Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Navarro, Jessica Paola Fuentes Rivera
Data de Publicação: 2008
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-08012009-163245/
Resumo: Sistemas do tipo cell surface display vêm sendo desenvolvidos para expressão de proteínas heterólogas ancoradas à superfície celular de microrganismos. Várias aplicações foram reportadas destes sistemas, incluindo o emprego como biocatalizador celular, desenvolvimento de vacinas e biosorventes celulares. Neste trabalho foi desenvolvido um sistema que permite ancoragem da proteína glicoamilase de Aspergillus awamori à superfície da parede celular da levedura Saccharomyces cerevisiae. O gene codificador da glicoamilase com sua seqüência sinal foi fusionado ao fragmento do gene codificador da região C-terminal da proteína Flo1p (Flo428), que foi utilizada como âncora (fragmento CG*FC). As células de levedura foram transformadas com o fragmento híbrido CG*FC e os transformantes foram capazes de degradar amido e liberar glicose. A atividade da glicoamilase não foi detectada no meio de cultura, porém está presente no sedimento celular. Estes resultados demonstram que a glicoamilase foi ancorada à parede celular da nova linhagem recombinante de levedura.
id USP_77d5c8e71e27eed66ff906cee98b5781
oai_identifier_str oai:teses.usp.br:tde-08012009-163245
network_acronym_str USP
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository_id_str 2721
spelling Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.Construction of a system that allows anchoring of recombinant protein to the cell surface of yeast.Saccharomyces cerevisiaeSaccharomyces cerevisiaeAnchor Flo1pAnchoring protein systemÂncora FLO1pBiotechnologyBiotecnologiaCell surfaceGlicoamilaseGlucoamylaseSistema de ancoragem de proteínasSuperfície celularSistemas do tipo cell surface display vêm sendo desenvolvidos para expressão de proteínas heterólogas ancoradas à superfície celular de microrganismos. Várias aplicações foram reportadas destes sistemas, incluindo o emprego como biocatalizador celular, desenvolvimento de vacinas e biosorventes celulares. Neste trabalho foi desenvolvido um sistema que permite ancoragem da proteína glicoamilase de Aspergillus awamori à superfície da parede celular da levedura Saccharomyces cerevisiae. O gene codificador da glicoamilase com sua seqüência sinal foi fusionado ao fragmento do gene codificador da região C-terminal da proteína Flo1p (Flo428), que foi utilizada como âncora (fragmento CG*FC). As células de levedura foram transformadas com o fragmento híbrido CG*FC e os transformantes foram capazes de degradar amido e liberar glicose. A atividade da glicoamilase não foi detectada no meio de cultura, porém está presente no sedimento celular. Estes resultados demonstram que a glicoamilase foi ancorada à parede celular da nova linhagem recombinante de levedura.Cell surface display systems have being developed for expression of heterologous proteins anchored to the cell surface of microorganisms. Several applications of these systems have been reported, including employment as whole-cell biocatalysts, development of vaccines and cellular biosorvents. In this work it was developed a system that allows the anchoring of the Aspergillus awamori glucoamylase protein to the cell wall surface of the yeast Saccharomyces cerevisiae. The gene encoding glucoamylase with its secretion signal was fused to the gene fragment encoding the C-terminal region of Flo1 protein, used as an anchor (CG*FC fragment). Yeast cells were transformed with hybrid CG*FC fragment and transformants were able to degrade starch and release glucose. Glucoamylase activity was not detected in the culture medium, but only in sedimented cells. These results demonstrate that glucoamylase was anchored to the cell wall of the new yeast recombinant strain.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPVicente, Elisabete JoseNavarro, Jessica Paola Fuentes Rivera2008-07-03info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-08012009-163245/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2016-07-28T16:09:58Zoai:teses.usp.br:tde-08012009-163245Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212016-07-28T16:09:58Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
dc.title.none.fl_str_mv Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.
Construction of a system that allows anchoring of recombinant protein to the cell surface of yeast.
title Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.
spellingShingle Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.
Navarro, Jessica Paola Fuentes Rivera
Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces cerevisiae
Anchor Flo1p
Anchoring protein system
Âncora FLO1p
Biotechnology
Biotecnologia
Cell surface
Glicoamilase
Glucoamylase
Sistema de ancoragem de proteínas
Superfície celular
title_short Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.
title_full Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.
title_fullStr Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.
title_full_unstemmed Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.
title_sort Construção de sistema que permite a ancoragem de proteína recombinante à superfície celular de levedura.
author Navarro, Jessica Paola Fuentes Rivera
author_facet Navarro, Jessica Paola Fuentes Rivera
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Vicente, Elisabete Jose
dc.contributor.author.fl_str_mv Navarro, Jessica Paola Fuentes Rivera
dc.subject.por.fl_str_mv Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces cerevisiae
Anchor Flo1p
Anchoring protein system
Âncora FLO1p
Biotechnology
Biotecnologia
Cell surface
Glicoamilase
Glucoamylase
Sistema de ancoragem de proteínas
Superfície celular
topic Saccharomyces cerevisiae
Saccharomyces cerevisiae
Anchor Flo1p
Anchoring protein system
Âncora FLO1p
Biotechnology
Biotecnologia
Cell surface
Glicoamilase
Glucoamylase
Sistema de ancoragem de proteínas
Superfície celular
description Sistemas do tipo cell surface display vêm sendo desenvolvidos para expressão de proteínas heterólogas ancoradas à superfície celular de microrganismos. Várias aplicações foram reportadas destes sistemas, incluindo o emprego como biocatalizador celular, desenvolvimento de vacinas e biosorventes celulares. Neste trabalho foi desenvolvido um sistema que permite ancoragem da proteína glicoamilase de Aspergillus awamori à superfície da parede celular da levedura Saccharomyces cerevisiae. O gene codificador da glicoamilase com sua seqüência sinal foi fusionado ao fragmento do gene codificador da região C-terminal da proteína Flo1p (Flo428), que foi utilizada como âncora (fragmento CG*FC). As células de levedura foram transformadas com o fragmento híbrido CG*FC e os transformantes foram capazes de degradar amido e liberar glicose. A atividade da glicoamilase não foi detectada no meio de cultura, porém está presente no sedimento celular. Estes resultados demonstram que a glicoamilase foi ancorada à parede celular da nova linhagem recombinante de levedura.
publishDate 2008
dc.date.none.fl_str_mv 2008-07-03
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/masterThesis
format masterThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-08012009-163245/
url http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-08012009-163245/
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv
dc.rights.driver.fl_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.coverage.none.fl_str_mv
dc.publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
dc.source.none.fl_str_mv
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
instname:Universidade de São Paulo (USP)
instacron:USP
instname_str Universidade de São Paulo (USP)
instacron_str USP
institution USP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)
repository.mail.fl_str_mv virginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.br
_version_ 1809090495469584384

Registros relacionados