Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixes
Autor(a) principal: | |
---|---|
Data de Publicação: | 2016 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | eng |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10773/21244 |
Resumo: | Os anticorpos, mono e policlonais, têm sido alvo de estudo intenso pelas indústrias farmacêuticas e biotecnológicas, resultando num extraordinário crescimento do mercado de produção de anticorpos. Este crescente interesse deve-se principalmente às vantagens que estas biomoléculas compreendem, tais como a sua aplicação terapêutica e a sua incorporação numa vasta variedade de técnicas de quantificação. A imunoglobulina G (IgG) é um dos anticorpos já aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) que oferece uma grande variedade de aplicações em diversas áreas e, portanto, reconhecida como uma proteína de valor acrescentado. Apesar da vasta oferta de técnicas de purificação de anticorpos, ainda existem grandes desvantagens associadas à sua purificação. As técnicas atualmente utilizadas centram-se em técnicas cromatográficas, as quais envolvem materiais dispendiosos e longos períodos de operação, sendo responsáveis por 50-80% dos custos totais do produto. Copulativamente, estas técnicas apresentam grandes limitações relativamente à escalabilidade do processo. Como alternativa, este trabalho foca-se na aplicação de sistemas micelares de duas fases aquosas convencionais e mistos, utilizando líquidos iónicos com carácter tensioativo, como uma técnica de purificação não cromatográfica para a extração e purificação de IgG a partir de soro de coelho. Foram otimizados alguns parâmetros associados ao processo de purificação, tais como a concentração de surfactante, a presença/ ausência de líquidos iónicos como co-surfactantes, o efeito da sua concentração e as suas características estruturais. Após o estudo de otimização, os sistemas convencionais foram confinados a uma percentagem de 10% de Triton X-114 a pH 7, alcançando purezas de IgG de 24,6%. Com a aplicação de sistemas micelares mistos de duas fases aquosas compostos por líquidos iónicos obtiveram-se ainda melhores fatores de purificação. Os sistemas que conduziram a melhores purezas foram os sistemas com adição de [C16mim]Cl a 0,7 wt%, [P4,4,4,14]Cl a 1,0 wt% e [P6,6,6,14]Br a 0,7wt%, obtendo-se purezas de IgG de 26,3%, 28,1% e 29,2%, respectivamente. Estes resultados de pureza são superiores aos reportados na literatura relativamente à purificação de IgG a partir do soro do coelho utilizando sistemas de duas fases aquosas, confirmando o potencial desta técnica na extração e purificação de anticorpos ou outros produtos de valor acrescentado de matrizes complexas. |
id |
RCAP_1ffe3f829aa9f1fc03558a99214acffe |
---|---|
oai_identifier_str |
oai:ria.ua.pt:10773/21244 |
network_acronym_str |
RCAP |
network_name_str |
Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
repository_id_str |
7160 |
spelling |
Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixesBiotecnologia molecularSoluções iónicasImunoglobulinasClonagem molecularOs anticorpos, mono e policlonais, têm sido alvo de estudo intenso pelas indústrias farmacêuticas e biotecnológicas, resultando num extraordinário crescimento do mercado de produção de anticorpos. Este crescente interesse deve-se principalmente às vantagens que estas biomoléculas compreendem, tais como a sua aplicação terapêutica e a sua incorporação numa vasta variedade de técnicas de quantificação. A imunoglobulina G (IgG) é um dos anticorpos já aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) que oferece uma grande variedade de aplicações em diversas áreas e, portanto, reconhecida como uma proteína de valor acrescentado. Apesar da vasta oferta de técnicas de purificação de anticorpos, ainda existem grandes desvantagens associadas à sua purificação. As técnicas atualmente utilizadas centram-se em técnicas cromatográficas, as quais envolvem materiais dispendiosos e longos períodos de operação, sendo responsáveis por 50-80% dos custos totais do produto. Copulativamente, estas técnicas apresentam grandes limitações relativamente à escalabilidade do processo. Como alternativa, este trabalho foca-se na aplicação de sistemas micelares de duas fases aquosas convencionais e mistos, utilizando líquidos iónicos com carácter tensioativo, como uma técnica de purificação não cromatográfica para a extração e purificação de IgG a partir de soro de coelho. Foram otimizados alguns parâmetros associados ao processo de purificação, tais como a concentração de surfactante, a presença/ ausência de líquidos iónicos como co-surfactantes, o efeito da sua concentração e as suas características estruturais. Após o estudo de otimização, os sistemas convencionais foram confinados a uma percentagem de 10% de Triton X-114 a pH 7, alcançando purezas de IgG de 24,6%. Com a aplicação de sistemas micelares mistos de duas fases aquosas compostos por líquidos iónicos obtiveram-se ainda melhores fatores de purificação. Os sistemas que conduziram a melhores purezas foram os sistemas com adição de [C16mim]Cl a 0,7 wt%, [P4,4,4,14]Cl a 1,0 wt% e [P6,6,6,14]Br a 0,7wt%, obtendo-se purezas de IgG de 26,3%, 28,1% e 29,2%, respectivamente. Estes resultados de pureza são superiores aos reportados na literatura relativamente à purificação de IgG a partir do soro do coelho utilizando sistemas de duas fases aquosas, confirmando o potencial desta técnica na extração e purificação de anticorpos ou outros produtos de valor acrescentado de matrizes complexas.Os anticorpos, mono e policlonais, têm sido alvo de estudo intenso pelas indústrias farmacêuticas e biotecnológicas, resultando num extraordinário crescimento do mercado de produção de anticorpos. Este crescente interesse deve-se principalmente às vantagens que estas biomoléculas compreendem, tais como a sua aplicação terapêutica e a sua incorporação numa vasta variedade de técnicas de quantificação. A imunoglobulina G (IgG) é um dos anticorpos já aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) que oferece uma grande variedade de aplicações em diversas áreas e, portanto, reconhecida como uma proteína de valor acrescentado. Apesar da vasta oferta de técnicas de purificação de anticorpos, ainda existem grandes desvantagens associadas à sua purificação. As técnicas atualmente utilizadas centram-se em técnicas cromatográficas, as quais envolvem materiais dispendiosos e longos períodos de operação, sendo responsáveis por 50-80% dos custos totais do produto. Copulativamente, estas técnicas apresentam grandes limitações relativamente à escalabilidade do processo. Como alternativa, este trabalho foca-se na aplicação de sistemas micelares de duas fases aquosas convencionais e mistos, utilizando líquidos iónicos com carácter tensioativo, como uma técnica de purificação não cromatográfica para a extração e purificação de IgG a partir de soro de coelho. Foram otimizados alguns parâmetros associados ao processo de purificação, tais como a concentração de surfactante, a presença/ ausência de líquidos iónicos como co-surfactantes, o efeito da sua concentração e as suas características estruturais. Após o estudo de otimização, os sistemas convencionais foram confinados a uma percentagem de 10% de Triton X-114 a pH 7, alcançando purezas de IgG de 24,6%. Com a aplicação de sistemas micelares mistos de duas fases aquosas compostos por líquidos iónicos obtiveram-se ainda melhores fatores de purificação. Os sistemas que conduziram a melhores purezas foram os sistemas com adição de [C16mim]Cl a 0,7 wt%, [P4,4,4,14]Cl a 1,0 wt% e [P6,6,6,14]Br a 0,7wt%, obtendo-se purezas de IgG de 26,3%, 28,1% e 29,2%, respectivamente. Estes resultados de pureza são superiores aos reportados na literatura relativamente à purificação de IgG a partir do soro do coelho utilizando sistemas de duas fases aquosas, confirmando o potencial desta técnica na extração e purificação de anticorpos ou outros produtos de valor acrescentado de matrizes complexas.Universidade de Aveiro2021-12-05T00:00:00Z2016-12-12T00:00:00Z2016-12-12info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10773/21244TID:201933373engCosta, Sara Henriques da Silva einfo:eu-repo/semantics/embargoedAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-02-22T11:41:51Zoai:ria.ua.pt:10773/21244Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T02:55:46.952965Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
dc.title.none.fl_str_mv |
Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixes |
title |
Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixes |
spellingShingle |
Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixes Costa, Sara Henriques da Silva e Biotecnologia molecular Soluções iónicas Imunoglobulinas Clonagem molecular |
title_short |
Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixes |
title_full |
Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixes |
title_fullStr |
Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixes |
title_full_unstemmed |
Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixes |
title_sort |
Development of aqueous micellar two-phase systems for the selective extraction and purification of IgG from real matrixes |
author |
Costa, Sara Henriques da Silva e |
author_facet |
Costa, Sara Henriques da Silva e |
author_role |
author |
dc.contributor.author.fl_str_mv |
Costa, Sara Henriques da Silva e |
dc.subject.por.fl_str_mv |
Biotecnologia molecular Soluções iónicas Imunoglobulinas Clonagem molecular |
topic |
Biotecnologia molecular Soluções iónicas Imunoglobulinas Clonagem molecular |
description |
Os anticorpos, mono e policlonais, têm sido alvo de estudo intenso pelas indústrias farmacêuticas e biotecnológicas, resultando num extraordinário crescimento do mercado de produção de anticorpos. Este crescente interesse deve-se principalmente às vantagens que estas biomoléculas compreendem, tais como a sua aplicação terapêutica e a sua incorporação numa vasta variedade de técnicas de quantificação. A imunoglobulina G (IgG) é um dos anticorpos já aprovados pela Food and Drug Administration (FDA) que oferece uma grande variedade de aplicações em diversas áreas e, portanto, reconhecida como uma proteína de valor acrescentado. Apesar da vasta oferta de técnicas de purificação de anticorpos, ainda existem grandes desvantagens associadas à sua purificação. As técnicas atualmente utilizadas centram-se em técnicas cromatográficas, as quais envolvem materiais dispendiosos e longos períodos de operação, sendo responsáveis por 50-80% dos custos totais do produto. Copulativamente, estas técnicas apresentam grandes limitações relativamente à escalabilidade do processo. Como alternativa, este trabalho foca-se na aplicação de sistemas micelares de duas fases aquosas convencionais e mistos, utilizando líquidos iónicos com carácter tensioativo, como uma técnica de purificação não cromatográfica para a extração e purificação de IgG a partir de soro de coelho. Foram otimizados alguns parâmetros associados ao processo de purificação, tais como a concentração de surfactante, a presença/ ausência de líquidos iónicos como co-surfactantes, o efeito da sua concentração e as suas características estruturais. Após o estudo de otimização, os sistemas convencionais foram confinados a uma percentagem de 10% de Triton X-114 a pH 7, alcançando purezas de IgG de 24,6%. Com a aplicação de sistemas micelares mistos de duas fases aquosas compostos por líquidos iónicos obtiveram-se ainda melhores fatores de purificação. Os sistemas que conduziram a melhores purezas foram os sistemas com adição de [C16mim]Cl a 0,7 wt%, [P4,4,4,14]Cl a 1,0 wt% e [P6,6,6,14]Br a 0,7wt%, obtendo-se purezas de IgG de 26,3%, 28,1% e 29,2%, respectivamente. Estes resultados de pureza são superiores aos reportados na literatura relativamente à purificação de IgG a partir do soro do coelho utilizando sistemas de duas fases aquosas, confirmando o potencial desta técnica na extração e purificação de anticorpos ou outros produtos de valor acrescentado de matrizes complexas. |
publishDate |
2016 |
dc.date.none.fl_str_mv |
2016-12-12T00:00:00Z 2016-12-12 2021-12-05T00:00:00Z |
dc.type.status.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/publishedVersion |
dc.type.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/masterThesis |
format |
masterThesis |
status_str |
publishedVersion |
dc.identifier.uri.fl_str_mv |
http://hdl.handle.net/10773/21244 TID:201933373 |
url |
http://hdl.handle.net/10773/21244 |
identifier_str_mv |
TID:201933373 |
dc.language.iso.fl_str_mv |
eng |
language |
eng |
dc.rights.driver.fl_str_mv |
info:eu-repo/semantics/embargoedAccess |
eu_rights_str_mv |
embargoedAccess |
dc.format.none.fl_str_mv |
application/pdf |
dc.publisher.none.fl_str_mv |
Universidade de Aveiro |
publisher.none.fl_str_mv |
Universidade de Aveiro |
dc.source.none.fl_str_mv |
reponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação instacron:RCAAP |
instname_str |
Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação |
instacron_str |
RCAAP |
institution |
RCAAP |
reponame_str |
Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
collection |
Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
repository.name.fl_str_mv |
Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informação |
repository.mail.fl_str_mv |
|
_version_ |
1799137611359453184 |