Caracterização do potencial citotóxico de oxisteróis como estratégia terapêutica

• Autor(a) principal: Fernandes, Lívia Rosa
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Tese
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/5/5167/tde-23012020-125050/
• topic: Apoptose; Apoptosis; Cell death; Cetocolesteróis; Drug resistance multiple; Espectrometria de massas; Glicoproteína P; Ketocholesterols; Leucemia mielogênica crônica BCR-ABL positiva; Leukemia myelogenous chronic BCR-ABL positive; Mass spectrometry; Morte celular; P-glycoprotein; Resistência a múltiplos medicamentos

Resistência a múltiplas drogas (MDR) é um fenômeno multifatorial que causa falha na quimioterapia em pacientes e é caracterizado pela resistência cruzada a uma ampla variedade de drogas com estrutura e mecanismos de atuação diferentes. A terapia contra câncer tradicionalmente utiliza a citotoxicidade como estratégia de tratamento, assumindo que a destruição das células do tumor aperfeiçoa o potencial de sobrevivência do paciente. 7-cetocolesterol (7KC) é um dos principais produtos da auto-oxidação do colesterol, através da adição de um radical cetona no carbono 7. Diversos trabalhos descreveram o potencial citotóxico do 7KC mas, até o momento, nenhum estudo caracterizou 7KC como agente quimiosensibilizador. No presente estudo, foi avaliado o efeito de 7KC na viabilidade celular e fenótipo MDR das linhagens celulares de leucemia mielóide crônica K562 e Lucena (uma linhagem celular resistente a múltiplas drogas induzida pela exposição continua a vincristina). Foi observado que 7KC pode causar redução da viabilidade celular em células K562 e também em células MDR Lucena, por meio de apoptose com exposição de fosfatidilserina, envolvimento das caspases 3/7 e 8 e despolarização da membrana mitocondrial. Ao mesmo tempo, 7KC pode reduzir o fenótipo MDR em linhagem Lucena com a diminuição da expressão de MDR1 e maior acúmulo intracelular de daunorubicina e rodamina 123. Além disso, a co-incubação das linhagens celulares em associação a quimioterápicos mostrou uma maior redução da viabilidade celular, em relação ao seu uso isolado. Com a análise por espectrometria de massas para quantificação de proteínas livres de marcadores do efeito de 7KC sobre a linhagem MDR Lucena foi possível identificar a alteração na expressão de proteínas relacionadas ao tRNA, fatores de elongamento, proteínas ribossomais, fosfatases proteicas, ATP sintases, enzimas Redox, proteínas \"Heat shock\", proteossomos, NEDDilação proteica, Stat3, MAPK 1, Anexina 1, histonas e ribonucleossoma