Identificação e localização de um gene de resistência de milho a Exserohilum turcicum (Pass.) Leonard & Suggs através do uso de marcadores microssatélites

• Autor(a) principal: Ogliari, Juliana Bernardi
• Data de Publicação: 1999
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11137/tde-20200111-131713/
• topic: FUNGOS FITOPATOGÊNICOS; GENES; MANCHA FOLIAR; MARCADOR MOLECULAR; MILHO; RESISTÊNCIA GENÉTICA VEGETAL

A incorporação de genes de resistência qualitativa é uma importante estratégia de controle da helminthosporiose do milho. No presente estudo, a comparação entre um par de linhagens quase isogênicas - LQIs (Muehlbauer et al., 1988 e Young et al.,1988), que diferem pela presença de um gene de resistência a E. turcicum, foi a estratégia adotada para identificar marcadores microssatélites ligados a esse loco. A análise genética de LQIs também permitiu avaliar a recuperação do genoma do parental recorrente na linhagem convertida da geração RC6S1. Para tanto, as linhagens convertida L30HtHt, doadora L10HtHt e recorrente L30htht foram genotipadas para 125 locos de microssatélites, dentre os quais 61 foram informativos. A evidência de ligação entre o gene Ht introgredido e cada loco marcador foi obtida pela presença de contrastes alélicos entre as linhagens recorrente e convertida e de igualdades alélicas entre esta última e o parental doador do gene de resistência. Dentre os marcadores informativos, cinco locos previamente mapeados nos cromossomos 2 (BNGL198 e MAG01F03), 5 (PHI113 e MACE01A03) e 6 (MACT02E01) revelaram polimorfismos entre L30HtHt e L30htht, sugerindo que qualquer uma dessas regiões poderiam ser portadoras do gene Ht. A percentagem observada de 8,20% do genoma do parental doador retida na linhagem convertida praticamente correspondeu ao limite superior esperado de 7,66%, estimado pelo procedimento aplicadopor Muehlbauer et al. (1988). A correspondência entre as quantidades esperadas e observadas de cinco marcadores do parental doador retidos no genoma da linhagem convertida e de dois retidos próximo a região que contém o gene introgredido, confirmou a validade da análise de linhagens quase isogênicas mediante marcadores microssatélites. A eliminação dos marcadores falsos positivos dentre os cinco locos identificados pela análise de LQIs foi efetuada pela análise dos segregantes agrupados - ASA (Michelmore et al.,1991), após a fenotipagem de 138 indivíduos segregantes da população [(L30HtHt x L40htht x L40htht]. Indivíduos pertencentes aos grupos extremos de resistência e suscetibilidade foram genotipados para cada um dos cinco marcadores positivos (BNGL198, MAG01F03, PHI113, MACE01A03 e MACT02E01). O padrão de bandeamento de BNGL198 e MAG01F03, ambos localizados no braço longo do cromossomo 2 (“bin” 2.08), indicaram ligação putativa ao gene Ht sob análise. A confirmação da suposta ligação entre esse gene e os dois marcadores, bem como as distâncias genéticas correspondentes foram estimadas com base na análise de segregação dos indivíduos extremos da classe recessiva (Zhang et al., 1994) da mesma população [(L30HtHt x L40htht) x L40htht] e mostrou que o loco Ht está a cerca de 28,77 cM e 23,50 cM de BNGL198 e MAG01F03, respectivamente. Testes envolvendo a inoculação de cinco isolados brasileiros de E.turcicum sobre um conjunto de linhagens isogênicas portadoras de diferentes genes de resistência a helminthosporiose, permitiram verificar que o gene Ht, aqui designado HtP, é um novo gene ou uma forma alélica alternativa do já descrito gene Ht1. HtP confere resistência às raças portadoras de amplo espectro de virulência (123 e 23r) e, portanto, recomenda-se a introgressão em cultivares híbridas e variedades comerciais de milho nacionais.