Avaliação da atividade inflamatória da saliva de L. longipalpis utilizando o modelo do bolsão inflamatório

Detalhes bibliográficos
Autor(a) principal: Teixeira, Clarissa Romero
Data de Publicação: 2006
Tipo de documento: Dissertação
Idioma: por
Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/34508
Resumo: As leishmanioses são causadas por parasitas do gênero Leishmania, importantes parasitas intracelulares de macrófagos que se manifestam em formas clínicas diferentes. A resposta imune celular é a resposta protetora efetiva contra parasitas intracelulares. Já foi demonstrado que algumas lectinas de plantas foram capazes de induzir a produção, por células mononucleares murinas, de óxido nítrico (NO), interferon gama (IFN-y) e IL-12, moléculas importantes em uma resposta celular. No presente trabalho nós investigamos o potencial imunoestimulatório de três lectinas vegetais e avaliamos a possibilidade de utilizá-Ias como adjuvantes em um modelo de vacinação contra leishmnaniose cutânea experimental. Para avaliar o potencial estimulatório das lectinas, células esplênicas murinas e CMSP humanas foram estimuladas em cultura com as lectinas Canavalia brasiliensis (ConBr), Pisum arvense (PAA) ou Artocarpus integrifolia (KM(+)) e os sobrenadantes coletados para determinação da produção de IFN-y, IL-10 e IL-4. Todas as lectinas foram capazes de induzir a secreção de IFN-y e uma pequena quantidade de IL-4 por células esplênicas murinas e IFN-y, IL-10 e IL-4 por CMSP humanas. Para avaliação do potencial adjuvante, camundongos C57BU6 e BALB/c foram imunizados com as lectinas ConBr, PAA ou KM(+) com o antígeno solúvel de Leishmania amazonensis (SLA) ou com o antígeno ou lectinas isoladamente. Antes do desafio com Leishmania amazonensis BA 125, os soros dos animais imunizados foram coletados para determinação de IgG anti-Leishmania. A avaliação da infecção foi monitorada semanalmente pela medida da pata infectada. Apenas os animais imunizados com a lectina PAA e PAA+SLA produziram altos títulos de IgG anti-Leishmania. A resposta celular foi avaliada por uma reação de hipersensibilidade tardia (DTH), realizada dez semanas após o desafio. Não foi possível relacionar a resposta de DTH a um perfil de resistência. Apenas os animais imunizados com a lectina KM(+) foram protegidos parcialmente contra posterior infecção. Apesar das lectinas ConBr, PAA and KM(+) terem demonstrado estimular a secreção de moléculas capazes de direcionar uma resposta imune celular, nossos resultados sugerem que as lectinas testadas não possuem atividade adjuvante na vacinação contra Leishmania amazonensis.
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Já foi demonstrado que algumas lectinas de plantas foram capazes de induzir a produção, por células mononucleares murinas, de óxido nítrico (NO), interferon gama (IFN-y) e IL-12, moléculas importantes em uma resposta celular. No presente trabalho nós investigamos o potencial imunoestimulatório de três lectinas vegetais e avaliamos a possibilidade de utilizá-Ias como adjuvantes em um modelo de vacinação contra leishmnaniose cutânea experimental. Para avaliar o potencial estimulatório das lectinas, células esplênicas murinas e CMSP humanas foram estimuladas em cultura com as lectinas Canavalia brasiliensis (ConBr), Pisum arvense (PAA) ou Artocarpus integrifolia (KM(+)) e os sobrenadantes coletados para determinação da produção de IFN-y, IL-10 e IL-4. Todas as lectinas foram capazes de induzir a secreção de IFN-y e uma pequena quantidade de IL-4 por células esplênicas murinas e IFN-y, IL-10 e IL-4 por CMSP humanas. 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Apesar das lectinas ConBr, PAA and KM(+) terem demonstrado estimular a secreção de moléculas capazes de direcionar uma resposta imune celular, nossos resultados sugerem que as lectinas testadas não possuem atividade adjuvante na vacinação contra Leishmania amazonensis.Saliva of blood feeding arthropods contains a great variety of hemostatic, inflammatory and immunomodulatory molecules and has been incriminated in facilitating the establishment of the parasite in their host. We report on the leukocyte chemoattractive effect of salivary gland homogenate (SGH) from Lutzomyia longipalpis using an air pouch model in BALB/c and C57BL/6 mice. We were able to observe a different kinetics of cell recruitment between the two mouse strains. While SGH induced a significant increase in macrophage and eosinophil influx in BALB/c mice after twelve hours, only neutrophils were observed in the C57BL/6 exudate. Analyzing the expression of chemokines responsible for this differentiated effect, we observed an increased expression of CCL2/MCP-1 in BALB/c but not in C57BL/6 mice. In fact, treatment with Bindarit, an inhibitor of CCL2/MCP-1 synthesis, and also with a specific anti-MCP-1 mAb resulted in a drastic reduction of macrophage recruitment and inhibition of CCL2/MCP-1 expression in the lining tissue. CCL2/MCP-1 production was also seen in vitro when J774 murine macrophages were exposed to SGH. The SGH effect was abrogated by pre-incubation with serum containing anti-SGH IgG antibodies as well as in mice previously sensitized with L. longipalpis bites. To investigate which salivary molecules were responsible for this effect, we stimulated the air pouch using cDNA constructions and protein recombinants from L. longipalpis saliva. We observed that the 1 IkDa recombinat and its cDNA, induced an early inflamatory response, while recombinants and cDNA from the yellow family and 6IkDa protein induced a late response. The combination SGH with L. chagasi resulted in na aditive effect on leukocyte recruitment when compared to L. chagasi alone in both mouse strains. SGH also modified CCL2/MCP-1, CCL4/MIP-lp, CCLl 1/eotaxin and CXCLl/KC expression induced by the parasite in both mouse strains. These results suggest that L. longipalpis saliva plays an important role in modulating host’s inflammatory response induced by the parasite recruiting more inflammatory cells to the site of inoculation.CAPES, CNPq e FIOCRUZ.Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil.porCentro de Pesquisas Gonçalo MonizFlebótomoSalivaVacinas contra LeishmaniaAdjuvantes ImunológicosInflamaçãoQuimiocinasSand flyLeishmaniaisInflammationChemokinesAvaliação da atividade inflamatória da saliva de L. longipalpis utilizando o modelo do bolsão inflamatórioinfo:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesis2006Coordenação de EnsinoUniversidade Federal da Bahia. Centro de Pesquisas Gonçalo MonizMestrado AcadêmicoSalvador/BAPós-Graduação em Patologiainfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)instname:Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)instacron:FIOCRUZLICENSElicense.txttext/plain1748https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/34508/1/license.txt8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33MD51ORIGINALClarissa Romero Teixeira Avaliação ... 2006.pdfClarissa Romero Teixeira Avaliação ... 2006.pdfapplication/pdf78834713https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/34508/2/Clarissa%20Romero%20Teixeira%20Avalia%c3%a7%c3%a3o%20...%202006.pdfe202c390a0f3886f50af335204c0a67cMD52TEXTClarissa Romero Teixeira Avaliação ... 2006.pdf.txtClarissa Romero Teixeira Avaliação ... 2006.pdf.txtExtracted texttext/plain432475https://www.arca.fiocruz.br/bitstream/icict/34508/3/Clarissa%20Romero%20Teixeira%20Avalia%c3%a7%c3%a3o%20...%202006.pdf.txt25091ec72a5a1fbb0bc9bc139e6df43fMD53icict/345082019-07-31 02:02:27.35oai:www.arca.fiocruz.br:icict/34508Tk9URTogUExBQ0UgWU9VUiBPV04gTElDRU5TRSBIRVJFClRoaXMgc2FtcGxlIGxpY2Vuc2UgaXMgcHJvdmlkZWQgZm9yIGluZm9ybWF0aW9uYWwgcHVycG9zZXMgb25seS4KCk5PTi1FWENMVVNJVkUgRElTVFJJQlVUSU9OIExJQ0VOU0UKCkJ5IHNpZ25pbmcgYW5kIHN1Ym1pdHRpbmcgdGhpcyBsaWNlbnNlLCB5b3UgKHRoZSBhdXRob3Iocykgb3IgY29weXJpZ2h0Cm93bmVyKSBncmFudHMgdG8gRFNwYWNlIFVuaXZlcnNpdHkgKERTVSkgdGhlIG5vbi1leGNsdXNpdmUgcmlnaHQgdG8gcmVwcm9kdWNlLAp0cmFuc2xhdGUgKGFzIGRlZmluZWQgYmVsb3cpLCBhbmQvb3IgZGlzdHJpYnV0ZSB5b3VyIHN1Ym1pc3Npb24gKGluY2x1ZGluZwp0aGUgYWJzdHJhY3QpIHdvcmxkd2lkZSBpbiBwcmludCBhbmQgZWxlY3Ryb25pYyBmb3JtYXQgYW5kIGluIGFueSBtZWRpdW0sCmluY2x1ZGluZyBidXQgbm90IGxpbWl0ZWQgdG8gYXVkaW8gb3IgdmlkZW8uCgpZb3UgYWdyZWUgdGhhdCBEU1UgbWF5LCB3aXRob3V0IGNoYW5naW5nIHRoZSBjb250ZW50LCB0cmFuc2xhdGUgdGhlCnN1Ym1pc3Npb24gdG8gYW55IG1lZGl1bSBvciBmb3JtYXQgZm9yIHRoZSBwdXJwb3NlIG9mIHByZXNlcnZhdGlvbi4KCllvdSBhbHNvIGFncmVlIHRoYXQgRFNVIG1heSBrZWVwIG1vcmUgdGhhbiBvbmUgY29weSBvZiB0aGlzIHN1Ym1pc3Npb24gZm9yCnB1cnBvc2VzIG9mIHNlY3VyaXR5LCBiYWNrLXVwIGFuZCBwcmVzZXJ2YXRpb24uCgpZb3UgcmVwcmVzZW50IHRoYXQgdGhlIHN1Ym1pc3Npb24gaXMgeW91ciBvcmlnaW5hbCB3b3JrLCBhbmQgdGhhdCB5b3UgaGF2ZQp0aGUgcmlnaHQgdG8gZ3JhbnQgdGhlIHJpZ2h0cyBjb250YWluZWQgaW4gdGhpcyBsaWNlbnNlLiBZb3UgYWxzbyByZXByZXNlbnQKdGhhdCB5b3VyIHN1Ym1pc3Npb24gZG9lcyBub3QsIHRvIHRoZSBiZXN0IG9mIHlvdXIga25vd2xlZGdlLCBpbmZyaW5nZSB1cG9uCmFueW9uZSdzIGNvcHlyaWdodC4KCklmIHRoZSBzdWJtaXNzaW9uIGNvbnRhaW5zIG1hdGVyaWFsIGZvciB3aGljaCB5b3UgZG8gbm90IGhvbGQgY29weXJpZ2h0LAp5b3UgcmVwcmVzZW50IHRoYXQgeW91IGhhdmUgb2J0YWluZWQgdGhlIHVucmVzdHJpY3RlZCBwZXJtaXNzaW9uIG9mIHRoZQpjb3B5cmlnaHQgb3duZXIgdG8gZ3JhbnQgRFNVIHRoZSByaWdodHMgcmVxdWlyZWQgYnkgdGhpcyBsaWNlbnNlLCBhbmQgdGhhdApzdWNoIHRoaXJkLXBhcnR5IG93bmVkIG1hdGVyaWFsIGlzIGNsZWFybHkgaWRlbnRpZmllZCBhbmQgYWNrbm93bGVkZ2VkCndpdGhpbiB0aGUgdGV4dCBvciBjb250ZW50IG9mIHRoZSBzdWJtaXNzaW9uLgoKSUYgVEhFIFNVQk1JU1NJT04gSVMgQkFTRUQgVVBPTiBXT1JLIFRIQVQgSEFTIEJFRU4gU1BPTlNPUkVEIE9SIFNVUFBPUlRFRApCWSBBTiBBR0VOQ1kgT1IgT1JHQU5JWkFUSU9OIE9USEVSIFRIQU4gRFNVLCBZT1UgUkVQUkVTRU5UIFRIQVQgWU9VIEhBVkUKRlVMRklMTEVEIEFOWSBSSUdIVCBPRiBSRVZJRVcgT1IgT1RIRVIgT0JMSUdBVElPTlMgUkVRVUlSRUQgQlkgU1VDSApDT05UUkFDVCBPUiBBR1JFRU1FTlQuCgpEU1Ugd2lsbCBjbGVhcmx5IGlkZW50aWZ5IHlvdXIgbmFtZShzKSBhcyB0aGUgYXV0aG9yKHMpIG9yIG93bmVyKHMpIG9mIHRoZQpzdWJtaXNzaW9uLCBhbmQgd2lsbCBub3QgbWFrZSBhbnkgYWx0ZXJhdGlvbiwgb3RoZXIgdGhhbiBhcyBhbGxvd2VkIGJ5IHRoaXMKbGljZW5zZSwgdG8geW91ciBzdWJtaXNzaW9uLgo=Repositório InstitucionalPUBhttps://www.arca.fiocruz.br/oai/requestrepositorio.arca@fiocruz.bropendoar:21352019-07-31T05:02:27Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA) - Fundação Oswaldo Cruz (FIOCRUZ)false
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