Isolamento e caracteriza????o da crotoxina s??mile do veneno de Crotalus vegrandis com atividade antitumoral

• Autor(a) principal: NISHIMURA, PAULA J.
• Data de Publicação: 2016
• Tipo de documento: Dissertação
• Título da fonte: Repositório Institucional do IPEN
• Texto Completo: http://repositorio.ipen.br/handle/123456789/26613
• topic: therapy; high-performance liquid chromatography; tumor cells; melanomas; neoplasms; venoms; snakes; toxins; acid proteinases; hydroxy compounds; glycerol; antipyretics

Diversos estudos de serpentes t??m mostrado que algumas subst??ncias componentes de seus venenos possuem efici??ncia na atividade antitumoral nos ensaios realizados em laborat??rio em c??lulas in vitro e in vivo. O veneno da cascavel Crotalus vegrandis possuem atividades neurotoxica, miotoxica e hemorr??gica. A crotoxina simile ?? um importante componente desse veneno sendo formada por uma prote??na que possui uma unidade ??cida (Crotapotina) ligada a uma subunidade b??sica (PLA2). Devido ao fato de existirem poucos estudos relativos ao veneno de Crotalus vegrandis, torna-se necess??rio o isolamento e a caracteriza????o de suas biomol??culas e uma maior investiga????o do seu potencial e sua efic??cia como agente terap??utico contra c??lulas tumorais. No presente trabalho, foi realizado o isolamento e a caracteriza????o da crotoxina simile de Crotalus vegrandis, bem como seu efeito citot??xico em c??lulas L929 e B16F10. Realizou-se o cultivo dessas c??lulas em placas com 96 po??os, para, ent??o, serem colocadas em contato direto com diferentes fra????es do veneno purificado de Crotalus vegrandis por um tempo total de 48 horas. Para efeitos de compara????o realizou-se o mesmo ensaio com fra????es do veneno purificado da cascavel brasileira Crotalus durissus terrificus. Para a avalia????o da viabilidade celular o tratamento com as fra????es do veneno purificado de Crotalus vegrandis e Crotalus durissus terrificus, realizou-se os ensaios com MTT. Os resultados mostraram uma atividade de grande toxicidade para ambos os venenos em c??lulas tumorais B16F10 e pouca toxicidade para as c??lulas normais L929. Ainda nos ensaios comparativos com os dois venenos, verificou-se que, para uma dada concentra????o, as fra????es do veneno de Crotalus vegrandis possuem uma maior efici??ncia que qualquer concentra????o do veneno de Crotalus durissus terrificus, havendo uma maior especificidade para as c??lulas B16F10. A crotoxina s??mile isolada do veneno de Crotalus vegrandis apresentou atividade citot??xica mais preponderante na linhagem celular tumoral B16F10, ap??s 48 horas concentra????es de 250 e 125 ug/mL.