Genetic characterization of NAD biosynthesis enzymes in human tumor cell lines

• Autor(a) principal: Correia, Mariana Isabel Gonçalves
• Data de Publicação: 2012
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: eng
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10773/10886
• topic: Biomedicina; Enzimas; Tumores; Genética molecular; Genética bioquímica

Nicotinamida Adenina Dinucleótido (NAD) é um importante cofator nas reações metabólicas, sendo um substrato para as enzimas consumidoras de NAD, como as PARPs e as Sirtuinas. A via de síntese do NAD processa-se pela via de novo, na qual o NAD é sintetizado através do triptofano e do aspartato, e a via de reciclagem, onde o NAD pode ser reciclado a partir de diferentes precursores. As células cancerígenas têm necessidades aumentadas de NAD, pelo que inibidores da nicotinamida fosforibosiltransferase (NAMPT), a enzima mais importante na via de reciclagem do NAD nos humanos, estão em testes clínicos como agentes terapêuticos para o cancro. Contudo, apesar de serem agentes promissores, apresentam alguma citotoxicidade que pode ser ultrapassada pela adição de ácido nicotínico (NA) que vai ativar o ácido nicotínico fosforibosiltransferase (NAPRT) como via alternativa de síntese do NAD. Contudo, existe pouca informação acerca dos padrões de expressão do NAPRT, apesar de que é um biomarcador para a utilização do ácido nicotínico no tratamento com inibidores do NAMPT. Assim, o grande objetivo deste trabalho é caracterizar as duas enzimas mais importantes da via de reciclagem do NAD, NAMPT e NAPRT, em linhas celulares tumorais humanas, integrando informação obtida através do ADN, ARN e proteína. Foram pesquisadas mutações e diferenças de expressão, sendo também feita a análise da estrutura 3D da proteína NAMPTlike, destacando três substituições de aminoácidos.