Flow cytometric of c-FLIPl-mediated regulation of cell cycle and cell population size
Autor(a) principal: | |
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Data de Publicação: | 2017 |
Tipo de documento: | Dissertação |
Idioma: | eng |
Título da fonte: | Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) |
Texto Completo: | http://hdl.handle.net/10773/22487 |
Resumo: | c-FLIP é uma proteína conhecida pela sua capacidade de se ligar ao DISC, onde compete com a procaspase-8 pela interação com FADD. No entanto, existem evidências que a sua isoforma longa consegue regular também o ciclo celular e mecanismos de proliferação. Para além disso, a atividade de c-FLIPL pode ser controlada por fosforilação. Assim, o objetivo deste estudo é perceber como a fosforilação no resíduo de serina 227 nesta proteína afeta a proliferação e ciclo celular. Neste estudo, observamos que a sobre-expressão de c-FLIPL com uma mutação de serina para alanina no resíduo 227 levou a uma diminuição da capacidade proliferativa dessas células. O uso de citometria de fluxo permitiu verificar este decréscimo na capacidade proliferativa, assim como uma acumulação de células na fase G1 do ciclo celular aquando da sobre-expressão de S227A c-FLIPL. Os resultados obtidos sugerem que a sobre-expressão de c-FLIPL controla a população celular através da transição G1/S, através da sua fosforilação no resíduo 227. No entanto, mais estudos são necessários para se perceber a partir de qual mecanismo esta transição é afetada |
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Flow cytometric of c-FLIPl-mediated regulation of cell cycle and cell population sizeBioquímica clínicaCitometria de fluxoProteínasCiclo celularFosforilaçãoc-FLIP é uma proteína conhecida pela sua capacidade de se ligar ao DISC, onde compete com a procaspase-8 pela interação com FADD. No entanto, existem evidências que a sua isoforma longa consegue regular também o ciclo celular e mecanismos de proliferação. Para além disso, a atividade de c-FLIPL pode ser controlada por fosforilação. Assim, o objetivo deste estudo é perceber como a fosforilação no resíduo de serina 227 nesta proteína afeta a proliferação e ciclo celular. Neste estudo, observamos que a sobre-expressão de c-FLIPL com uma mutação de serina para alanina no resíduo 227 levou a uma diminuição da capacidade proliferativa dessas células. O uso de citometria de fluxo permitiu verificar este decréscimo na capacidade proliferativa, assim como uma acumulação de células na fase G1 do ciclo celular aquando da sobre-expressão de S227A c-FLIPL. Os resultados obtidos sugerem que a sobre-expressão de c-FLIPL controla a população celular através da transição G1/S, através da sua fosforilação no resíduo 227. No entanto, mais estudos são necessários para se perceber a partir de qual mecanismo esta transição é afetadac-FLIP is a protein known for its capacity to bind to the DISC and compete with procaspase-8 for FADD interaction. However, published studies have shown that c-FLIPL can regulate cell cycle and proliferation. Similarly to many other proteins, c-FLIP can be regulated by phosphorylation. Therefore, the aim of this work was to understand how the phosphorylation of S227 residue on c-FLIPL affects cell cycle and cell proliferation. We observed that overexpression of phosphodeficient mutant c-FLIPL lead to a decrease in cell proliferation. Flow cytometric analysis confirmed this decrease, as well as an accumulation of cell at G1 phase of cell cycle, when overexpressing S227A c-FLIPL. Our results suggest that c-FLIPL overexpression controls cell population size by controlling the G1/S transition, via its phosphorylation. Nonetheless, further studies need to be done to understand which mechanism affects this transition.Universidade de Aveiro2019-09-27T00:00:00Z2017-09-27T00:00:00Z2017-09-27info:eu-repo/semantics/publishedVersioninfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttp://hdl.handle.net/10773/22487engSilva, Michael Santosinfo:eu-repo/semantics/openAccessreponame:Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)instname:Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãoinstacron:RCAAP2024-02-22T11:44:08Zoai:ria.ua.pt:10773/22487Portal AgregadorONGhttps://www.rcaap.pt/oai/openaireopendoar:71602024-03-20T02:56:39.619664Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos) - Agência para a Sociedade do Conhecimento (UMIC) - FCT - Sociedade da Informaçãofalse |
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c-FLIP é uma proteína conhecida pela sua capacidade de se ligar ao DISC, onde compete com a procaspase-8 pela interação com FADD. No entanto, existem evidências que a sua isoforma longa consegue regular também o ciclo celular e mecanismos de proliferação. Para além disso, a atividade de c-FLIPL pode ser controlada por fosforilação. Assim, o objetivo deste estudo é perceber como a fosforilação no resíduo de serina 227 nesta proteína afeta a proliferação e ciclo celular. Neste estudo, observamos que a sobre-expressão de c-FLIPL com uma mutação de serina para alanina no resíduo 227 levou a uma diminuição da capacidade proliferativa dessas células. O uso de citometria de fluxo permitiu verificar este decréscimo na capacidade proliferativa, assim como uma acumulação de células na fase G1 do ciclo celular aquando da sobre-expressão de S227A c-FLIPL. Os resultados obtidos sugerem que a sobre-expressão de c-FLIPL controla a população celular através da transição G1/S, através da sua fosforilação no resíduo 227. No entanto, mais estudos são necessários para se perceber a partir de qual mecanismo esta transição é afetada |
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