PO41, uma anti-hemorragina presente no soro de Philander opossum: isolamento, caracterização e interação com metaloproteases isoladas do veneno de Bothrops jararaca

• Autor(a) principal: Jurgilas, Patrícia Barbosa
• Data de Publicação: 2000
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Institucional da FIOCRUZ (ARCA)
• Texto Completo: https://www.arca.fiocruz.br/handle/icict/36079
• topic: Marsupiais; Metaloproteases; Bothrops; Imunidade inata

Em 1994, Perales e colaboradores isolaram e caracterizaram parcialmente frações antibotrópicas (FAB) do soro de vários marsupiais brasileiros, dentre eles o Didelphis marsupialis (DM) e o Philander opossum (PO). No presente trabalho, objetivamos isolar e caracterizar o fator antihemorrágico de PO. Além disto, para o estudo da capacidade inibitória deste fator sobre metaloproteases, desenvolvemos uma nova metodologia de isolamento destas enzimas, jararagina e botrolisina, a partir do veneno de Bothrops jararaca (BJ). A proteína antihemorrágica isolada foi denominada de PO41, pois apresentou 41,330 u.m.a. por MALDI-TOF. Por filtração em gel verificamos que esta proteína possuía massa molecular de 61,5 kDa e apresentou identidade nos 27 resíduos N-terminais com dois inibidores isolados do soro de DM, DM40 e DM43. Por imunotransferência, obtivemos padrões de mobilidade idênticos quando revelamos PO41 e DM43, com anticorpo policlonal preparado contra a fração antibotrópica de DM. Por focalização isoelétrica estimamos para PO41 ponto isoelétrico abaixo de 3,5. PO41 foi capaz de formar complexos não-covalentes com as enzimas isoladas do veneno de BJ. As atividades proteolíticas e hemorrágicas destas enzimas também foram inibidas por PO41. Nossos resultados sugerem que PO41 é um inibidor de metaloproteases de venenos de serpentes e possui propriedades físico-químicas, estruturais, de imunorreatividade e biológicas similares às dos inibidores pertencentes a superfamília gênica das imunoglobulinas.