Caracterização estrutural e farmacológica de peptídeos isolados do veneno de Bothrops bilineatus smaragdinus (Víbora Amazônica) com potencial atividade moduladora da liberação sináptica motora

• Autor(a) principal: Couceiro, Fernanda Yumi Giglio Morimoto
• Data de Publicação: 2024
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UNOESTE
• Texto Completo: http://bdtd.unoeste.br:8080/jspui/handle/jspui/1578
• topic: veneno de Bothrops; neurotransmissão motora; facilitação neuromuscular; toxinas pré-sinápticas; presynaptic toxins; Bothrops venom; motor neurotransmission; neuromuscular facilitation; CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA

Bothrops bilineatus smaragdinus é uma serpente arborícola da região amazônica cuja toxinologia tem sido pouco estudada. Neste trabalho, propomos purificar e identificar estrutural e farmacologicamente neurotoxinas pré-sinápticas do veneno da B. b. smaragdinus com potencial atividade moduladora da liberação sináptica motora. O veneno bruto foi sujeitado à gel filtração, com a fração de interesse sendo então purificada por RP-HPLC, e as toxinas resultantes analisadas quanto ao seu perfil neurotóxico em preparação nervo frênico-diafragma (NFD) de camundongo in vitro. As toxinas com função excitatória sobre a neurotransmissão motora foram sujeitadas à espectrometria de massas para determinação da massa intacta. A gel filtração revelou a existência de oito frações (Picos: P1–P8), sendo que a fração P8 apresentou potente efeito facilitador neuromuscular concentração-dependente, sem exibir atividade fosfolipase A2 (PLA2). Fração P8 (15.6 g/ml) produziu significante aumento na frequência de potenciais de placa terminal em miniatura (PsPTM). Em adição, fração P8 (15.6 g/ml) aumentou significativamente a amplitude de potenciais de placa terminal evocados (PsPT). Análises por RP-HPLC e espectrometria de massas da fração P8 determinaram a presença de dois peptídeos com 652,4849 Da (P8-1) e 531,4108 Da (P8-2) de massa intacta. O peptídeo P8-1 exibiu majoritariamente a ação neuromuscular vista com a fração P8, aumentando a frequência de MEPPs e amplitude of EPPs em preparação NFD de camundongo. Estes achados indicam que o peptídeo P8-1 está primariamente envolvido com o efeito excitatório neuromuscular previamente visto com o veneno de B. b. smaragdinus em preparação NFD de camundongo, provavelmente estimulando a liberação de acetilcolina pelo terminal nervoso motor.