretanto, ainda hospeda 4600 espécies endêmicas, que merecem ser preservadas, como Caryocar brasiliense Camb. (Caryocaraceae), mais conhecido como pequizeiro. Dentro desse contexto, a realização de estudos de prospecção química e farmacológica do resíduo da polpa do pequi, visando o desenvolvimento de fitoprodutos, abre a possibilidade de uso dessa matéria-prima na fabricação de produtos de alto valor agregado, permitindo que sua valorização econômica resulte no equilíbrio entre sua produção agrícola e a proteção do meio ambiente. Diante do que foi exposto, este trabalho teve por objetivo desenvolver metodologias verdes para identificar os metabólitos secundários presentes no extrato hidroetanólico da torta (resíduo) da polpa do pequi, a partir do resíduo obtido no processo de extração de seu óleo, e também no fitocosmético à base deste extrato. Ademais, avaliar a toxicidade in vitro deste extrato e do fitocosmético. Em relação à toxicidade in vitro, o extrato não proporcionou o rompimento da membrana das hemácias na avaliação da atividade hemolítica em concentrações iguais ou inferiores a 125 µg/mL. Além disso, o creme base e o fitocosmético também apresentaram 0% de hemólise em todas as concentrações (250, 125 e 62,5 µg/mL), semelhante estatisticamente ao controle negativo, demostrando que as amostras não promoveram nenhum dano na membrana celular das hemácias, sendo, portanto, atóxicas. No teste de citotoxicidade pelo método MTT, nos três tempos de tratamentos (24, 48 e 72 h), o extrato, o creme base e o fitocosmético se mostraram atóxicos nas concentrações (15,6 a 250 µg/mL). O valor de CI50 do extrato foi superior a 50%, indicando uma citotoxicidade a ser desconsiderada. Estes resultados sugerem o uso deste extrato no desenvolvimento de um novo fitocosmético. A partir das análises por CLAE-DAD/UV, foi possível desenvolver uma condição cromatográfica apropriada para separar e identificar os metabólitos secundários neste extrato. A melhor condição utilizou H2O ultrapura acidificada com 0,1% (v/v) de ácido fórmico e MeOH e a coluna C18 Hydro 250 x 4,6 mm x 4 µm (Phenomenex®). Esta condição, convertida para um sistema CLUE-QTOF-EM, foi utilizada para a identificação tentativa dos metabólitos secundários, sendo identificadas substâncias da classe dos compostos fenólicos, como ácidos fenólicos e flavonoides (glicosilados ou não), além de açúcares. O ácido clorogênico (m/z 353 [M-H]-), glicosídeo do ácido cafeico (m/z 341 [M-H]-), ácido p-cumárico (m/z 163 [M-H]-), miricetina-galoil-glicosídeo (m/z 631 [M-H]-), sacarose (m/z 341 [M-H]-) e metil-2-O-α-ramnopiranosil-β-glicosídeo (m/z 471 [M-H]-) foram algumas das substâncias identificadas. Sendo assim, foi possível afirmar que a condição cromatográfica desenvolvida foi eficaz na resolução dos picos, bem como na detecção e identificação das substâncias por meio dos espectros no UV e de massas.
id UNSP_8c69bd96aa96e88cd41cbc8cf73fb65a
oai_identifier_str oai:repositorio.unesp.br:11449/183384
network_acronym_str UNSP
network_name_str Repositório Institucional da UNESP
repository_id_str 2946
spelling Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosméticoDevelopment of green analytical methodology and cytotoxicity evaluation of Caryocar brasiliense Camb. residue extract and its phytocosmetic.Caryocar brasiliense Camb.Fitocosmético.Resíduos agroindustriais.Toxicidade.Metabólitos secundários.Agroindustrial wasteSecondary metabolitesPhytocosmeticA geração de resíduos nas diversas atividades humanas tem sido tema central em discussões sobre sustentabilidade ambiental, com destaque para os resíduos agroindustriais. Sabe-se que a partir de tecnologias verdes, os resíduos de biomassa apresentam grande potencial para impulsionar a produção sustentável e gerar produtos químicos de alto valor agregado. O Cerrado é considerado o bioma mais ameaçado no Brasil e no mundo, devido à expansão das fronteiras agrícolas com subsequentes perdas de espécies vegetais nativas. Entretanto, ainda hospeda 4600 espécies endêmicas, que merecem ser preservadas, como Caryocar brasiliense Camb. (Caryocaraceae), mais conhecido como pequizeiro. Dentro desse contexto, a realização de estudos de prospecção química e farmacológica do resíduo da polpa do pequi, visando o desenvolvimento de fitoprodutos, abre a possibilidade de uso dessa matéria-prima na fabricação de produtos de alto valor agregado, permitindo que sua valorização econômica resulte no equilíbrio entre sua produção agrícola e a proteção do meio ambiente. Diante do que foi exposto, este trabalho teve por objetivo desenvolver metodologias verdes para identificar os metabólitos secundários presentes no extrato hidroetanólico da torta (resíduo) da polpa do pequi, a partir do resíduo obtido no processo de extração de seu óleo, e também no fitocosmético à base deste extrato. Ademais, avaliar a toxicidade in vitro deste extrato e do fitocosmético. Em relação à toxicidade in vitro, o extrato não proporcionou o rompimento da membrana das hemácias na avaliação da atividade hemolítica em concentrações iguais ou inferiores a 125 µg/mL. Além disso, o creme base e o fitocosmético também apresentaram 0% de hemólise em todas as concentrações (250, 125 e 62,5 µg/mL), semelhante estatisticamente ao controle negativo, demostrando que as amostras não promoveram nenhum dano na membrana celular das hemácias, sendo, portanto, atóxicas. No teste de citotoxicidade pelo método MTT, nos três tempos de tratamentos (24, 48 e 72 h), o extrato, o creme base e o fitocosmético se mostraram atóxicos nas concentrações (15,6 a 250 µg/mL). O valor de CI50 do extrato foi superior a 50%, indicando uma citotoxicidade a ser desconsiderada. Estes resultados sugerem o uso deste extrato no desenvolvimento de um novo fitocosmético. A partir das análises por CLAE-DAD/UV, foi possível desenvolver uma condição cromatográfica apropriada para separar e identificar os metabólitos secundários neste extrato. A melhor condição utilizou H2O ultrapura acidificada com 0,1% (v/v) de ácido fórmico e MeOH e a coluna C18 Hydro 250 x 4,6 mm x 4 µm (Phenomenex®). Esta condição, convertida para um sistema CLUE-QTOF-EM, foi utilizada para a identificação tentativa dos metabólitos secundários, sendo identificadas substâncias da classe dos compostos fenólicos, como ácidos fenólicos e flavonoides (glicosilados ou não), além de açúcares. O ácido clorogênico (m/z 353 [M-H]-), glicosídeo do ácido cafeico (m/z 341 [M-H]-), ácido p-cumárico (m/z 163 [M-H]-), miricetina-galoil-glicosídeo (m/z 631 [M-H]-), sacarose (m/z 341 [M-H]-) e metil-2-O-α-ramnopiranosil-β-glicosídeo (m/z 471 [M-H]-) foram algumas das substâncias identificadas. Sendo assim, foi possível afirmar que a condição cromatográfica desenvolvida foi eficaz na resolução dos picos, bem como na detecção e identificação das substâncias por meio dos espectros no UV e de massas.The generation of waste in the various human activities has been the central theme in discussions on environmental sustainability, with emphasis on agroindustrial waste. It is known that from green technologies, biomass residues have great potential to boost sustainable production and generate high added value chemicals. The Cerrado is considered the most threatened biome in Brazil and the world, due to the expansion of agricultural borders with subsequent losses of native plant species. However, it still hosts 4600 endemic species that deserve to be preserved, such as Caryocar brasiliense Camb., better known as pequizeiro. In this context, the study of chemical and pharmacological prospecting of the pequi pulp residue, aiming at the development of plant products, opens the possibility of using this raw material in the manufacture of products with high added value, allowing that its economic appreciation results in the balance between the agricultural production and the environment protection. In view of the foregoing, this work aimed to develop green methodologies to identify the secondary metabolites present in the hydroethanolic extract of the pequi pulp residue, from the residue obtained in the extraction process of its oil, as well as in phytocosmetic with a base of this extract. In addition, to assess the in vitro toxicity level of this extract and of this phytocosmetic in order to confirm its safety. In relation to in vitro toxicity, the extract did not cause rupture of the red blood cells in the evaluation of hemolytic activity at concentrations equal or lower than 125 μg/mL. Furthermore, the base cream and the phytocosmetic also showed 0% of hemolysis at all concentrations (250, 125 and 62.5 μg/mL), similar to the negative control, showing that the samples analyzed did not promote any damage to the erythrocytes membrane, therefore, they are not toxic. In the MTT cytotoxicity test, at the three treatment times (24, 48 and 72 h), the extract, the base cream and the phytocosmetic were non-toxic in the concentrations (15.6 to 250 μg/mL). The IC50 value of the extract was higher than 50%, indicating a cytotoxicity to be disregarded. These results suggest that the use of this extract is safe for development of a new phytocosmetic. From the analyzes by HPLC-DAD/UV, it was possible to develop an appropriate chromatographic condition to separate and identify the secondary metabolites in this extract. The best condition utilized ultrapure H2O acidified with 0.1% (v/v) formic acid and MeOH and the C18 Hydro 250 x 4.6 mm x 4 μm (Phenomenex ®) column. This condition, converted to a CLUE-QTOF-MS system, was used for the tentative identification of secondary metabolites, being identified substances of the phenolic compounds class, such as phenolic acids and flavonoids (glycosylated or not), as well as sugars. Chlorogenic acid (m/z 353 [M-H]-), caffeic acid glycoside (m/z 341 [M-H]-), p-coumaric acid (m/z 163 [M-H]-), myrecitin-galloyl-glycoside (m/z 631 [M-H]-), sucrose (m/z 341 [M-H]-) and methyl-2-O-α-rhamnopyranosyl-β-glycoside (m/z 471 [M-H]-) were some of the substances identified in extract. Thus, it was possible to state that the chromatographic condition developed was effective in the resolution of the peaks, as well as in the detection and identification of the substances by means of UV and mass spectra.Universidade Estadual Paulista (Unesp)Santos, Lucinéia DosUniversidade Estadual Paulista (Unesp)Pegorin, Giovana Sant'Ana [UNESP]2019-09-02T14:56:57Z2019-09-02T14:56:57Z2019-08-09info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11449/18338400092460833004030170P02620573504503756porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESP2024-06-24T19:11:40Zoai:repositorio.unesp.br:11449/183384Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestopendoar:29462024-06-24T19:11:40Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)false
dc.title.none.fl_str_mv Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosmético
Development of green analytical methodology and cytotoxicity evaluation of Caryocar brasiliense Camb. residue extract and its phytocosmetic.
title Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosmético
spellingShingle Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosmético
Pegorin, Giovana Sant'Ana [UNESP]
Caryocar brasiliense Camb.
Fitocosmético.
Resíduos agroindustriais.
Toxicidade.
Metabólitos secundários.
Agroindustrial waste
Secondary metabolites
Phytocosmetic
title_short Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosmético
title_full Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosmético
title_fullStr Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosmético
title_full_unstemmed Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosmético
title_sort Desenvolvimento de metodologia analítica verde e avaliação da citotoxicidade do extrato do resíduo de Caryocar brasiliense Camb. e do seu fitocosmético
author Pegorin, Giovana Sant'Ana [UNESP]
author_facet Pegorin, Giovana Sant'Ana [UNESP]
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Santos, Lucinéia Dos
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.contributor.author.fl_str_mv Pegorin, Giovana Sant'Ana [UNESP]
dc.subject.por.fl_str_mv Caryocar brasiliense Camb.
Fitocosmético.
Resíduos agroindustriais.
Toxicidade.
Metabólitos secundários.
Agroindustrial waste
Secondary metabolites
Phytocosmetic
topic Caryocar brasiliense Camb.
Fitocosmético.
Resíduos agroindustriais.
Toxicidade.
Metabólitos secundários.
Agroindustrial waste
Secondary metabolites
Phytocosmetic
description A geração de resíduos nas diversas atividades humanas tem sido tema central em discussões sobre sustentabilidade ambiental, com destaque para os resíduos agroindustriais. Sabe-se que a partir de tecnologias verdes, os resíduos de biomassa apresentam grande potencial para impulsionar a produção sustentável e gerar produtos químicos de alto valor agregado. O Cerrado é considerado o bioma mais ameaçado no Brasil e no mundo, devido à expansão das fronteiras agrícolas com subsequentes perdas de espécies vegetais nativas. Entretanto, ainda hospeda 4600 espécies endêmicas, que merecem ser preservadas, como Caryocar brasiliense Camb. (Caryocaraceae), mais conhecido como pequizeiro. Dentro desse contexto, a realização de estudos de prospecção química e farmacológica do resíduo da polpa do pequi, visando o desenvolvimento de fitoprodutos, abre a possibilidade de uso dessa matéria-prima na fabricação de produtos de alto valor agregado, permitindo que sua valorização econômica resulte no equilíbrio entre sua produção agrícola e a proteção do meio ambiente. Diante do que foi exposto, este trabalho teve por objetivo desenvolver metodologias verdes para identificar os metabólitos secundários presentes no extrato hidroetanólico da torta (resíduo) da polpa do pequi, a partir do resíduo obtido no processo de extração de seu óleo, e também no fitocosmético à base deste extrato. Ademais, avaliar a toxicidade in vitro deste extrato e do fitocosmético. Em relação à toxicidade in vitro, o extrato não proporcionou o rompimento da membrana das hemácias na avaliação da atividade hemolítica em concentrações iguais ou inferiores a 125 µg/mL. Além disso, o creme base e o fitocosmético também apresentaram 0% de hemólise em todas as concentrações (250, 125 e 62,5 µg/mL), semelhante estatisticamente ao controle negativo, demostrando que as amostras não promoveram nenhum dano na membrana celular das hemácias, sendo, portanto, atóxicas. No teste de citotoxicidade pelo método MTT, nos três tempos de tratamentos (24, 48 e 72 h), o extrato, o creme base e o fitocosmético se mostraram atóxicos nas concentrações (15,6 a 250 µg/mL). O valor de CI50 do extrato foi superior a 50%, indicando uma citotoxicidade a ser desconsiderada. Estes resultados sugerem o uso deste extrato no desenvolvimento de um novo fitocosmético. A partir das análises por CLAE-DAD/UV, foi possível desenvolver uma condição cromatográfica apropriada para separar e identificar os metabólitos secundários neste extrato. A melhor condição utilizou H2O ultrapura acidificada com 0,1% (v/v) de ácido fórmico e MeOH e a coluna C18 Hydro 250 x 4,6 mm x 4 µm (Phenomenex®). Esta condição, convertida para um sistema CLUE-QTOF-EM, foi utilizada para a identificação tentativa dos metabólitos secundários, sendo identificadas substâncias da classe dos compostos fenólicos, como ácidos fenólicos e flavonoides (glicosilados ou não), além de açúcares. O ácido clorogênico (m/z 353 [M-H]-), glicosídeo do ácido cafeico (m/z 341 [M-H]-), ácido p-cumárico (m/z 163 [M-H]-), miricetina-galoil-glicosídeo (m/z 631 [M-H]-), sacarose (m/z 341 [M-H]-) e metil-2-O-α-ramnopiranosil-β-glicosídeo (m/z 471 [M-H]-) foram algumas das substâncias identificadas. Sendo assim, foi possível afirmar que a condição cromatográfica desenvolvida foi eficaz na resolução dos picos, bem como na detecção e identificação das substâncias por meio dos espectros no UV e de massas.
publishDate 2019
dc.date.none.fl_str_mv 2019-09-02T14:56:57Z
2019-09-02T14:56:57Z
2019-08-09
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/11449/183384
000924608
33004030170P0
2620573504503756
url http://hdl.handle.net/11449/183384
identifier_str_mv 000924608
33004030170P0
2620573504503756
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UNESP
instname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron:UNESP
instname_str Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron_str UNESP
institution UNESP
reponame_str Repositório Institucional da UNESP
collection Repositório Institucional da UNESP
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1803045365461549056