Ensaios com primers de ISSR e PCR para estudo da variabilidade genética de Tetragonisca angustula (Latreille, 1811) (Hymenoptera, Apidae, Meliponinae) na região de Campo Mourão - Paraná

• Autor(a) principal: Oliveira, Thainá Dal Pozzo de
• Data de Publicação: 2015
• Tipo de documento: Trabalho de conclusão de curso
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da UTFPR (da Universidade Tecnológica Federal do Paraná (RIUT))
• Texto Completo: http://repositorio.utfpr.edu.br/jspui/handle/1/6948
• topic: CNPQ::CIENCIAS BIOLOGICAS::BIOQUIMICA::BIOLOGIA MOLECULAR; Marcadores genéticos; Abelha; Genética - Pesquisa; Biologia molecular; Genetic markers; Bees; Genetics - Research; Molecular biology

As abelhas pertencentes à tribo Meliponini ocupam as regiões tropicais e subtropicais do planeta, abrangendo cerca de 60 gêneros. Seu importante papel é o serviço de polinização, sendo consideradas a peça chave na manutenção de ecossistemas. Tetragonisca angustula é um meliponíneo que distribui-se em praticamente toda a América Latina, adapta-se bem a diferentes substratos para nidificação, aceita manejo pelo homem e produz mel de sabor muito apreciado. Visto a importância desses organismos, os mesmos devem ser conservados, a fim de evitar a endogamia e possível extinção, permitindo com que mantenham assim o maior potencial evolutivo possível. Para tal, a genética torna-se uma aliada, a fim de determinar o grau de diferenciação genética entre eles. O presente estudo teve como objetivo a análise dessa variabilidade em Tetragonisca angustula por meio de marcadores moleculares ISSR. As abelhas foram coletadas nos municípios paranaenses de Iretama e Campo Mourão. Foi analisada uma operária por colônia, em 12 diferentes colônias. Após as coletas, as amostras foram posteriormente submetidas às etapas laboratoriais de Extração de DNA, PCR e eletroforese em gel de agarose. Após estes procedimentos, não foram evidenciadas bandas de DNA migradas no gel de agarose. Portanto, devido a este resultado, 11 diferentes primers ISSR foram testados a fim de encontrar sequências e temperaturas ideais de anelamento para a reação de amplificação do mesmo, e assim visualizar as bandas de DNA, para posteriormente analisar o grau de diferenciação genética desses indivíduos. Para tanto, nenhum dos primers testados responderam de forma esperada, ainda não sendo visualizados quaisquer fragmentos de material genético. Assim, pode-se inferir sobre a não funcionalidade dos primers ISSR utilizados neste trabalho para a espécie em questão e para as temperaturas adotadas para a reação de PCR. Nesse sentido, este trabalho foi adaptado para seleção e otimização das técnicas metodológicas adotadas para o estudo do grau de diferenciação genética dos indivíduos citados, mantendo o foco da importância do estudo genético em populações naturais como biondicadores de fragmentação florestal.