Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Almenara, Daniela Peres
Data de Publicação: 2009
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-03112009-104538/
Resumo: A região N-terminal de OTI-VIT-1 foi expressa e os polipeptídeos recombinantes foram purificados. OTI-VIT-1 pode ser homólogo da vitelina YP170B de C. elegans. Foram identificados um intron na região 5´ e dois na região 3´ do gene Oti-vit-1. Antissoro monoespecífico para PVIT1HisC confirmou que o gene Oti-vit-1 codifica VT1. O polipeptídeo recombinante P40-H, correspondente à região N-terminal da proteína OTI-VIT-6 interage com um polipeptídeo de aproximadamente 100 kDa (P100) presente em extratos proteicos totais de O. tipulae. Estudamos também o papel da Proteína Microssômica Transportadora de Triglicerídeos (MTP) na biossíntese de Vitelogenina do nematoide C. elegans. Ensaios de RNAi em C. elegans, utilizando parte da sequência do gene da MTP (Cel-dsc-4) foram realizados nas linhagens N2 e DH1033. Microscopia de fluorescência de vermes adultos da linhagem DH1033, submetidos a RNAi, mostrou acúmulo de YP170B::GFP no interior dos enterócitos. Este acúmulo sugere a participação da MTP na secreção de VTG. Análise imunológica da vitelogenina nestes mesmos vermes não detectaram alterações no processamento de CEL-VIT-6, sugerindo que o mesmo ocorra não só no pseudoceloma, mas também no interior dos enterócitos.
id USP_87312e501e447339acac97d6d9914006
oai_identifier_str oai:teses.usp.br:tde-03112009-104538
network_acronym_str USP
network_name_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository_id_str 2721
spelling Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.Structural and functional analysis of VT1 and YP170B vitellins from the Rhabditid nematodes Oscheius tipulae and Caenorhabditis elegans.Caenorhabditis elegansCaenorhabditis elegansOscheius tipulaeOscheius tipulaeLigand-blottingLigand-blottingMTPMTPNematodes (Structure)Nematóides (Estrutura)ParasitologiaParasitologyRNAiRNAiVitellogeninVitelogeninaA região N-terminal de OTI-VIT-1 foi expressa e os polipeptídeos recombinantes foram purificados. OTI-VIT-1 pode ser homólogo da vitelina YP170B de C. elegans. Foram identificados um intron na região 5´ e dois na região 3´ do gene Oti-vit-1. Antissoro monoespecífico para PVIT1HisC confirmou que o gene Oti-vit-1 codifica VT1. O polipeptídeo recombinante P40-H, correspondente à região N-terminal da proteína OTI-VIT-6 interage com um polipeptídeo de aproximadamente 100 kDa (P100) presente em extratos proteicos totais de O. tipulae. Estudamos também o papel da Proteína Microssômica Transportadora de Triglicerídeos (MTP) na biossíntese de Vitelogenina do nematoide C. elegans. Ensaios de RNAi em C. elegans, utilizando parte da sequência do gene da MTP (Cel-dsc-4) foram realizados nas linhagens N2 e DH1033. Microscopia de fluorescência de vermes adultos da linhagem DH1033, submetidos a RNAi, mostrou acúmulo de YP170B::GFP no interior dos enterócitos. Este acúmulo sugere a participação da MTP na secreção de VTG. Análise imunológica da vitelogenina nestes mesmos vermes não detectaram alterações no processamento de CEL-VIT-6, sugerindo que o mesmo ocorra não só no pseudoceloma, mas também no interior dos enterócitos.The N-terminal region of OTI-VIT-1 was expressed and the recombinant polypeptides were purified. OTI-VIT-1 may be homologous to the vitellin YP170B from C. elegans. We identified an intron in the 5 \'region and two in 3\' region from Oti-vit-1. Monospecific antisera to PVIT1HisC confirmed that the gene Oti-vit-1 encodes VT1. The recombinant polypeptide P40-H, corresponding to the N-terminal region of the protein OTI-VIT-6, interacts with a polypeptide of approximately 100 kDa (P100) present in total protein extracts of O. tipulae. The role of microsomal triglyceride transfer protein (MTP) in the biosynthesis of vitellogenin was studied in the nematode C. elegans. Trials of RNAi in C. elegans, using the sequence of the MTP gene (Cel-dsc-4) were performed in the strains N2 and DH1033. Fluorescence microscopy of adult worms of strain DH1033, subjected to RNAi, showed accumulation of YP170B:: GFP within the enterocytes. This accumulation suggests the involvement of MTP in the secretion of VTG. Analysis using anti-vitellogenin immune serum did not detect changes in the processing of CEL-VIT-6, suggesting that it occurs not only in pseudocoelom but also within the enterocytes.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPWinter, Carlos EduardoAlmenara, Daniela Peres2009-07-07info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttp://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-03112009-104538/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2016-07-28T16:10:01Zoai:teses.usp.br:tde-03112009-104538Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212016-07-28T16:10:01Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
dc.title.none.fl_str_mv Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.
Structural and functional analysis of VT1 and YP170B vitellins from the Rhabditid nematodes Oscheius tipulae and Caenorhabditis elegans.
title Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.
spellingShingle Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.
Almenara, Daniela Peres
Caenorhabditis elegans
Caenorhabditis elegans
Oscheius tipulae
Oscheius tipulae
Ligand-blotting
Ligand-blotting
MTP
MTP
Nematodes (Structure)
Nematóides (Estrutura)
Parasitologia
Parasitology
RNAi
RNAi
Vitellogenin
Vitelogenina
title_short Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.
title_full Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.
title_fullStr Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.
title_full_unstemmed Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.
title_sort Estudo das vitelinas VT1 e YP170B dos nematoides rabditídeos Oscheius tipulae e Caenorhabditis elegans: aspectos estruturais e funcionais.
author Almenara, Daniela Peres
author_facet Almenara, Daniela Peres
author_role author
dc.contributor.none.fl_str_mv Winter, Carlos Eduardo
dc.contributor.author.fl_str_mv Almenara, Daniela Peres
dc.subject.por.fl_str_mv Caenorhabditis elegans
Caenorhabditis elegans
Oscheius tipulae
Oscheius tipulae
Ligand-blotting
Ligand-blotting
MTP
MTP
Nematodes (Structure)
Nematóides (Estrutura)
Parasitologia
Parasitology
RNAi
RNAi
Vitellogenin
Vitelogenina
topic Caenorhabditis elegans
Caenorhabditis elegans
Oscheius tipulae
Oscheius tipulae
Ligand-blotting
Ligand-blotting
MTP
MTP
Nematodes (Structure)
Nematóides (Estrutura)
Parasitologia
Parasitology
RNAi
RNAi
Vitellogenin
Vitelogenina
description A região N-terminal de OTI-VIT-1 foi expressa e os polipeptídeos recombinantes foram purificados. OTI-VIT-1 pode ser homólogo da vitelina YP170B de C. elegans. Foram identificados um intron na região 5´ e dois na região 3´ do gene Oti-vit-1. Antissoro monoespecífico para PVIT1HisC confirmou que o gene Oti-vit-1 codifica VT1. O polipeptídeo recombinante P40-H, correspondente à região N-terminal da proteína OTI-VIT-6 interage com um polipeptídeo de aproximadamente 100 kDa (P100) presente em extratos proteicos totais de O. tipulae. Estudamos também o papel da Proteína Microssômica Transportadora de Triglicerídeos (MTP) na biossíntese de Vitelogenina do nematoide C. elegans. Ensaios de RNAi em C. elegans, utilizando parte da sequência do gene da MTP (Cel-dsc-4) foram realizados nas linhagens N2 e DH1033. Microscopia de fluorescência de vermes adultos da linhagem DH1033, submetidos a RNAi, mostrou acúmulo de YP170B::GFP no interior dos enterócitos. Este acúmulo sugere a participação da MTP na secreção de VTG. Análise imunológica da vitelogenina nestes mesmos vermes não detectaram alterações no processamento de CEL-VIT-6, sugerindo que o mesmo ocorra não só no pseudoceloma, mas também no interior dos enterócitos.
publishDate 2009
dc.date.none.fl_str_mv 2009-07-07
dc.type.status.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/publishedVersion
dc.type.driver.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
format doctoralThesis
status_str publishedVersion
dc.identifier.uri.fl_str_mv http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-03112009-104538/
url http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42135/tde-03112009-104538/
dc.language.iso.fl_str_mv por
language por
dc.relation.none.fl_str_mv
dc.rights.driver.fl_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
info:eu-repo/semantics/openAccess
rights_invalid_str_mv Liberar o conteúdo para acesso público.
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.coverage.none.fl_str_mv
dc.publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
publisher.none.fl_str_mv Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USP
dc.source.none.fl_str_mv
reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
instname:Universidade de São Paulo (USP)
instacron:USP
instname_str Universidade de São Paulo (USP)
instacron_str USP
institution USP
reponame_str Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
collection Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
repository.name.fl_str_mv Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)
repository.mail.fl_str_mv virginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.br
_version_ 1815256702261395456