Efeitos da suplementação dos antioxidantes anetol ou resveratrol no metabolismo oxidativo de tecido ovariano bovino cultivado in vitro

• Autor(a) principal: Silva, Júlia Menezes Candido
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17145/tde-15022024-101708/
• topic: Anethole; Anetol; Antioxidantes; Antioxidants; Cultivo de tecido ovariano; Culture media; Meio de cultivo; Ovarian tissue culture; Resveratrol; Resveratrol

Este estudo tem como objetivo avaliar o efeito de diferentes concentrações dos agentes antioxidantes - resveratrol e anetol - no metabolismo oxidativo de tecido ovariano bovino submetido ao cultivo in vitro. Os ovários bovinos foram fatiados e os fragmentos cultivados individualmente com 1000 µL de meio de cultura isolado ou suplementado. Vinte e quatro fragmentos foram removidos aleatoriamente e imediatamente fixados em paraformaldeído a 4% para o tratamento controle não cultivado (fresco). O meio básico (MB) para cultivo in vitro foi composto pelo meio essencial mínimo modificado (a-MEM) suplementado com BSA, ITS (insulina, transferrina, selênio), glutamina, hipoxantina, estreptomicina, penicilina e amicacina. Além disso, 336 fragmentos foram distribuídos aleatoriamente nos sete grupos de tratamento contendo MB ou MB suplementado com: resveratrol [1µM]; resveratrol [2µM]; resveratrol [5µM]; anetol [1000 µg/ml]; anetol [1500 µg/ml]; e anetol [2000µg/ml]. Todos os fragmentos foram avaliados através da histologia clássica (HE); microscopia confocal (MC) - sondas de iodeto de propídio (IP) (morte celular) e 2´7´-diclorodihidrofluoresceina (H2DCFDA) (estresse oxidativo); imuno-histoquímica (IH) - sondas FOXO3 (ativação folicular). Os dados são apresentados como média (±erro padrão da média) e percentagem. A probabilidade de p < 0,05 indica diferença significativa. O cultivo de tecido ovariano bovino leva à ativação massiva dos folículos no primeiro dia de cultivo, apesar da composição do meio. A suplementação com 2.000µg/mL de Anetol, embora boa para a ativação folicular, comprometeu a continuidade da viabilidade dos folículos. Por outro lado, o composto AN1500 não só preservou a viabilidade dos folículos, mas também promoveu a sua ativação.