O papel da Progesterone Receptor Membrane Component 1 no metabolismo de fármacos mediado por Citocromo P450

• Autor(a) principal: Cardoso, Marisa Filipa Duarte
• Data de Publicação: 2019
• Tipo de documento: Dissertação
• Idioma: por
• Título da fonte: Repositório Científico de Acesso Aberto de Portugal (Repositórios Cientìficos)
• Texto Completo: http://hdl.handle.net/10362/75598
• topic: PGRMC1; Citocromo P450; NADPH-oxidoredutase dos citocromos P450; Citocromo b5; quimioresistência; Domínio/Área Científica::Engenharia e Tecnologia::Engenharia Química

A PGRMC1 (do inglês: Progesterone Receptor Membrane Component 1) é uma proteína heme multifuncional com um domínio estruturalmente idêntico ao citocromo b5 (CYB5). É uma proteína altamente conservada e amplamente distribuída ente organismos eucarióticos, localizada maioritariamente no retículo endoplasmático. Em mamíferos, é predominantemente expressa no fígado e rins, mas também se localiza noutros tecidos. É sobre expressa em tumores mamários e de ovário, resistentes à quimioterapia e tem surgido como um potencial biomarcador para a resistência a fármacos. Alguns estudos indicam que a PGRMC1 consegue interagir com o complexo enzimático do citocromo P450 (CYP), levantando a hipótese de que tem a capacidade de interferir no metabolismo de fármacos, de um modo semelhante ao CYB5. Os CYPs são hemeproteínas, localizadas no retículo endoplasmático, envolvidas na maior parte das reações de metabolização, representando cerca de 70% da metabolização de fármacos prescritos. A sua atividade é exclusivamente sustentada pela NADPH-oxidoredutase dos citocromos P450 (CPR), com um papel estimulador opcional pelo citocromo b5. Assim, esta dissertação teve como objetivo avaliar a interação da PGRMC1 com o complexo enzimático do CYP e o seu impacto no metabolismo mediado pelos CYPs. Para este fim, utilizou-se um modelo bacteriano biplasmídico que permite a co-expressão do complexo enzimático de CYP e, opcionalmente, da PGRMC1. Selecionou-se três isoformas de CYPs representativas do metabolismo de fármacos (CYP1A2, 2A6 e 3A4). Os resultados indicam interação entre a PGRMC1 e o complexo enzimático de CYP, que provoca um efeito inibitório ou estimulatório da atividade de CYP, conforme a conformação proteica da PGRMC1. Ainda, observou-se um efeito competitivo entre a PGRMC1 e o CYB5, sugerindo que competem para o mesmo local de ligação ao CYP e que existem diferentes sensibilidades do CYP para a PGRMC1, tal como ocorre com o CYB5. Também, foi possível observar que a CPR tem a capacidade de reduzir a PGRMC1, o que suporta a hipótese da CPR ser dadora natural de eletrões da PGRMC1.