Antiproliferative and antioxidant role of selected flavonoids: a cellular approach

• Autor(a) principal: Durães, Tiago José Monteiro
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10348/9642
• topic: Bioquímica; flavonoides

Os flavonoides são uma classe de fitoquímicos extremamente importante, quer pela sua ubiquidade no reino Plantae, quer pela enorme presença que têm no dia-a-dia da vida humana, através da dieta e medicina (seja pelo seu uso na indústria farmacêutica ou na medicina tradicional). Nas plantas, desempenham várias funções, uma delas como mecanismo de defesa. Ao longo dos anos, o interesse por esta classe de compostos tem aumentado, sendo explorados os seus possíveis efeitos biológicos no organismo humano. No entanto, a enorme diversidade de compostos e interações com o organismo têm provado que tais estudos podem ser extremamente complexos e que ainda existe um grande caminho a percorrer para clarificar quais atividades biológicas realmente ocorrem, e quais os mecanismos subjacentes. Neste estudo vamos avaliar a atividade anti-proliferativa, antioxidante e antiinflamatória de três flavonoides, eriodictiol, kaempferol e quercetina. Através do método de Alamar Blue avaliámos a viabilidade celular (nas linhas celulares HaCaT, Caco-2, HepG2 e RAW 264.7) após exposição aos compostos a várias concentrações por 24 ou 48 horas. De um modo geral, os compostos induziram redução de viabilidade celular proporcional ao aumento de concentração e tempo de exposição; no entanto, raramente se atingiram valores menores que 50% de viabilidade, com concentrações até 25 µM a causar pouco ou nenhum impacto, 100 µM a provocar as maiores reduções e 50 µM a variar entre os dois comportamentos. Relativamente à capacidade antioxidante, foi avaliada a capacidade de os compostos atuarem como radical scavengers contra os radicais ABTS•+ e •OH onde demonstraram um aumento de capacidade com a concentração. Através de citometria de fluxo, avaliámos o nível de espécies reativas de oxigénio (ROS) intracelular, de glutationa (GSH) e de peroxidação lipídica, assim como o potencial de membrana mitocondrial em células HepG2, após exposição, por 24 h, com 25, 50 e 100 µM dos compostos. Não se registou redução de potencial de membrana mitocondrial ou peroxidação lipídica. Os níveis de GSH revelaram aumento proporcional à concentração; simultaneamente, os compostos eriodictiol e quercetina induziram ligeiros aumentos nos níveis intracelulares de ROS, no entanto apenas significativo para 100 µM de quercetina; enquanto o kaempferol induziu ligeira diminuição de ROS a 25 e 50 µM, porém a 100 µM registou ligeiro aumento semelhante aos restantes flavonoides testados. O índice de stresse oxidativo calculado sugere que os compostos possam ter um efeito maioritariamente antioxidante, apesar de ligeiros aumentos de ROS. A atividade anti-inflamatória foi avaliada através de dois ensaios: no primeiro, onde se testou a capacidade de os compostos atuarem como scavengers de radicais perante o NO• , verificando-se que os compostos exibiram uma resposta proporcional ao aumento da concentração de composto, semelhante aos ensaios com os radicais ABTS•+ e •OH; no segundo, utilizando a linha celular RAW 264.7, onde se verificou que os compostos inibiriam parcialmente a quantidade de NO no sobrenadante, após estimulação das células com LPS. Após análise dos resultados, os compostos testados revelarem ter capacidade antioxidante e anti-inflamatória apresentando de modo geral baixa cito-toxicidade.