Imobilização de calicreína para aplicação na triagem de ligantes

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Rocha, Camila Loreta
Data de Publicação: 2023
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-14112023-171056/
Resumo: Neste estudo, um biorreator de calicreína de pâncreas de porco (KLK), imobilizada em partículas magnéticas (MP), foi desenvolvido como uma ferramenta altamente ativa, estável e útil para a triagem de ligantes, representando uma abordagem inédita. Este biorreator, denominado IMER-KLK-MP, foi então aplicado no ensaio de pesca de ligantes, possibilitando a identificação de ligantes presentes em matrizes de origem natural e em uma coleção de compostos sintetizados como híbridos multifuncionais direcionados a múltiplos alvos, denominados PQM, detectados de forma off-flow por cromatografia líquida de alta eficiência acoplada à espectrometria de massas (LC-MS). O IMER-KLK-MP foi utilizado também em ensaios de atividade na busca por moduladores enzimáticos. Dentre os compostos testados, dois apresentaram resultados significativos de inibição, com valores acima de 40%, sendo estes os compostos PQM-277 e PQM-219. Além disso, exploramos a imobilização da KLK em capilares de sílica fundida, resultando na obtenção de KLK-ICERs para serem estudados de forma on-flow por LC-MS, também representando uma inovação. Essas abordagens propiciam avanços significativos ao proporcionar ferramentas que podem ampliar a busca por ligantes com potencial para o desenvolvimento de terapias direcionadas às KLKs.
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