Controle da expressão gênica do transporte e metabolismo de fontes de nitrogênio em Aspergillus nidulans: influência da concentração de nitrito, do pH e da presença de citrato

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Pombeiro, Sandra Regina de Campos
Data de Publicação: 1991
Tipo de documento: Tese
Idioma: por
Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-25112022-180729/
Resumo: Este trabalho teve como objetivo o estudo da captação de nitrato e nitrito em Aspergillus nidulans. Os resultados obtidos sugerem a existência de pelo menos uma permease para nitrito e possivelmente duas permeases para nitrato. Além disto, estes sistemas de transporte requerem a indução pela presença dos substratos (nitrato ou nitrito) e são reprimidos (ou inibidos) por amônia. A hipótese do locus nihA estar envolvido no transporte de nitrito (Pombeiro et al., 1983) foi reforçada pois, linhagens portadoras desta mutação apresentaram um perfil cinético de captação de nitrito alterado em função da sua concentração externa. Esta alteração parece permitir uma maior captação de nitrito (quando presente em elevadas concentrações), o que explicaria o seu acúmulo intracelular a níveis tóxicos. A mutação chl14, que confere resistência e dependência parcial ao fungicida cloroneb, parece influenciar indiretamente o transporte de nitrito, corrigindo parcialmente os efeitos da mutação nihA. Um outro mutante (nihB) mostrou-se também sensível ao nitrito e incapaz de produzir conídios. Foi discutida a possibilidade desta mutação, identificada no grupo de ligação II, ocasionar o aparecimento de poros na membrana do mutante, o que permitiria a entrada passiva de nitrito quando em altas concentrações. O estudo dos mutantes inoB2 ctsA1 e yA2 inoB2 pacC14 parece indicar que alterações na estrutura da membrana podem afetar vários processos fisiológicos, particularmente ao nível do controle do transporte de compostos para o interior da célula. Um aspecto interessante é que dependendo do gene mutado, citrato pode ser um estimulador (para o pacC14) ou inbidor (para o ctsA1) do crescimento radial das linhagens mutantes. O gene melC, identificado inicialmente coma responsável pela morfologia alterada em determinadas fontes de nitrogênio, está envolvido na produção de pigmento, tipo melanina, que parece conferir às linhagens produtoras resistência à lise, desempenhando um papel importante no desenvolvimento do fungo em condições adversas.
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A hipótese do locus nihA estar envolvido no transporte de nitrito (Pombeiro et al., 1983) foi reforçada pois, linhagens portadoras desta mutação apresentaram um perfil cinético de captação de nitrito alterado em função da sua concentração externa. Esta alteração parece permitir uma maior captação de nitrito (quando presente em elevadas concentrações), o que explicaria o seu acúmulo intracelular a níveis tóxicos. A mutação chl14, que confere resistência e dependência parcial ao fungicida cloroneb, parece influenciar indiretamente o transporte de nitrito, corrigindo parcialmente os efeitos da mutação nihA. Um outro mutante (nihB) mostrou-se também sensível ao nitrito e incapaz de produzir conídios. Foi discutida a possibilidade desta mutação, identificada no grupo de ligação II, ocasionar o aparecimento de poros na membrana do mutante, o que permitiria a entrada passiva de nitrito quando em altas concentrações. O estudo dos mutantes inoB2 ctsA1 e yA2 inoB2 pacC14 parece indicar que alterações na estrutura da membrana podem afetar vários processos fisiológicos, particularmente ao nível do controle do transporte de compostos para o interior da célula. Um aspecto interessante é que dependendo do gene mutado, citrato pode ser um estimulador (para o pacC14) ou inbidor (para o ctsA1) do crescimento radial das linhagens mutantes. O gene melC, identificado inicialmente coma responsável pela morfologia alterada em determinadas fontes de nitrogênio, está envolvido na produção de pigmento, tipo melanina, que parece conferir às linhagens produtoras resistência à lise, desempenhando um papel importante no desenvolvimento do fungo em condições adversas.The objective of the present study was to investigate nitrate and nitrite uptake in Aspergillus nidulans. The results obtained suggest the existence of at least one permease for nitrite and possibly two permeases for nitrate. Furthermore , these transport systems require induction by the presence of the substrates (nitrate or nitrite) and are repressed (or inhibited) by ammonia. The hypothesis that the nihA locus is involved in nitrite transport (Pombeiro et al., 1983) was reinforced by the fact that strains carrying this mutation presented a kinetic pattern of nitrite uptake which was altered by externai nitrite concentration. This alteration seems to permit greater nitrite uptake (when nitrite is present in high concentrations), thus explaining its intracellular accumulation to toxic leveis. The chl14 mutation, which confers resistance to and partial dependence on the fungicide chloroneb, seems to affect nitrite transport, partially correcting the effects of the nihA mutation. Another mutant (nihB) also proved to be sensitive to nitrite and unable to produce conidia. We discuss the possibility of this mutation, identified in linkage group II, causes the appearance of pores in the mutant\'s membrane, a fact that would permit passive nitrite entry when nitrite is present in high concentrations. A study of mutants inoB2 ctsA1 and yA2 inoB2 pacC14 appeared to indicate that changes in membrane structure may affect several physiological process, especially at the level of control of transport of various compounds into the cell. An interesting feature is that, depending on the mutated gene, citrate may be a stimulador (for pacC14) or inhibitor (for ctsA1) of radial growth of the mutant strains. The melC gene, initially identified as being responsible for the altered morphology in certain nitrogen sources, is involved in the production of a melanin-type pigment which seems to confer resistance to lysis on producing strains, thus playing an important role in fungai development under advers conditions.Biblioteca Digitais de Teses e Dissertações da USPContel, Eucleia Primo BetioliPombeiro, Sandra Regina de Campos1991-05-31info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/doctoralThesisapplication/pdfhttps://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-25112022-180729/reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USPinstname:Universidade de São Paulo (USP)instacron:USPLiberar o conteúdo para acesso público.info:eu-repo/semantics/openAccesspor2022-11-25T20:45:04Zoai:teses.usp.br:tde-25112022-180729Biblioteca Digital de Teses e Dissertaçõeshttp://www.teses.usp.br/PUBhttp://www.teses.usp.br/cgi-bin/mtd2br.plvirginia@if.usp.br|| atendimento@aguia.usp.br||virginia@if.usp.bropendoar:27212022-11-25T20:45:04Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP - Universidade de São Paulo (USP)false
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