Caracterização da subunidade 4 (APC4) do Complexo Promotor da Anáfase em Arabidopsis thaliana

• Autor(a) principal: Rocha, Ingrid Andrade
• Data de Publicação: 2023
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
• Texto Completo: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11144/tde-07072023-170730/
• topic: Arabidopsis thaliana; Arabidopsis thaliana; Anaphase Promoting Complex; APC11; APC11; APC4; APC4; Complexo Promotor da Anáfase; Desenvolvimento Vegetal; Plant Development

O desenvolvimento vegetal é regulado por mecanismos moleculares conservados de divisão, diferenciação e expansão celular. A divisão celular garante a duplicação celular e manutenção da informação genética para as células filhas, e esse processo é realizado através de mudanças de fase mediadas por proteólise de substratos ubiquitinados, permitindo a progressão unidirecional do ciclo celular. A saída da mitose e a transição G2/M é alcançada através da E3 ubiquitina ligase, APC/C. O APC/C é composto por módulos específicos, incluindo o catalítico (APC2 e APC11), estrutural (subunidades TPR) e conector (APC4, APC5 e APC1). Esse estudo investigou o papel das subunidades 4 (APC4) e 11 (APC11) no crescimento e desenvolvimento de Arabidopsis thaliana, através da geração de plantas de superexpressão do APC4, controlada pelo promotor constitutivo CaMV 35S, e de mutantes com redução da expressão do APC11. Nossos resultados mostraram que a superexpressão do gene APC4 pode ter um efeito positivo no desenvolvimento de Arabidopsis, como aumento no tamanho dos cotilédones e primórdios foliares. Além disso, a linhagem APC4OE364 apresentou aumento significativo na área foliar e no comprimento da raiz principal. O perfil de expressão dos genes marcadores do ciclo celular em plantas APC4OE mostraram níveis elevados do mRNA de CYCD3;1, sugerindo uma possível influência do APC4 no controle dos níveis de ciclinas da fase S. No entanto, não observamos diferença na degradação da proteína reguladora da transição G2/M, CYCB1;1. Mutantes APC11 knockdown apresentaram redução significativa de seus níveis de mRNA, e alteração no padrão de expressão dos genes marcadores da transição G2/M ao longo do desenvolvimento. Além disso, exibiram raízes menores devido a uma redução no meristema radicular, e aumento na densidade de raízes laterais. Além disso, observamos a presença de grânulos de amido na camada celular abaixo do CQ (Centro Quiescente), indicando prematura diferenciação de células da columela.