Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogaster

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Garcia, Geovana Siqueira
Data de Publicação: 2019
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da UNESP
Texto Completo: http://hdl.handle.net/11449/180935
Resumo: A oxidase alternativa (AOX) é uma enzima com função de química redox semelhante aos complexos III e IV da cadeia respiratória (CR), porém, sem bombeamento de prótons para o espaço intermembranas da mitocôndria. Assim, ela não contribui à força próton-motriz que leva à produção de ATP e a energia é dissipada em forma de calor. AOX está presente na maioria dos metazoários, mas ausente em vertebrados e insetos, os quais perderam independentemente ao longo da evolução o gene que a codifica. Quando foi expressa transgenicamente em Drosophila melanogaster e outros modelos experimentais, AOX de Ciona intestinalis proporcionou melhoria nas condições associadas a disfunções mitocondriais, apresentando-se com potencial terapêutico. Os efeitos benéficos, entretanto, contrastam-se com a falta de investigação aprofundada da biologia da AOX em animais, principalmente em condições laboratoriais que mimetizam as da natureza. Considerando isso e o conhecimento sobre sua função termogênica em plantas, o presente trabalho objetivou investigar os efeitos da expressão de AOX em D. melanogaster sob variação térmica, testando a hipótese de que ela gera um aumento na temperatura corpórea do organismo. Linhagens expressando AOX em diferentes níveis foram submetidas a variadas temperaturas, incluindo condições severas de estresse térmico para análises durante o desenvolvimento e a fase adulta dessas moscas. AOX promoveu um aceleramento dose-dependente no desenvolvimento, aumentou significativamente a viabilidade dos ovos/larvas em baixas temperaturas (12 e 15°C), além de maior resistência ao frio (0°C) e recuperação mais rápida após exposição a este tipo de estresse em adultos. Imagens de termografia de infravermelho em larvas também apontaram um aumento na temperatura corpórea larval. Embora os dados sejam consistentes com a hipótese de produção de calor, análises in vitro de respirometria em extratos larvais não evidenciaram efeitos bioquímicos significativos da expressão da AOX no consumo de oxigênio mitocondrial, os quais pudessem explicar qualquer mecanismo termogênico. Portanto, a AOX mitiga os efeitos do frio, através de um complexo papel no metabolismo animal, o qual ainda precisa ser melhor elucidado.
id UNSP_935efd1bdc101416479b68a079ee2773
oai_identifier_str oai:repositorio.unesp.br:11449/180935
network_acronym_str UNSP
network_name_str Repositório Institucional da UNESP
repository_id_str 2946
spelling Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogasterEvaluation of the thermogenic properties of the mitochondrial alternative oxidase expressed in Drosophila melanogasterOxidase alternativaCadeia respiratóriaTermogêneseMitocôndriaDrosophila melanogasterOxidase alternativeRespiratory chainThermogenesisMitochondriaA oxidase alternativa (AOX) é uma enzima com função de química redox semelhante aos complexos III e IV da cadeia respiratória (CR), porém, sem bombeamento de prótons para o espaço intermembranas da mitocôndria. Assim, ela não contribui à força próton-motriz que leva à produção de ATP e a energia é dissipada em forma de calor. AOX está presente na maioria dos metazoários, mas ausente em vertebrados e insetos, os quais perderam independentemente ao longo da evolução o gene que a codifica. Quando foi expressa transgenicamente em Drosophila melanogaster e outros modelos experimentais, AOX de Ciona intestinalis proporcionou melhoria nas condições associadas a disfunções mitocondriais, apresentando-se com potencial terapêutico. Os efeitos benéficos, entretanto, contrastam-se com a falta de investigação aprofundada da biologia da AOX em animais, principalmente em condições laboratoriais que mimetizam as da natureza. Considerando isso e o conhecimento sobre sua função termogênica em plantas, o presente trabalho objetivou investigar os efeitos da expressão de AOX em D. melanogaster sob variação térmica, testando a hipótese de que ela gera um aumento na temperatura corpórea do organismo. Linhagens expressando AOX em diferentes níveis foram submetidas a variadas temperaturas, incluindo condições severas de estresse térmico para análises durante o desenvolvimento e a fase adulta dessas moscas. AOX promoveu um aceleramento dose-dependente no desenvolvimento, aumentou significativamente a viabilidade dos ovos/larvas em baixas temperaturas (12 e 15°C), além de maior resistência ao frio (0°C) e recuperação mais rápida após exposição a este tipo de estresse em adultos. Imagens de termografia de infravermelho em larvas também apontaram um aumento na temperatura corpórea larval. Embora os dados sejam consistentes com a hipótese de produção de calor, análises in vitro de respirometria em extratos larvais não evidenciaram efeitos bioquímicos significativos da expressão da AOX no consumo de oxigênio mitocondrial, os quais pudessem explicar qualquer mecanismo termogênico. Portanto, a AOX mitiga os efeitos do frio, através de um complexo papel no metabolismo animal, o qual ainda precisa ser melhor elucidado.Alternative oxidase (AOX) is an enzyme that catalyzes a redox reaction similarly to complexes III and IV of the respiratory chain (RC), but without the proton pumping into the mitochondrial intermembrane space. It therefore does not contribute to the proton-motive force that leads to ATP production and so the energy is dissipated as heat. AOX is present in most metazoans, but not in vertebrates and insects, which independently lost throughout evolution its coding gene. When the enzyme was expressed transgenically in Drosophila melanogaster and other experimental models, AOX improved in the deleterious conditions associated to mitochondrial dysfunctions, presenting with a therapeutic potential. The beneficial effects, however, contrast with the lack of in-depth information about the biology of AOX in animals, especially in nature-like laboratory conditions. Considering this and the knowledge about its thermogenic function in plants, we aimed at investigating the effects of AOX expression in D. melanogaster under varying thermal conditions, testing the hypothesis that the enzyme generates an increase in organismal body temperature. We submitted different AOX-expressing lines to various temperatures, including severe stress conditions for analysis during development and during the adult stage. AOX promoted dose-dependent acceleration in development, significantly increased viability of eggs/larvae at low temperatures (12 and 15°C). It also promoted higher resistance to cold (0°C) and faster recovery after cold exposure in adults. Infrared thermography images of larvae showed an increase in larval body temperature. Although the data are consistent with the heat generation hypothesis, in vitro respirometry analysis in larval extracts did not show significant biochemical effects of AOX expression on mitochondrial oxygen consumption, which could explain any thermogenic mechanism. Therefore, AOX attenuates the effects of cold, through a complex role in animal metabolism, which warrants further investigation.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)2017/03806-7Universidade Estadual Paulista (Unesp)Oliveira, Marcos Túlio [UNESP]Universidade Estadual Paulista (Unesp)Garcia, Geovana Siqueira2019-03-07T19:22:41Z2019-03-07T19:22:41Z2019-02-19info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/11449/18093500091350833004153023P53763809369943644porinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da UNESPinstname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)instacron:UNESP2023-10-03T06:07:24Zoai:repositorio.unesp.br:11449/180935Repositório InstitucionalPUBhttp://repositorio.unesp.br/oai/requestopendoar:29462023-10-03T06:07:24Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)false
dc.title.none.fl_str_mv Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogaster
Evaluation of the thermogenic properties of the mitochondrial alternative oxidase expressed in Drosophila melanogaster
title Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogaster
spellingShingle Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogaster
Garcia, Geovana Siqueira
Oxidase alternativa
Cadeia respiratória
Termogênese
Mitocôndria
Drosophila melanogaster
Oxidase alternative
Respiratory chain
Thermogenesis
Mitochondria
title_short Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogaster
title_full Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogaster
title_fullStr Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogaster
title_full_unstemmed Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogaster
title_sort Avaliação do potencial termogênico da oxidase alternativa mitocondrial expressa em Drosophila melanogaster
author Garcia, Geovana Siqueira
author_facet Garcia, Geovana Siqueira
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Oliveira, Marcos Túlio [UNESP]
Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.contributor.author.fl_str_mv Garcia, Geovana Siqueira
dc.subject.por.fl_str_mv Oxidase alternativa
Cadeia respiratória
Termogênese
Mitocôndria
Drosophila melanogaster
Oxidase alternative
Respiratory chain
Thermogenesis
Mitochondria
topic Oxidase alternativa
Cadeia respiratória
Termogênese
Mitocôndria
Drosophila melanogaster
Oxidase alternative
Respiratory chain
Thermogenesis
Mitochondria
description A oxidase alternativa (AOX) é uma enzima com função de química redox semelhante aos complexos III e IV da cadeia respiratória (CR), porém, sem bombeamento de prótons para o espaço intermembranas da mitocôndria. Assim, ela não contribui à força próton-motriz que leva à produção de ATP e a energia é dissipada em forma de calor. AOX está presente na maioria dos metazoários, mas ausente em vertebrados e insetos, os quais perderam independentemente ao longo da evolução o gene que a codifica. Quando foi expressa transgenicamente em Drosophila melanogaster e outros modelos experimentais, AOX de Ciona intestinalis proporcionou melhoria nas condições associadas a disfunções mitocondriais, apresentando-se com potencial terapêutico. Os efeitos benéficos, entretanto, contrastam-se com a falta de investigação aprofundada da biologia da AOX em animais, principalmente em condições laboratoriais que mimetizam as da natureza. Considerando isso e o conhecimento sobre sua função termogênica em plantas, o presente trabalho objetivou investigar os efeitos da expressão de AOX em D. melanogaster sob variação térmica, testando a hipótese de que ela gera um aumento na temperatura corpórea do organismo. Linhagens expressando AOX em diferentes níveis foram submetidas a variadas temperaturas, incluindo condições severas de estresse térmico para análises durante o desenvolvimento e a fase adulta dessas moscas. AOX promoveu um aceleramento dose-dependente no desenvolvimento, aumentou significativamente a viabilidade dos ovos/larvas em baixas temperaturas (12 e 15°C), além de maior resistência ao frio (0°C) e recuperação mais rápida após exposição a este tipo de estresse em adultos. Imagens de termografia de infravermelho em larvas também apontaram um aumento na temperatura corpórea larval. Embora os dados sejam consistentes com a hipótese de produção de calor, análises in vitro de respirometria em extratos larvais não evidenciaram efeitos bioquímicos significativos da expressão da AOX no consumo de oxigênio mitocondrial, os quais pudessem explicar qualquer mecanismo termogênico. Portanto, a AOX mitiga os efeitos do frio, através de um complexo papel no metabolismo animal, o qual ainda precisa ser melhor elucidado.
publishDate 2019
dc.date.none.fl_str_mv 2019-03-07T19:22:41Z
2019-03-07T19:22:41Z
2019-02-19
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://hdl.handle.net/11449/180935
000913508
33004153023P5
3763809369943644
url http://hdl.handle.net/11449/180935
identifier_str_mv 000913508
33004153023P5
3763809369943644
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.rights.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
publisher.none.fl_str_mv Universidade Estadual Paulista (Unesp)
dc.source.none.fl_str_mv reponame:Repositório Institucional da UNESP
instname:Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron:UNESP
instname_str Universidade Estadual Paulista (UNESP)
instacron_str UNESP
institution UNESP
reponame_str Repositório Institucional da UNESP
collection Repositório Institucional da UNESP
repository.name.fl_str_mv Repositório Institucional da UNESP - Universidade Estadual Paulista (UNESP)
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1799964420986634240